重度子癇前期孕婦脂聯素及胎兒臍血流對圍產兒結局的預測

雷劉燕，周麗紅，吳曉薇，周淑君

(麗水市中心醫院婦產科，浙江 麗水 323000)

子癇前期是指妊娠前血壓正常的孕婦在妊娠20孕周后，以孕婦出現蛋白尿及高血壓為特征的妊娠期特發性疾病，其發病率可高達8%，是導致孕婦和胎兒死亡的重要因素，但其發病機制目前尚未明確[1]。有關文獻報道，脂聯素具有抗炎、改善機體胰島素抵抗、抗動脈粥樣硬化的作用，對重度子癇前期等多種疾病的發生發展具有一定的保護作用[2]。胎兒從母體獲取營養的唯一途徑是臍動脈，因此通過檢測臍動脈阻力指數(umbilical artery resistance index，UA-RI)、臍動脈搏動指數(umbilical artery pulsatility index，UA-PI)及臍動脈收縮期和舒張期血流比值(umbilical arterysystolic/diastolic ratio，UA-S/D)可充分了解胎盤-胎兒循環有無出現病變及病變嚴重程度。有關研究顯示，通過實時監測臍動脈超聲血流變化可顯著降低高危孕婦及圍產兒的死亡率[3]。因此，本研究對正常足月妊娠產婦和重度子癇前期孕婦的胎盤組織進行分析，旨在探討重度子癇前期孕婦胎盤組織脂聯素表達水平與胎兒臍動脈超聲血流指數對圍產兒結局的預測價值，為重度子癇前期的臨床診斷和治療提供重要的觀察指標及血流動力學判斷依據。

1資料與方法

1.1研究對象

隨機選取2015年6月至2017年1月在麗水市中心醫院就診的54例正常足月妊娠產婦為對照組，54例重度子癇前期孕婦為研究組。研究組納入標準：①孕婦符合重度子癇前期的相關診斷標準[4]；②單胎，年齡≥18歲；③自愿簽署知情同意書。排除標準：①妊娠前合并嚴重高血壓、糖尿病、冠心病等基礎疾病；②合并嚴重肝腎功能不全；③胎兒畸形或多囊卵巢綜合征者。對照組納入標準：于本院定期產檢，足月妊娠；單胎，年齡≥18歲。排除標準：伴有妊娠并發癥或合并癥；既往伴有嚴重急慢性疾病；伴有胎兒發育不全或先天性疾病等。

1.2研究方法

1.2.1收集資料及臍動脈血流的檢測

收集兩組孕婦的年齡、孕次、產次、分娩孕周、孕前身體質量指數(body mass index，BMI)及新生兒體重、身長、胎盤重量等資料。通過GE Vivid7彩色多普勒超聲儀監測兩組孕婦分娩前一天胎兒的臍動脈血流情況，探頭頻率為3.5MHz，取容積<2mm，臍動脈與脈沖多普勒取樣線間夾角為60°，選擇5個清晰脈沖頻，檢測胎兒的UA-RI、UA-PI、UA-S/D。

1.2.2胎盤的取材

于產婦娩出胎盤后切取一塊1.0cm×1.0cm×1.0cm的組織，采用0.9%NaCl溶液清洗干凈后，采用10%甲醛溶液固定，包埋，切片，用于檢測胎盤組織中脂聯素蛋白的表達水平。另切除一塊0.5cm×0.5cm×0.5cm的新鮮胎盤組織，采用0.9%NaCl溶液清洗干凈后，于-80℃的冰箱保存，用于檢測胎盤組織中脂聯素mRNA相對表達量。

1.2.3脂聯素蛋白表達的檢測

采用免疫組織化學法檢測胎盤組織中脂聯素蛋白的表達情況。通過兔抗人脂聯素多克隆抗體(由上海閃晶分子生物科技有限公司提供)對胎盤組織行SP染色。通過奧林巴斯熒光顯微鏡(由上海賴氏電子科技有限公司提供)采集照片。若滋養細胞中的細胞質或細胞膜呈現黃褐色顆粒或棕黃色顆粒為陽性表達。選擇5個視野觀測組織細胞，并計算平均光密度值。

1.2.4脂聯素mRNA表達的檢測

采用定量聚合酶聯反應(real-time polymerasechain reaction，PCR)檢測脂聯素蛋白mRNA的表達情況。通過RNA提取試劑(由深圳市康初源有限公司提供)提取總RNA，完成逆轉錄后，通過燃料法行定量PCR檢測。本研究中的各種引物均由北京萬生優達生物科技有限公司提供。以2-△△Ct值對目的基因相對表達量進行定量分析。

1.3統計學方法

2結果

2.1兩組孕婦和圍產兒的一般資料比較

研究組孕婦年齡、孕前BMI均較對照組高(均P<0.01)；研究組孕婦分娩孕周顯著低于對照組(P<0.01)；研究組胎盤重量、新生兒出生體重均較對照組低(均P<0.01)，身長較對照組短(P<0.01)；兩組的孕次、產次比較差異均無統計學意義(均P>0.05)，見表1。

2.2兩組胎兒臍動脈血流參數的比較

研究組UA-RI、UA-PI及UA-S/D均較對照組高(均P<0.01)，見表2。

表1 兩組孕婦和圍產兒一般資料的比較結果

表2 兩組胎兒臍動脈血流參數的比較結果

2.3兩組孕婦胎盤組織中脂聯素mRNA、蛋白表達的比較

研究組孕婦胎盤組織中脂聯素mRNA和蛋白表達水平均較對照組明顯升高(均P<0.01)，見表3。

表3 兩組孕婦胎盤組織中脂聯素mRNA和蛋白表達的比較結果

2.4相關性分析

研究組脂聯素mRNA表達量與發病孕周、新生兒出生體重及分娩孕周均呈負相關(均P<0.01)，與UA-S/D及孕前BMI均呈正相關(均P<0.01)，見表4；研究組UA-S/D與發病孕周、新生兒出生體重及分娩孕周均呈負相關(均P<0.01)，見表5。

表4 脂聯素mRNA表達量的相關性分析

表5 UA-S/D的相關性分析

3討論

3.1子癇前期的病理機制

關于子癇前期的病理機制目前雖尚未明確，然而有研究指出子宮動脈擴張障礙及滋養細胞侵入不足均可增加子宮胎盤循環阻力，導致胎盤灌注不足，出現缺血缺氧的情況，降低系統性血管內皮功能，出現高血壓、蛋白尿等臨床癥狀[5]。

3.2脂聯素與重度子癇前期發病的相關性

脂聯素是一種存在于脂肪組織且含量豐富的蛋白因子，對妊娠期孕婦具有較好的保護作用，同時具有抗炎、改善機體胰島素抵抗、抗動脈粥樣硬化的作用，其在脂肪酸氧化與血糖代謝等過程中發揮著重要作用[6]。由于子癇前期與血管內皮炎癥反應、損傷及胰島素抵抗等關系密切，故脂聯素可作為研究子癇前期發病機制的重要蛋白因子之一。有關文獻報道，通過脂聯素可誘導一氧化氮及血管內皮氧化酶的分泌，參與到子癇前期的發病過程中，而24孕周至孕足月期間，臍血中脂聯素的表達水平顯著高于母血，可見脂聯素的主要來源是胎盤[7]。

本研究發現，兩組的脂聯素蛋白在胎盤組織絨毛細胞中均有表達，且主要分布在胎盤絨毛滋養層細胞中，但是研究組孕婦胎盤組織中脂聯素蛋白表達量(0.34±0.11)較對照組(0.11±0.03)高，推測與緩解機體內炎癥反應相關。研究組孕婦胎盤組織中脂聯素mRNA表達量(4.12±1.33)較對照組(1.09±0.32)高，可見脂聯素高表達于重度子癇前期孕婦胎盤組織中。有研究報道，當重度子癇前期患者的血清脂聯素下降時，可有效提高其生存率[8]。另有研究發現，重度子癇前期患者的血清脂聯素是上升的，這是由于患者為降低機體內堆積過多脂肪產生的一種應激反應[9]。本研究發現，研究組脂聯素mRNA表達量與發病孕周、新生兒出生體重及分娩孕周均呈負相關，與UA-S/D及孕婦BMI均呈正相關，其原因可能是脂聯素誘導胎盤組織分泌相應的受體，調節葡萄糖代謝機制，改善胰島素抵抗，從而影響宮內胎兒的生長發育。

3.3臍動脈超聲血流指數異常與重度子癇前期發病的相關性

重度子癇前期是造成圍產兒不良結局的致病因素之一。目前臨床上主要通過彩色多普勒超聲檢測胎兒臍動脈血流情況，以加強對重度子癇前期圍產兒的監測，減少剖宮產、引產的發生率，提高圍產兒的生存率。目前臨床上主要通過檢測UA-RI來評估胎盤血流灌注情況。本研究通過檢測胎兒UA-RI、UA-PI、UA-S/D來監測臍動脈血流情況，發現研究組的UA-RI、UA-PI及UA-S/D均較對照組高，且研究組脂聯素mRNA表達量與UA-S/D及孕婦BMI均呈正相關；研究組UA-S/D與發病孕周、新生兒出生體重及分娩孕周均呈負相關，其原因可能是子癇前期損傷血管內皮功能，引發胎盤絨毛小動脈發生痙攣、血管腔狹窄、水腫及梗死，導致胎盤絨毛毛細血管面積顯著下降，影響胎盤的正常功能，減少了臍動脈舒張末期血流量，使UA-RI升高，引發子宮肌層及蛻膜層血管硬化，進而出現大片胎盤絨毛水腫及胎盤小葉梗死，減少營養供給，從而影響宮內胎兒的生長發育。

綜上所述，重度子癇前期孕婦胎盤組織的脂聯素mRNA、蛋白表達量及胎兒臍動脈超聲血流指數均顯著增加，提示圍產兒產生不良結局幾率較大。重度子癇前期孕婦分娩孕周較正常妊娠孕婦明顯下降，而胎兒臍動脈超聲血流指數與孕周密切相關。因此胎兒臍動脈超聲血流指數異常是因重度子癇前期孕婦孕周下降引起的，亦或是因重度子癇前期的發病而引起，目前仍未完全明確，需今后排除孕周的影響以進一步分析。