原發性血小板增多癥對血小板功能和血栓形成的影響及奧扎格雷鈉預防血栓的臨床效果

李嵐 高瑛 張維華 侯麗敏 高秋英

[摘要] 目的 研究原發性血小板增多癥（ET）患者血小板功能的變化和對血栓形成的影響，分析奧扎格雷鈉對血栓的預防作用。 方法 選擇2014年9月～2017年9月陜西省人民醫院（以下簡稱“我院”）收治的32例ET患者為研究對象，按隨機數字表法分為兩組，每組各16例。常規組采用常規治療患者作為常規組，研究組患者在常規治療的基礎上給予奧扎格雷鈉治療。另選取20名同期來我院進行健康體檢的健康志愿者作為對照組。觀察三組對象P選擇素（CD62P）、抗纖維蛋白原受體單抗（PAC-1）、血栓素（TXB2）、6-酮-前列腺素1α（6-keto-PGF1α）水平以及血栓形成情況。 結果 治療前常規組和研究組CD62P、PAC-1、TXB2及6-keto-PGF1α水平比較，差異無統計學意義（P > 0.05），但均明顯高于對照組（P < 0.05）。治療后研究組CD62P、PAC-1、TXB2及6-keto-PGF1α水平明顯低于常規組，但仍然高于對照組，差異有統計學意義（P < 0.05）。常規組、研究組治療后CD62P、PAC-1、TXB2以及6-keto-PGF1α水平均低于治療前，差異有統計學意義（P < 0.05）。研究組血栓形成率僅為6.25%，明顯低于對照組的18.75%，差異有統計學意義（P < 0.05）。 結論 ET患者血小板功能及活性等指標明顯異于健康人群，且血栓發生率明顯升高。奧扎格雷鈉可明顯改善ET患者血小板情況，促進治療效果，降低血栓發生率，值得臨床應用及推廣。

[關鍵詞] 原發性血小板增多癥;血小板;血栓;奧扎格雷鈉

[中圖分類號] R558.3? ? ? ? ? [文獻標識碼] A? ? ? ? ? [文章編號] 1673-7210（2019）07（b）-0145-04

Effects of primary thrombocytosis on platelet function and thrombus formation and the clinical effect of Sodium Ozagrel in preventing thrombus

LI Lan? ?GAO Ying? ?ZHANG Weihua? ?HOU Limin? ?GAO Qiuying

Department of Hematology， Shaanxi Provincial People′s Hospital， Shaanxi Province， Xi′an? ?710068， China

[Abstract] Objective To study the changes of platelet function and its effect on thrombosis in patients with essential thrombocytosis （ET）， and to analyze the effect of Sodium Ozagrel on thrombosis prevention. Methods Thirty-two patients with ET admitted to Shaanxi Provincial People′s Hospital （"our hospital" for short） from September 2014 to September 2017 were enrolled as the study object， and they were divided into two groups by random number table， 16 cases in each group. Patients in routine group were treated with routine therapy， while patients in study group were treated with Ozagrel Sodium on the basis of routine treatment. Another 20 healthy volunteers who received physical examination in our hospital during the same period were selected as control group. The levels of P-selectin （CD62P）， anti-fibrinogen receptor monoclonal antibody （PAC-1）， thromboxane B2 （TXB2）， 6-keto-prostaglandin F1α （6-keto-PGF1α） and thrombosis rate of three groups were observed. Results Before treatment， there were no differences in levels of CD62P， PAC-1， TXB2 and 6-keto-PGF1α between the routine group and study group （P > 0.05）， but they were significantly higher than those of the control group， the differences were statistically significant （P < 0.05）. After treatment， the levels of CD62P， PAC-1， TXB2 and 6-keto-PGF1α in the study group were significantly lower than those in the routine group， but still higher than those in the control group， the differences were statistically significant （P < 0.05）. The thrombosis rate in the study group was only 6.25%， which was significantly lower than 18.75% in the control group， the difference was statistically significant （P < 0.05）. Conclusion The indexes of platelet function and activity in ET patients are significantly different from those in healthy person， and the incidence of thrombosis is significantly increased. Sodium Ozagrel can significantly improve the platelet status of ET patients， promote the therapeutic effect and reduce the incidence of thrombosis， which is worthy of clinical application and promotion.

[Key words] Thrombocythemia major; Platelet; Thrombus; Sodium Ozagrel

原發性血小板增多癥（essential thrombocytosis，ET）是骨髓增殖性疾病，具體發病機制尚不明確，多數研究認為與JAK-2基因V617突變有關[1-2]。臨床上ET發病隱匿，進展緩慢，患者早期無任何臨床癥狀，僅在發生血栓或血細胞計數明顯升高時被發現[3]。臨床表現為反復血栓，多見于四肢血栓，嚴重者甚至引起心、腦、肺、腎等重要器官血栓，導致血小板計數明顯升高，功能異常[4-5]。目前，臨床上對ET患者血小板的功能關注較少，因此在對ET患者治療時往往忽視血栓的形成和預防。但在目前數據中統計顯示[6]，血栓是ET患者最常見的并發癥之一，除了血小板計數明顯升高以外，血小板的功能也明顯發生改變[7]。因此，觀察ET患者血小板功能的變化以及如何預防ET患者的血栓形成是臨床研究的熱點。本文通過對陜西省人民醫院（以下簡稱“我院”）收治的ET患者進行研究，分析患者P選擇素（CD62P）、抗纖維蛋白原受體單抗（PAC-1）、血栓素（TXB2）以及6-酮-前列腺素1α（6-keto-PGF1α）水平，觀察ET患者血小板功能變化情況，分析血栓的預防措施，現報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2014年9月～2017年9月我院收治的32例ET患者為研究對象，納入標準：①符合ET診斷標準[8];②年齡30～80歲;③自愿參加本次研究。排除標準：①心肺功能、腎功能不全;②對本研究用藥過敏的患者;③存在其他嚴重疾病對研究造成影響的患者。按隨機數字表法將32例ET患者分為兩組，每組各16例。其中，常規組中男9例，女7例;年齡38～75歲，平均（56.8±4.4）歲。研究組中男8例，女8例;年齡35～76歲，平均（56.4±4.5）歲。另納入20名同期來我院行健康體檢的健康志愿者作為對照組，其中男10名，女10名;年齡34～79歲，平均（56.9±4.5）歲。三組對象性別、年齡比較，差異無統計學意義（P > 0.05），具有可比性。本研究經我院醫學倫理委員會批準通過，所有研究對象均自愿參加本次研究。

1.2 治療方法

常規組患者給予常規治療，給予羥基脲（齊魯制藥有限公司，規格：0.5 g/片，產品批號：20140909）、干擾素[商品名：干復津，日本安斯泰來制藥株式會社，規格：9 μg/（0.3 mL·支），注冊證號S20020002，產品批號：20140820]，以及阿司匹林（上海信誼百路達藥業有限公司，規格：25 mg/片，產品批號：20141209）治療。研究組在常規組基礎上加用奧扎格雷鈉（山東華魯制藥有限公司，規格：100 mL/瓶，產品批號：20141024），160 mg加入生理鹽水靜脈滴注，1次/d。兩組患者均連續治療2周。

1.3觀察指標

觀察三組CD62P、PAC-1、TXB2以及6-keto-PGF1α水平以及血栓形成率情況。

1.3.1 試劑與儀器? 由美國BD公司生產的流式細胞儀，美國BD公司提供的異硫氰酸熒光素（FITC）標記的單克隆抗體PAC-1 FITC和藻紅蛋白（PE）標記的單克隆抗體CD62P-PE。

1.3.2 標本采集及檢測方法? 采集三組對象空腹晨靜脈血3 mL，將樣本注入抗凝管中搖勻，另準備2支流式試管，一支裝入10 μL FITC標記的單克隆抗體PAC-1 FITC，另一支裝入10 μL藻紅蛋白（PE）標記的單克隆抗體CD62P-PE。分別于2支試管中注入標本10 μL，搖勻后置入室溫暗處反應15 min，再加入1 mL PBS懸浮，采用流式細胞儀檢測CD62P和PAC-1水平。再次采集三組對象空腹晨靜脈血3 mL，將血液樣本置入含有消炎痛-EDTA-二鈉40 μL的試管中，混勻后離心機旋轉離心，離心半徑100 mm，離心溫度2～8℃，3000 r/min離心15 min后分離血漿，采用放射免疫法測定TXB2以及6-keto-PGF1α水平。

1.4 統計學方法

采用SPSS 18.0統計學軟件進行數據分析，計量資料用均數±標準差（x±s）表示，多組間比較采用方差分析，兩組間比較采用SNK-q檢驗;計數資料用率表示，組間比較采用χ2檢驗。以P < 0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 三組對象各項指標比較

治療前兩組患者CD62P、PAC-1、TXB2及6-keto-PGF1α水平比較，差異無統計學意義（P > 0.05）;但均明顯高于對照組，差異有統計學意義（P < 0.05）。治療后研究組上述指標水平明顯低于常規組，但仍然高于對照組，差異有統計學意義（P < 0.05）。常規組、研究組治療后CD62P、PAC-1、TXB2以及6-keto-PGF1α水平均低于治療前，差異有統計學意義（P < 0.05）。見表1。

2.2 兩組患者血栓形成率比較

研究組血栓形成率僅為6.25%（1例），明顯低于對照組的18.75%（3例），差異有統計學意義（χ2=7.143，P < 0.05）。

3 討論

血小板是人體血液中重要的成分之一，健康正常人的血液中血小板基本處于靜息狀態，但在生理或病理血栓狀態下，受到各種因素的影響，血液中的血小板受到各種因素影響從而發生不可逆性活化，則會導致血小板與纖維蛋白原聚集，引起動脈血栓，導致血管閉塞，最終使患者發生血栓[9-10]。

目前ET患者出現血栓的具體機制尚未完全明確，但人們認為與血小板功能及數量的異常有明顯關系[11]。本文對我院ET患者血小板的功能變化進行研究，觀察較為穩定的TXB2和6-keto-PGF1α水平，以評估TXA2和前列環素（PGI2）水平。結果顯示，治療后研究組CD62P、PAC-1、TXB2以及6-keto-PGF1α水平明顯低于常規組，但與對照組仍然略有差距。而研究組血栓形成率僅為6.25%，明顯低于常規組的18.75%，提示ET患者血小板功能較常人發生變化，且血栓形成率明顯升高，但經過奧扎格雷鈉治療后，可有效改善血小板功能，減少血栓的形成，達到較好效果。CD62P是血小板膜上的一種糖蛋白，成為血小板活化依賴性顆粒性膜蛋白，位于血小板α顆粒及內皮細胞的Weibel-Palade小體中，在內皮細胞或血小板活化時，CD62P則有α顆粒上轉至血小板膜表面，因此CD62P成為活化血小板的標志物之一[12-13]。PAC-1是早期活化血小板的標志物之一，由GPⅡb/Ⅲa復合而成，是血小板活化的靈敏指標，常被臨床用于血栓疾病的檢測和評估[14]。TXA2主要由白細胞和血小板分泌而成，是血小板中花生四烯酸的主要代謝產物，具有強烈收縮血管的作用，促進血小板聚集作用[15]。PGI2則是由血管內皮細胞分泌，是一種強烈的血管擴張因子和血小板聚集抑制劑[16]。在健康人體內，TXA2和PGI2處于平衡狀態，當TXA2和PGI2平衡失調時，則會導致血管痙攣，血栓形成[17]。但TXA2和PGI2在體內極其不穩定，不易檢測[18]。TXA2經過30 s后代謝為穩定的TXB2，PGI2經過3 min后則會代謝為較為穩定的6-keto-PGF1α[19]。有學者研究發現[20]，TXA2與PGI2在凝血功能中起著重要作用，而PT患者的TXA2與PGI2指標均高于正常人群，因此具有發生血栓的潛在風險。

綜上所述，ET患者血小板功能及活性等指標明顯異于健康人群，且血栓發生率明顯升高。奧扎格雷鈉可明顯改善ET患者血小板情況，促進治療效果，降低血栓發生率，值得臨床應用及推廣。

[參考文獻]

[1]? 謝曉玲.老年原發性血小板增多癥患者Jak2基因v617f點突變檢測的臨床意義[J].中國老年學雜志，2017，37（18）：4614-4615.

[2]? 楊娣娣，韓秀蕊，趙園，等.原發性血小板增多癥骨髓病理及JAK2-V617 F突變分析[J].現代腫瘤醫學，2016，24（19）：3108-3111.

[3]? 付榮鳳，劉曉帆，劉葳，等.125例中國年輕原發性血小板增多癥患者的臨床特點及預后分析[J].中國實驗血液學雜志，2017，25（3）：837-842.

[4]? 陳沫，侯麗君，劉增香，等.原發性血小板增多癥患者的預后和生存分析[J].中國實驗血液學雜志，2017，25（2）：510-516.

[5]? Finazzi G，Carobbio A，Thiele J，et al. Incidence and risk factors for bleeding in 1104 patients with essential thrombocythemia or prefibrotic myelofibrosis diagnosed according to the 2008 WHO criteria [J]. Leukemia，2012，26（4）：716-719.

[6]? 李小妮.151例低危原發性血小板增多癥患者的臨床特點和血栓危險因素相關分析[J].內科急危重癥雜志，2016， 22（5）：379-380.

[7]? 雷瑚儀，韓素芳.阿司匹林對老年原發性血小板增多癥血小板活化及血液流變學的影響[J].中國現代醫學雜志，2015，25（11）：94-96.

[8]? 吳明正，周澤平，文靜，等.原發性血小板增多癥的危險分層與治療進展[J].實用醫學雜志，2015，31（17）：2920-2921.

[9]? 吳艷麗，盧岑，梁志偉，等.治療性血小板清除術治療原發性血小板增多癥1例[J].血栓與止血學，2015，21（6）：412-413.

[10]? 車菲菲，王曉冬，萬純黔，等.原發性血小板增多癥鈣網蛋白基因突變及與臨床特征的關系[J].血栓與止血學，2016，22（5）：524-526.

[11]? 葛振嶸，李秀芬.急性冠脈綜合征合并繼發性血小板增多癥患者血栓事件的預防及治療[J].中國全科醫學，2016， 19（14）：1719-1721.

[12]? 陳榮華.阿司匹林對老年原發性血小板增多癥血小板活化及血液流變學的影響[J].臨床研究，2016，24（11）：13-14.

[13]? Barbui T，Finazzi G，Carobbio A，et al. Development and validation of an International Prognostic Score of thrombosis in World Health Organization-essential thrombocythemia （IPSET-thrombosis） [J]. Blood，2012，120（26）：5128-5133，5252.

[14]? 彭育紅.CALR基因突變引起的原發性血小板增多癥合并急性心肌梗死1例[J].中華老年多器官疾病雜志，2017，16（5）：379-380.

[15]? Campregher PV，Santos FP，Perini GF，et al. Molecular biology of Philadelphia-negative myeloproliferative neoplasms [J]. Rev Bras Hematol Hemoter，2012，34（2）：150-155.

[16]? 付榮鳳，李慧媛，薛峰，等.修訂版國際血栓預測模型（IPSET）在746例中國成人原發性血小板增多癥患者中的應用評價[J].中華血液學雜志，2017，38（2）：92-96.

[17]? 崔智勇，段金玲，聶彥博，等.阿那格雷和羥基脲在治療原發性血小板增多癥中血栓形成風險的Meta分析[J].臨床內科雜志，2016，33（11）：759-762.

[18]? 劉宇宏，劉卉.以血栓為首發表現的青年原發性血小板增多癥6例臨床分析[J].血栓與止血學，2016，22（1）：77-78.

[19]? 何深，匡霞.以血栓為首發的原發性血小板增多癥33例臨床分析[J].中國現代藥物應用，2015，9（14）：42-43.

[20]? 廖彩翔.干擾素聯合阿司匹林在ET維持治療中的應用分析[J].河北醫學，2017，23（3）：504-508.