ENA多肽抗體免疫功能檢測在自身免疫性疾病診斷中的應用價值

裴洪利

【摘要】 目的 探討可溶性核抗原（ENA）多肽抗體免疫功能檢測在自身免疫性疾病（AID）中的應用價值。方法 198例AID患者， 其中系統性紅斑狼瘡（SLE）99例， 類風濕關節炎（RA）45例， 干燥綜合征（SS）24例， 混合性結締組織病（MCTD）12例， 系統性硬化癥（PSS）8 例， 自身免疫性肝炎（AIH）6例， 特發性血小板減少性紫癜（ITP）4例。另選取40例健康體檢者作為對照組， 均進行ENA多肽抗體免疫功能檢測。觀察不同類型AID患者及對照組不同抗原IgG類抗體的免疫功能檢測結果。結果 SLE患者的抗核小體抗體（抗NKS）陽性檢出率為96.97%（96/99）， RA患者的抗組蛋白抗體（抗His）陽性檢出率為46.67%（21/45）， SS患者的抗干燥綜合征A抗體（抗SS-A）陽性檢出率為66.67%（16/24）， MCTD患者的抗SS-A陽性檢出率為58.33%（7/12）， PSS患者的抗硬皮病抗原70抗體（抗Scl-70）陽性檢出率為62.50%（5/8）， AIH患者的抗SS-A陽性檢出率為50.00%（3/6）， ITP患者的抗Scl-70陽性檢出率為75.00%（3/4）。結論 ENA多肽抗體免疫功能檢測可以作為AID的重要篩查手段， 尤其是NKS、SS-A、Scl-70抗體的應用敏感度更高。

【關鍵詞】 自身免疫性疾病;可溶性核抗原多肽抗體免疫功能檢測;可溶性核抗原

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2019.23.037

自身免疫性疾病（autoimmune disease， AID）是一種由免疫反應引發的機體相關組織受到功能障礙或損害的疾病， 目前醫學界普遍認為AID的發病機制與自身抗原發生改變、免疫調節異常、交叉抗原和遺傳因素有著密不可分的關系[1]。臨床上針對AID的診斷多以相關免疫功能檢測為主， 但由于該病可表現為多種疾病類型， 不僅各類型之間具有不同的特異性， 同時機體會產生不同抗原類型抗體， 但目前此方面相關研究較少[2]。本研究旨在通過分析不同類型的AID患者免疫功能檢測結果， 探討其診斷意義， 為臨床診斷和治療提供指導， 現報告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選取2017年1月～2018年12月本院檢驗科進行ENA多肽抗體免疫功能檢測的198例AID患者， 納入標準：①結合病史、臨床診斷后通過抗體檢測確診為AID[3];②年齡20～70歲;③意識清晰， 擁有一定的理解和認知能力;④臨床資料完整。排除標準：①哺乳期以及妊娠期或計劃6個月內妊娠;②心、肝、腎功能障礙或不全;③入組前已接受相關治療;④存在血液性疾病或惡性腫瘤病史。所有患者中， 男73例， 女125例;年齡26～65歲， 平均年齡（46.82±8.54）歲;其中20～30歲18例， 31～40歲36例， 41～50歲52例， 51～60歲53例， >60歲39例;疾病類型：SLE 99例， RA 45例， SS 24例， MCTD 12例， PSS 8 例， AIH 6例， ITP 4例。另選取同期的健康體檢者40例作為對照組。

1. 2 方法 ①所有患者取清晨空腹靜脈血5 ml， 以2500 r/min

的速率進行離心5 min， 分離血清， 置于非抗凝真空管內按照1∶100的比例進行稀釋血清備用。②采用蛋白免疫印跡法和相關試劑盒（深圳市亞輝龍生物科技有限公司）進行ENA多肽抗體免疫功能檢測， 取出抗原膜條和孵育緩沖液1 ml置入試劑反應槽， 待抗原膜條完全浸濕后1 min加入稀釋血清樣本1 ml， 在約25℃的室溫下通過搖床進行孵育30 min后加入稀釋洗滌劑1.5 ml進行反復洗滌3次以去除未結合的蛋白， 洗滌時間約5 min/次， 加入稀釋過山羊抗辣根過氧化物酶（稀釋比例1∶100）再次孵育30 min、反復洗滌3次后加入四甲基聯苯胺（TMB）底部溶液充分反應后使用蒸餾水進行沖洗， 將抗原膜條置入濾紙中等待干燥后與試劑盒配套的特異判讀卡進行比較， 比較抗核糖核蛋白抗體（抗nRNP）、抗Smith抗體（抗Sm）、抗Scl-70、抗SS-A、抗干燥綜合征B抗體（抗SS-B）、抗多發性肌炎-硬化癥抗體（抗PM-Scl）、抗多發性肌炎/皮肌炎標記抗體（抗JO-1）、抗雙鏈脫氧核糖核酸抗體（抗dsDNA）、抗增殖細胞核抗原抗體（抗PCNA）、抗著絲點蛋白B抗體（抗CENP-B）、抗NKS、抗核糖體P蛋白抗體（抗Rib-P）、抗His和抗線粒體抗體-M2亞型（AMM-M2）共14種不同抗原免疫球蛋白G（IgG）類抗體的免疫功能檢測結果。

1. 3 觀察指標 觀察不同類型AID患者及對照組不同抗原IgG類抗體的免疫功能檢測結果。

2 結果

SLE患者的抗NKS陽性檢出率為96.97%（96/99）， RA患者的抗His陽性檢出率為46.67%（21/45）， SS患者的抗SS-A陽性檢出率為66.67%（16/24）， MCTD患者的抗SS-A陽性檢出率為58.33%（7/12）， PSS患者的抗Scl-70陽性檢出率為62.50%（5/8）， AIH患者的抗SS-A陽性檢出率為50.00%（3/6）， ITP患者的抗Scl-70陽性檢出率為75.00%（3/4）。見表1。

3 討論

AID根據臨床表現而不同可分為器官特異性AID和系統性AID， 后者多由于機體的抗原抗體長期在血管壁內沉積等原因導致多器官發生膠原纖維增生從而受損， 常見的類型包括SLE、RA、系統性血管炎（SV）、SS、MCTD、PSS、皮肌炎（DM）、AIH和ITP等， 如未得到及時治療會導致病情發展迅速， 誘發多種并發癥， 對患者的生活質量帶來嚴重影響， 致殘率和致死率均較高[4]。

抗ENA抗體具體可分為可溶于等滲鹽水的抗原（主要包括nRNP、Sm、Scl-70、SS-A、SS-B、PM-Scl、JO-1等）和不可溶于等滲鹽水的抗原（主要包括dsDNA、PCNA、CENP-B、NKS、Rib-P、His、AMA-M2等）兩種IgG類抗體[5]。本研究通過對198例不同類型AID患者及40例對照組進行不同抗原IgG類抗體的免疫功能檢測發現， SLE患者的抗NKS陽性檢出率為96.97%（96/99）， RA患者的抗His陽性檢出率為46.67%（21/45）， SS患者的抗SS-A陽性檢出率為66.67%（16/24）， MCTD患者的抗SS-A陽性檢出率為58.33%（7/12）， PSS患者的抗Scl-70陽性檢出率為62.50%（5/8）， AIH患者的抗SS-A陽性檢出率為50.00%（3/6）， ITP患者的抗Scl-70陽性檢出率為75.00%（3/4）。上述結果說明， 不同類型AID患者的抗體特異性指標不同， 這是由于抗體滴度與疾病活動性有關， 據劉萍[6]的研究證實， AID患者具有多種自身抗體， 進行ENA抗體檢測能為病情的診斷和鑒別提供重要依據， 其結果與本研究結果基本一致。

綜上所述， ENA多肽抗體免疫功能檢測可以作為AID的重要篩查手段， 尤其是NKS、SS-A、Scl-70抗體的應用敏感度更高。

參考文獻

[1] 夏金金， 汪濤. 自身免疫性疾病發病機制新進展. 國際免疫學雜志， 2016， 39（2）：193-198.

[2] 周蓮， 符明昌， 羊文芳. 抗核抗體和抗核抗體譜聯合檢測診斷自身免疫性疾病的臨床價值. 海南醫學， 2016， 27（18）：2965-2968.

[3] 高仕萍， 楊文勇， 資云菊， 等. 抗核抗體和抗核抗體譜聯合檢測在自身免疫性疾病診斷中的臨床應用價值. 檢驗醫學與臨床， 2014， 11（2）：222-223.

[4] 辛雪亭， 楊春曉. 自身免疫性疾病研究進展. 中華神經醫學雜志， 2016， 15（1）：105-107.

[5] 陳水綿， 俞翀曌， 李恩靈， 等. 自身免疫性疾病患者及健康體檢者自身抗體相關實驗室指標分析. 檢驗醫學， 2018， 33（1）：31-36.

[6] 劉萍. 3578例ANA、dsDNA和ENA抗體譜聯合檢測結果分析. 西南國防醫藥， 2016， 26（5）：559-561.

[收稿日期：2019-05-24]