Quechers前處理法-超高效液相色譜-串聯質譜法測定荔枝中14種農藥殘留

韋齡乾 潘喜芳 蔣揚柏 李麗燕

摘 要：本文旨在探究超高效液相色譜-串聯質譜法結合Quechers方法檢測荔枝中苯醚甲環唑、啶蟲脒、氟硅唑、噻蟲嗪等14種農藥殘留的效果。樣品經Quechers法凈化，以0.5mmol/L醋酸銨+0.01%甲酸水溶液-乙腈作為流動相梯度洗脫，shim-park XR-ODSⅢ，50mml×2.0mm，三重四極桿質譜選用多反應監測（MRM）掃描測定。檢測后顯示14種農藥在線性范圍內相關系數均大于0.9994，方法檢出限為0.02～0.04mg/kg。在低、中、高3個不同濃度水平添加的平均加標回收率為73.6%～110.4%，相對標準偏差為1.0%～4.7%。因此Quechers法適用于荔枝中農藥多殘留檢測，且具有分析簡單、速度快、靈敏度高的特點。

關鍵詞：Quechers;農藥殘留;超高效液相色譜-串聯質譜法;荔枝

欽州是中國的“中國荔枝之鄉”。其中欽州市靈山縣的荔枝是中國國家地理標志，每年6-8月份都產出大量各類品種的荔枝銷售至全國各地，為了保證荔枝的農藥殘留不超標，保障消費者食品安全，需要對荔枝進行大量的農藥殘留檢測，為了提高檢測效率和準確度，建立起一個科學、有效、快速的檢測方法意義重大。Quechers前處理方法，與固相萃取柱凈化法相比，具有提取速度快、溶劑用量少、樣品制備簡便等優點，在農藥殘留分析中得到越來越廣泛的應用。劉文靜、李雪、張嘉楠、張煜卓等人曾用過Quechers前處理方法檢測農藥殘留。以此，本文研究利用Quechers方法凈化，建立超高效液相色譜-串聯質譜法分析荔枝中14種農藥殘留。

一、材料與方法

1.儀器

超高效液相色譜儀串聯三重四極桿質譜（型號：LCMS-8040，SHIMADZU公司），XH-C旋渦混合器（金壇市醫療儀器廠），超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司），Millipore 明澈D24UV（默克化工有限公司），臺式高速離心機（Sigma3K15曦馬離心機有限公司），臺式微量離心機（賽默飛公司），攪拌機，高速分散機（IKA公司）。

2.試劑

苯醚甲環唑、啶蟲脒、氟硅唑、噻蟲嗪、噻嗪酮等14種農藥標準溶液來源于農業部環境保護科研監測所（天津），乙腈（HPLC，Tedia Company，），甲醇（HPLC，Tedia Company），乙酸銨（LC-MS級，CNW Technologies），氯化鈉、無水甲酸（LC-MS級，天津市光復科技有限公司），超純水（Millipore超純水機制備），微孔濾膜（0.22μm，Agela Technologies）。QuEChERS凈化管[50mgPSA+150mgMgSO4，島津技邇（上海）貿易有限公司]。

3.色譜-質譜條件

色譜條件：SHIMADZUC18柱子，色譜柱（Φ1.9μm，2.1mm×100mm）;柱溫：40℃，流速0.2mL/min;進樣量1μL;流動相A：0.5mmol/L醋酸銨+0.01%甲酸水溶液流動相B為乙腈;洗脫方式：梯度洗脫，有機相初始濃度為10%，4min有機相濃度50%，15min設置75%，17-20min設置95%。

質譜條件：電噴霧離子化離子模式：ESI;掃描模式：多反應監測（MRM）掃描方式;離子源接口電壓：ESI+，+4.5kV;ESI-，-3.5kV;霧化氣：氮氣：3L/min;干燥氣：氮氣15L/min;碰撞氣：氬氣;DL管溫度：250℃;加熱模塊溫度：450℃;對14種農藥單標溶液進行質譜參數優化，確定特征母離子和子離子，優化后的相關質譜參數見表1。

4.標準溶液的配置

用上述14種農藥以乙腈作為溶劑配制0.02mg/L、0.04mg/L、0.08μg/mL、0.12mg/L不同濃度的混合標準溶液作為試驗處理。

5.樣品前處理

準確稱取25.00g（精確至0.01g）勻漿后的荔枝樣品于100mL離心管中，加入50mL乙腈，5-7gNaCl，用高速分散機以12000r/min均質提取2min，以8000r/min高速離心5min;吸取上清液1.5mL置于QuEChERS凈化離心管[50mgPSA+150mgMgSO4]中渦旋1min，100000r/min離心5min;取上清液過0.22μm濾膜，濾液待測。

二、結果

1.14種農藥的線性范圍、相關系數、檢出限、定量限、TIC色譜圖

蔬菜、水果農藥最大殘留限量標準按照GB/T20769-2008的食品安全國家標準，食品中農藥最大殘留限量，描述方法進行相關測定，選擇0.02mg/L、0.04mg/L、0.08mg/L、0.12mg/L的14種混合農藥，每種濃度重復測定6次。結果顯示，結果14種農藥的相應含量范圍中其線性相關系數均超過0.9994;農藥定量限為0.02～0.08mg/kg，如表2所示，14種的農藥TIC色譜圖見圖1。

2.樣品檢測結果

本研究實驗樣品從本地荔枝種植合作社選取，抽取相同品種樣品2個，分別為A、B，A、B兩個樣品均設置空白對照以及3個加標回收，其中A樣品前處理按照GB/T20769-2008的標準方法執行，B樣品前處理按照Quechers法執行。最后樣品均在相同條件下的LCMS上進行檢測，結果顯示兩種前處理方法的檢測結果基本一致，平均回收率為73.6%～110.4%，相對標準偏差為1.0%～4.7%，如表3。

三、討論

采用Quechers前處理法，結合超高效液相色譜-串聯質譜法測定，建立了荔枝中14種農藥殘留的檢測方法。該方法前處理簡單、方便快速，具有良好的靈敏度、準確度和精密度，為荔枝中農藥殘留的快速分析檢測提供了方法參考依據。

參考文獻：

[1]劉文靜，黃彪，傅建煒，潘葳，等.Quechers前處理法-超高效液相色譜-串聯質譜法測定荔枝和葡萄中18種三唑類農藥殘留[J].農產品質量與安全.2019.（2）：44-61.

[2]李雪，氣相色譜-串聯質譜結合QuEChERS方法檢測蔬菜、水果中37種農藥殘留[J].食品安全導刊.2018.（6）：70-71.

[3]張嘉楠，曹秀梅，王愛卿，Quechers-超高效液相色譜-串聯質譜法測定果蔬中57種農藥殘留量[J]，2018，27（4）：60-65.

[4]張煜卓，于湛，李碩，王妍，應用QuEChERS技術與氣相色譜-串聯質譜法同時檢測南果梨中16種農藥殘留[J]，現代預防醫學，2019，46（2）：327-331.