徐 姍,胡 楠
1)南京醫科大學附屬常州第二人民醫院藥學部江蘇常州213000 2)常州市第一人民醫院藥劑科江蘇常州213000
心肌缺血再灌注損傷是指冠狀動脈阻塞后在一定時間又重新恢復血流時,缺血心肌雖恢復正常灌注,但組織損傷加重的病理過程。心肌缺血再灌注損傷往往造成心肌超微結構破壞、心功能障礙等,甚至可發生嚴重的心律失常而導致猝死[1]。目前普遍認為心肌缺血再灌注損傷的主要機制是氧化應激和炎癥反應[2]。其中,活性氧(reactive oxygen species,ROS)生成過多以及清除不足是發生氧化應激反應的主要因素[3]。NF-κB是一種轉錄調控因子,通過調控多種細胞因子、趨化因子、生長因子等的表達引起炎癥反應。而Toll樣受體4(toll-like receptor-4,TLR-4)作用于 NF-κB的上游調控因子,能夠激活NF-κB引起一系列炎癥反應,導致心肌細胞損傷及凋亡。鐵皮石斛多糖具有良好的抗氧化、抗炎、調節免疫等作用[4]。本實驗通過構建心肌細胞缺氧/復氧損傷模型模擬在體心肌缺血再灌注損傷,并以不同質量濃度的鐵皮石斛多糖干預細胞,觀察細胞存活率、凋亡率、NF-κB p65及TLR-4蛋白表達的變化,旨在進一步探究鐵皮石斛多糖對心肌缺血再灌注損傷保護作用的機制。
1.1 細胞及試劑 H9c2大鼠心肌細胞(中國科學院上海生命科學學院研究所細胞資源中心);DMEM培養基、胎牛血清(美國HyClone公司);胰蛋白酶(杭州四季青生物工程有限公司);鐵皮石斛多糖標準品(珍貴瀕危藥材湖南省工程研究中心,純度≥98%),用含體積分數10%胎牛血清的……