RNU12 siRNA轉(zhuǎn)染對EC9706細(xì)胞生物學(xué)特性的影響

莫 靚，韋 兵，賀大璞，聶 軍，梁任技，陽 志，謝首智，吳生榮

南華大學(xué)附屬第一醫(yī)院胸外科湖南衡陽421001

食管癌是全球范圍內(nèi)高發(fā)的消化道惡性腫瘤，嚴(yán)重危害人類健康和生命［1］。食管癌早期缺乏特異性癥狀且缺少可靠的診斷標(biāo)志物，大部分食管癌患者確診時已處于中晚期，失去了最佳手術(shù)時機(jī)，導(dǎo)致其5 a生存率不足10%［2］。食管癌細(xì)胞的惡性增殖以及侵襲和轉(zhuǎn)移是導(dǎo)致患者預(yù)后不良的主要原因［3］，因此有效抑制食管癌細(xì)胞增殖、侵襲和遷移等惡性生物學(xué)行為，尋找潛在的診斷標(biāo)志和治療靶點(diǎn)，對食管癌的治療具有非常重要的意義。長鏈非編碼RNA(long non-coding RNA，LncRNA)是一種不編碼蛋白質(zhì)、長度＞200 nt的RNA，參與調(diào)控基因的轉(zhuǎn)錄、翻譯及染色質(zhì)修飾。目前研究［4-5］表明，LncRNA的紊亂表達(dá)與多種腫瘤的發(fā)生和發(fā)展密切相關(guān)。Liu等［6］的初步研究發(fā)現(xiàn)，LncRNA RNU12在食管癌組織中異常高表達(dá)。陳施翰等［7］的研究發(fā)現(xiàn)，LncRNA RNU12通過在轉(zhuǎn)錄水平上促進(jìn)熱休克蛋白72的表達(dá)，抑制重組人TNF相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體TRAIL蛋白的表達(dá)，從而誘導(dǎo)肝癌MHCC97-H細(xì)胞凋亡。但目前關(guān)于RNU12在食管癌中的作用知之甚少。因此，本研究旨在探討RNU12在人食管癌EC9706細(xì)胞中的表達(dá)水平以及干擾RNU12的表達(dá)對EC9706細(xì)胞生物學(xué)特性的影響，以期為食管癌的診治提供潛在的分子靶點(diǎn)。

1 材料與方法

1．1 材料 人食管鱗癌EC9706細(xì)胞株和人正常食管上皮細(xì)胞株HEEC購自中國科學(xué)院上海生命科學(xué)研究院細(xì)胞庫，RPMI 1640培養(yǎng)基、胎牛血清購自美國Gibco公司，胰蛋白酶、二甲基亞砜購自美國HyClone公司，Trizol抽提 RNA試劑、反轉(zhuǎn)……