NLR和RDW在小兒高熱驚厥中的表達(dá)及其與T淋巴細(xì)胞水平的相關(guān)性研究

盧一斌，劉占利，馬效東

(1.浙江省杭州市余杭區(qū)第三人民醫(yī)院兒科 311115；2浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬杭州市第一人民醫(yī)院兒科，杭州 311000)

小兒高熱驚厥(febrile convulsion,FC)是一種具有典型年齡性特征的疾病，主要好發(fā)于小兒時(shí)期，是一種常見的急癥[1]。小兒FC分為兩種，單純型及復(fù)雜型，絕大部分的小兒FC為單純型，預(yù)后良好，并不會(huì)對(duì)小兒的生長(zhǎng)發(fā)育產(chǎn)生不良影響；僅有少部分的小兒屬于復(fù)雜型FC，會(huì)出現(xiàn)后遺癥，但反復(fù)的FC或持續(xù)性的FC就可能會(huì)造成小兒腦部受損，甚至引發(fā)癲癇[2]。因此，如何簡(jiǎn)單、及時(shí)、有效的區(qū)分小兒FC的臨床分型，進(jìn)而盡早給予患兒有效干預(yù)，對(duì)改善患兒的預(yù)后具有十分積極的意義。中性粒細(xì)胞/淋巴細(xì)胞比值(neutrophil/lymphocyte ratio,NLR)是評(píng)價(jià)機(jī)體炎性反應(yīng)的一項(xiàng)主要參考指標(biāo),已有相關(guān)研究證實(shí)，NLR與臨床多種疾病之間具有一定的相關(guān)性，如：肺癌、心力衰竭及胃癌等[3]。紅細(xì)胞分布寬度(red blood cell distribution width，RDW)是反應(yīng)機(jī)體內(nèi)紅細(xì)胞體積的一項(xiàng)客觀參考指標(biāo)，臨床中主要用于診斷及鑒別貧血患者。目前臨床中并未明確FC的具體發(fā)病機(jī)制及原因，但推測(cè)其與小兒自身的免疫、遺傳及神經(jīng)系統(tǒng)等相關(guān)因素有關(guān)。T淋巴細(xì)胞是評(píng)估機(jī)體免疫平衡情況的一項(xiàng)主要參考指標(biāo)[4]。本研究旨在探討小兒FC與NLR、RDW及T淋巴細(xì)胞之間的關(guān)系，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2016年4月至2017年1月浙江省杭州市余杭區(qū)第三人民醫(yī)院收治的小兒FC 76例，根據(jù)臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)將76例FC患兒分為單純FC組和復(fù)雜FC組，再選取同期來該院行體檢的健康兒童38例作為對(duì)照組。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)符合臨床中對(duì)小兒FC的診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]；(2)均為首次發(fā)作者；(3)年齡0.6～6.0歲；(4)小兒家屬均知情，并簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)合并代謝系統(tǒng)紊亂者；(2)合并中樞神經(jīng)系統(tǒng)異常者；(3)合并出生缺陷者；(4)合并代謝病遺傳者；(5)合并器質(zhì)類疾病導(dǎo)致的驚厥。對(duì)照組38例，年齡0.6～6.0歲，平均(3.2±0.6)歲，其中男24例，女14例；單純FC組38例，年齡0.6～6.0歲，平均(3.1±0.7)歲，其中男23例，女15例；復(fù)雜FC組38例，年齡0.6～6.0歲，平均(3.2±0.4)歲，其中男25例，女13例，3組兒童性別和年齡比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性，本研究已獲得該院倫理委員會(huì)的批準(zhǔn)。

1.2方法

1.2.1血液檢測(cè) 單純FC組和復(fù)雜FC組患兒在驚厥后24 h內(nèi)抽取靜脈血液標(biāo)本約3 mL送檢；對(duì)照組兒童抽取晨起空腹靜脈血液標(biāo)本約3 mL送檢；使用全自動(dòng)血液分析儀(型號(hào)：SYSMEX XE-2100)進(jìn)行血液常規(guī)檢測(cè)。

1.2.2采用氚-胸腺嘧啶核苷(3H-TDR)摻入法測(cè)定T淋巴細(xì)胞水平 使用β液閃儀進(jìn)行T淋巴細(xì)胞增殖結(jié)果的測(cè)定,分別用刺激指數(shù)(SI)及每分鐘脈沖數(shù)(CPM)表示。使用堿性磷酸酶-抗堿性磷酸酶(APAAP)免疫組織化學(xué)技術(shù)測(cè)定3組兒童血液標(biāo)本中的T淋巴細(xì)胞各項(xiàng)因子水平，包括CD3、CD4及 CD4/CD8。

1.2.3觀察指標(biāo) (1)觀察比較3組兒童的NLR、RDW水平；(2)觀察比較3組兒童體內(nèi)T淋巴細(xì)胞的增殖反應(yīng)情況；(3)觀察比較3組兒童體內(nèi)T淋巴細(xì)胞各項(xiàng)因子水平；(4)觀察分析小兒FC與NLR、RDW及T淋巴細(xì)胞之間的相關(guān)性。

2 結(jié) 果

2.13組兒童的NLR、RDW水平比較 與對(duì)照組比較，復(fù)雜FC組及單純FC組患兒的NLR和RDW均明顯升高(P<0.05)，且以復(fù)雜FC組升高最明顯(P<0.01)；且復(fù)雜FC組與單純FC組患兒的NLR和RDW水平比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表1。

表1 3組兒童NLR、RDW水平比較

a:P<0.05，b：P<0.01，與對(duì)照組比較；c:P<0.05，與單純FC組比較

2.23組兒童體內(nèi)T淋巴細(xì)胞的增殖反應(yīng)情況 與對(duì)照組比較，復(fù)雜FC組與單純FC組患兒的SI和CPM均明顯降低(P<0.05)，其中復(fù)雜FC組最低(P<0.01)；且復(fù)雜FC組與單純FC組患兒的SI和CPM比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表2。

2.33組兒童體內(nèi)T淋巴細(xì)胞各項(xiàng)因子水平比較 與對(duì)照組比較，復(fù)雜FC組與單純FC組患兒的CD3、CD4和CD4/CD8均明顯降低(P<0.05)，其中復(fù)雜FC組最低(P<0.01)；且復(fù)雜FC組與單純FC組患兒的CD3、CD4和CPM CD4/CD8比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表3。

表2 3組兒童體內(nèi)T淋巴細(xì)胞的增殖反應(yīng)比較

a:P<0.05，b：P<0.01，與對(duì)照組比較；c:P<0.05，與單純FC組比較

表3 3組兒童體內(nèi)T淋巴細(xì)胞各項(xiàng)因子水平比較

a:P<0.05，b：P<0.01，與對(duì)照組比較；c:P<0.05，與單純組比較

2.4FC與NLR、RDW及體內(nèi)T淋巴細(xì)胞水平的相關(guān)性分析 FC與NLR、RDW呈明顯正相關(guān)(P<0.05)；與體內(nèi)T淋巴細(xì)胞的增殖反應(yīng)SI、CPM呈明顯負(fù)相關(guān)(P<0.05)；與T淋巴細(xì)胞因子CD3、CD4及CD4/CD8水平呈明顯負(fù)相關(guān)(P<0.05)，見表4。

表4 FC與NLR、RDW及體內(nèi)T淋巴細(xì)胞水平的相關(guān)性分析

3 討 論

本研究結(jié)果提示，NLR水平復(fù)雜FC組及單純FC組均高于對(duì)照組(P<0.05)，且復(fù)雜FC組最高(P<0.05)；RDW水平復(fù)雜FC組及單純FC組高于對(duì)照組(P<0.05)，且復(fù)雜FC組最高(P<0.05)。國(guó)外相關(guān)研究報(bào)道指出，NLR及RDW在復(fù)雜型FC患兒中表達(dá)水平更高[6]，與本研究結(jié)果基本一致。本研究發(fā)現(xiàn)，復(fù)雜FC組的NLR水平明顯高于單純FC組，推測(cè)其原因可能是跟小兒FC當(dāng)中的炎性反應(yīng)過程相關(guān)。由此可證實(shí)，NLR是臨床診斷FC的一項(xiàng)簡(jiǎn)單、有效的參考指標(biāo)[7]。RDW在臨床中主要用于診斷貧血，有相關(guān)研究指出，RDW在各種非血液性的臨床疾病當(dāng)中，也具有十分可觀的診斷及判斷預(yù)后的參考價(jià)值[8]。盡管目前臨床中未能明確RDW是如何參與這些非血液性疾病的，但二者間的關(guān)系充分提示，小兒RDW也在機(jī)體的整個(gè)炎性反應(yīng)當(dāng)中有所參與[9-10]。由此提示，小兒FC與NLR、RDW呈正相關(guān)性(r=0.36、0.38，P<0.05)，即NLR、RDW表達(dá)水平越高，出現(xiàn)FC的可能越大。當(dāng)患兒家屬有時(shí)不能清晰地對(duì)FC發(fā)作時(shí)的特征進(jìn)行描述,臨床醫(yī)生就很難對(duì)小兒FC的分型進(jìn)行區(qū)分,而血液生化檢查十分簡(jiǎn)便、快捷，通過分析 NLR 和 RDW，就可作為臨床診斷FC時(shí)的首選參考指標(biāo)。

本研究結(jié)果還提示，與對(duì)照組比較，復(fù)雜FC組與單純FC組患兒的SI和CPM均明顯降低(P<0.05)，其中復(fù)雜FC組最低(P<0.01)；且復(fù)雜FC組與單純FC組患兒的SI和CPM比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。T淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)水平是反映T淋巴細(xì)胞功能的指標(biāo)，其反應(yīng)水平低下，即說明患兒的淋巴細(xì)胞受免疫原的作用而處于抑制狀態(tài)。另一結(jié)果提示，與對(duì)照組比較，復(fù)雜FC組與單純FC組患兒的CD3、CD4和CD4/CD8均明顯降低(P<0.05)，其中復(fù)雜FC組最低(P<0.01)；且復(fù)雜FC組與單純FC組患兒的CD3、CD4和CD4/CD8比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。近年來，有研究證實(shí),神經(jīng)系統(tǒng)-內(nèi)分泌系統(tǒng)-免疫系統(tǒng)三者之間是相互聯(lián)系的一個(gè)完整性網(wǎng)絡(luò)，主要通過蛋白的表達(dá)、細(xì)胞因子的分泌、信息分子及其相關(guān)受體的共享來進(jìn)行互相調(diào)控、聯(lián)系[11]。而目前臨床中并未明確FC具體發(fā)病原因及機(jī)制,推測(cè)其可能跟免疫系統(tǒng)受損、神經(jīng)系統(tǒng)不成熟或特異性基因綜合征具有一定的相關(guān)性。最能反映T淋巴細(xì)胞系統(tǒng)功能狀態(tài)的一項(xiàng)指標(biāo)就是T淋巴細(xì)胞的增殖反應(yīng)，增殖反應(yīng)水平降低就充分提示機(jī)體內(nèi)的免疫原對(duì)淋巴細(xì)胞產(chǎn)生了抑制作用，進(jìn)而抑制了機(jī)體正常免疫系統(tǒng)的功能發(fā)揮[12-15]。

本研究回顧性分析了NLR和RDW在小兒FC中的表達(dá)情況，以及與T淋巴細(xì)胞水平的相關(guān)性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)復(fù)雜FC組及單純FC組NLR和RDW水平均高于對(duì)照組(P<0.05)，小兒FC與NLR、RDW呈正相關(guān)，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。小兒FC與體內(nèi)T淋巴細(xì)胞的增殖反應(yīng)指標(biāo)SI、CPM呈負(fù)相關(guān)(r=-0.40、-0.41,P<0.05)，與T淋巴細(xì)胞因子CD3、CD4及CD4/CD8呈明顯負(fù)相關(guān)(r=-0.39、-0.41、-0.37,P<0.05)，即T淋巴細(xì)胞表達(dá)水平越低，F(xiàn)C患兒的病情越嚴(yán)重。

綜上所述，本研究通過在對(duì)小兒FC進(jìn)行臨床診斷的過程中，參考患兒的NLR、RDW及T淋巴細(xì)胞水平，能夠?yàn)榕R床對(duì)小兒FC的診斷及鑒別提供參考依據(jù)。但三者對(duì)小兒FC的具體臨床診斷價(jià)值，還有待通過擴(kuò)大樣本量和相關(guān)指標(biāo)進(jìn)行聯(lián)合診斷，以提高診斷價(jià)值。