液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定蔬菜中的吡蟲啉、啶蟲脒、茚蟲威和氯蟲苯甲酰胺

□ 趙軍溪 淄博市疾病預(yù)防控制中心

在生活水平逐漸提高的今天，人們對于自己生活中食用的食品是否安全問題十分在意，對市面上食品內(nèi)的農(nóng)藥限量要求也是日益嚴(yán)格，研發(fā)出高效精準(zhǔn)的農(nóng)藥檢測方法成為研究人員的重要任務(wù)[1]。2003年，美國農(nóng)業(yè)部Anastassiades 教授等在一系列實驗中研發(fā)出了QuEChERS[2]，成為了國際上首批發(fā)展起來的一種用于檢測的快速樣品前處理技術(shù)，該方法操作簡便，溶劑使用量少，分析速度快，準(zhǔn)確率和精密度高，大部分農(nóng)藥殘留的前處理都是使用此方法[3]。利用質(zhì)譜優(yōu)良的定性能力，液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜可以很好的避免樣品檢測出現(xiàn)假陽性，提高檢測準(zhǔn)確度[4]。本文以乙腈為提取溶劑，超聲輔助提取，提取液經(jīng)N-丙基乙二胺（PSA）和無水硫酸鎂凈化，通過液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜檢測法對蔬菜中吡蟲咻、啶蟲脒、茚蟲威和氯蟲苯甲酰胺4種殺蟲劑農(nóng)藥殘留展開了檢測。

1 實驗部分

1.1 儀器與試劑

儀器：液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀（賽默飛世爾Thermo Vanquish/Thermo TSQ QUANTIS）；C18柱（100 mm×1.7 μm×2.1 mm）；高速離心機(jī)；超聲波清洗器。

試劑：乙腈為色譜純試劑；吡蟲咻、啶蟲脒、茚蟲威和氯蟲苯甲酰胺濃度均為100 μg/mL，定值單位為農(nóng)業(yè)農(nóng)村部環(huán)境保護(hù)科研檢測所。

1.2 儀器條件

離子源：ESI；掃描模式：正離子掃描；離子源電壓（V）：4 500；離子傳輸管溫度：350 ℃；輔助氣加熱溫度：400 ℃；柱溫：40 ℃；監(jiān)測模式：MRM；鞘氣流速（Arb）：35；輔助氣流速（Arb）：10；進(jìn)樣量：10 μL。

流動相洗脫梯度如表1所示。4種殺蟲劑的氣液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜參數(shù)列于表2中。

1.3 樣品處理

于50 mL離心管中，準(zhǔn)確稱取10.0 g左右已勻漿的蔬菜樣品，加入乙腈10 mL，渦旋混勻，超聲10 min。然后加入約1 g氯化鈉和5 g無水硫酸鎂，渦旋混勻，離心5 min（8 000 rpm）。離心后取1.5 mL上清液，加入150 mg水硫酸鎂和75 mg PSA，渦旋10 s，8 000 rpm 離心5 min。取0.5 mL上清液用水定容至1 mL，經(jīng)0.22 μm濾膜過濾后待測定。

2 實驗結(jié)果

2.1 提取溶劑的選擇

第一步應(yīng)該將將微量或痕量目標(biāo)物有效的提取出來，一般來說，農(nóng)藥殘留檢測方法中常使用乙酸乙酯、丙酮和乙腈作為萃取溶劑[4]。丙酮對葉綠素和碳水化合物等物質(zhì)的溶解性好，雜質(zhì)較多，提高了凈化的難度，與此同時溶劑與樣品不能完全分離。乙酸乙酯極性較弱，對極性農(nóng)藥的提取效果不好。而乙腈極性非常強(qiáng)，穿透力較強(qiáng)，提取效率很高，且乙腈提取后的色素、油脂類雜質(zhì)較少，同時能夠沉淀蛋白質(zhì)等雜質(zhì)，如此一來，本試驗決定選取乙腈作為提取溶劑。

表1 流動相梯度洗脫程序表

表2 4種殺蟲劑的氣液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜參數(shù)

2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線及檢出限

在最佳分析條件下對標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行測定，標(biāo)準(zhǔn)曲線方程及相關(guān)系數(shù)列于表3中。在實驗濃度范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)在0.997～0.999，檢出限為0.003 mg/kg，4種殺蟲劑農(nóng)藥均有較好的線性及較高的靈敏度。

2.3 方法回收率和精密度

以已知不含農(nóng)藥殘留的白菜樣品為基質(zhì)，做加標(biāo)回收實驗，加入濃度為0.05 mg/kg和0.1 mg/kg的殺蟲劑藥物。按照實驗樣品前處理和檢測方法進(jìn)行處理，并計算回收率。每個加標(biāo)做6個平行樣，計算平均回收率及相對標(biāo)準(zhǔn)偏差，其結(jié)果見表4。4種殺蟲劑組分的回收率在84%～103%，滿足分析要求；平行樣的相對偏差滿足檢測結(jié)果。

3 結(jié)論

本文以乙腈為提取溶劑，，超聲輔助提取，提取液經(jīng)N-丙基乙二胺（PSA）和無水硫酸鎂凈化，通過液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜檢測方法對蔬菜中吡蟲咻、啶蟲脒、茚蟲威和氯蟲苯甲酰胺4種殺蟲劑農(nóng)藥殘留進(jìn)行測定。實驗充分利用質(zhì)譜的定性定量優(yōu)勢，同時測定蔬菜中多種殺蟲劑，檢測結(jié)果準(zhǔn)確、可靠，滿足蔬菜中農(nóng)藥殘留限量標(biāo)準(zhǔn)的要求。

表3 4種殺蟲劑的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程及檢出限

表4 4種殺蟲劑的加標(biāo)回收率及相對標(biāo)準(zhǔn)偏差