淺析氣相色譜法測定乳粉中的總脂肪、飽和脂肪酸、不飽和脂肪酸

□ 陳煒萍 廣東亨盛維嘉食品工業有限公司

利用氣相色譜法來測定乳粉中的脂肪以及各脂肪酸的含量，這種方法能夠一次測定多個樣品，對于分析的效率有很好的提高，在實際的乳粉檢測中，得到廣泛的應用。

1 測定的材料準備和測定方法

1.1 測定儀器以及試劑

在測定乳粉中的總脂肪以及飽和、不飽和脂肪酸時，使用的儀器有具有氫火焰離子檢測器（FID）的氣相色譜儀、旋轉蒸發儀、萬分之一電子天平、HP-88毛細管色譜柱、氮吹儀以及恒溫水浴鍋[1]。使用的試劑有石油醚、乙醚、甲醇、乙醇、正己烷、氫氧化鈉、氯化鈉、無水硫酸鈉、氨水、焦性沒食子酸，三氟化硼甲醇溶液，以及花生油脂肪酸標準物質、脂肪酸甲酯標準物質。

1.2 測定樣品前處理

將含有脂肪的乳粉稱取1～5 g來作為實驗的樣品，移入250 mL錐形瓶中，取100 mg焦性沒食子酸和2.0 mL內標溶液加入到瓶中，再加入一定量的水和乙醇加入，最后再加入3 mL氨水，進行振蕩搖勻后，于（75±5）℃恒溫水浴鍋中水浴20 min，水解這一過程中每間隔5 min就搖晃錐形瓶，讓其充分水解。水浴結束后，將錐形瓶拿出來進行降溫，降到室溫之后再加入10 mL乙醇進行振蕩搖勻，接著將錐形瓶中的溶液都移入分液漏斗中，再用50 mL（1+1）乙醚石油醚混合液將錐形瓶進行少量多次沖洗，經過沖洗之后的溶液也要移入漏斗中，均勻的晃蕩幾分鐘，再靜置10 min，上層提取液倒入250 mL雞心瓶中，水解液要連續三次進行以上操作，溶液和沖洗液都倒入雞心瓶中，在50 ℃的水浴下進行旋轉蒸發，蒸發至干后瓶中剩余的殘渣用少許的乙醚石油醚沖洗到頂空瓶中，在水溫55 ℃的情況下，用氮氣吹干溶劑。此時，瓶內剩余脂肪提取物，向瓶中加入2 mL的氫氧化鈉甲醇溶液，充入氮后蓋緊瓶子，在80 ℃的水浴鍋中放置10 min，不時地振動搖勻，然后進行冷卻，再將3 mL三氟化硼甲醇溶液加入其中，再充氣蓋緊，同樣在80 ℃的水浴鍋中水浴20 min，然后加入2 mL正己烷，蓋緊蓋子振蕩2 min，再加入5 mL的氯化鈉溶液，注意氯化鈉溶液處于飽和狀態，蓋緊蓋子振蕩1 min，然后靜止放置，待出現層次后用無水硫酸鈉將正己烷層進行干燥，取上層正己烷層于進樣瓶中，用氣相色譜儀進行測定。

2 對測定的結果研究

儀器毛細管色譜柱能夠實現39種脂肪酸甲酯的測定，通過內標法，利用轉換系數和各脂肪酸甲酯的含量來計算出乳粉中的脂肪以及各類脂肪酸的相應含量，利用質量分數的百分比來表示計算結果，對氣相色譜法檢測脂肪酸的適應性進行評定主要從以下三個方面進行。

2.1 精密度

在相同的條件下將乳粉樣品進行6次重復測定，計算出脂肪以及各脂肪酸含量的RSD值，其實驗結果見表1。

表1 精密度實驗結果表

根據實驗結果，RSD值都不大于1%，說明氣相色譜法測定的精密度較好。

2.2 準確度

將脂肪酸組成已知的花生油脂肪酸標準溶液按高、中、低三個濃度加入乳粉樣品中，每一濃度都重復進行三次，實驗的回收率見表2。

脂肪以及各脂肪酸的三個濃度的回收率都大于90%，說明氣相色譜法測定的比較精確。

2.3 檢出限

將乳粉中不含有的脂肪酸甲酯選擇三種加入到樣品中，再利用氣相色譜法來進行測定，計算得出該方法的檢出限。結果顯示，其脂肪以及各類脂肪酸的檢測結果都遠低于國際標準規定的0.1%，說明氣相色譜法測定的靈敏度較高[2]。

表2 低中高三個添加濃度的回收率和檢出限表

3 結語

測定乳粉中的總脂肪、各類脂肪酸的類別、比例及含量，氣相色譜法操作比較簡單，可以一次性測定多個樣品，有效地減少分析的時間。同時，該方法具有較好的精密度、準確度及靈敏度，可以保障檢測結果的準確性。