孕前女性人乳頭瘤病毒感染情況及其特征▲

陳杏園 王敬仁 高 干 羅世強 唐 寧

(廣西柳州市婦幼保健院1 醫學遺傳科，2 柳州市出生缺陷預防與控制重點實驗室，3 檢驗科，柳州市 545001,電子郵箱：1411263743@qq.com)

在我國，每年宮頸癌的新發病例占全球新發病例的30%[1]。而人乳頭瘤病毒(human papillomavirus,HPV)是一種嗜黏膜和皮膚上皮的病毒，是導致宮頸上皮增生和宮頸癌的主要因素[2]。目前已確認的HPV有100多種，有30多種亞型能導致宮頸病變，可分為高危型和低危型兩大類，其中將HPV6、HPV11、HPV40、HPV42、HPV43、HPV44、HPV54、HPV61、HPV70、HPV72、HPV81等歸為低危型，其與肛周皮膚尖銳濕疣等良性病變有關；高危型主要為HPV16、HPV18、HPV31、HPV33、HPV35、HPV39、HPV45、HPV51、HPV52、HPV56、HPV58、HPV59、HPV68、HPV73、HPV82等，是宮頸癌的常見致病因素[3]。HPV可垂直感染，所以孕前HPV篩查對預防新生兒感染極為重要。本文分析4 190例孕前女性HPV感染情況及其臨床特征，旨在為宮頸癌的早期發現及早期治療提供參考。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 回顧性分析2017年1月至2018年6月在廣西柳州市婦幼保健院行孕前檢查的4 190例女性的臨床資料，排除既往有宮頸HPV感染病史及1周內有陰道用藥的女性。納入女性年齡17～48(34.1±3.2)歲，無癥狀1 277例(30.48%)，表現為宮頸炎2 811例(67.09%)，其他癥狀102例(2.43%)。宮頸炎診斷標準：陰道分泌物增多，多呈黏液膿性，或混有血；有外陰瘙癢及灼熱感等臨床癥狀，或者分泌物白細胞檢測、子宮頸取材病原體檢測陽性。

1.2 方法

1.2.1 試劑及儀器：HPV分型檢測試劑盒購自上海透景生命科技股份有限公司(批號：2018005)；Mastercycler Gradient擴增儀以及多功能流式點陣分析儀購自Eppendorf公司。

1.2.2 標本的獲取：以擴陰器暴露宮頸口，用棉拭子擦去宮頸口分泌物，將宮頸刷伸進宮頸口處，緊貼宮頸口順時針轉動4～5周，慢慢抽出宮頸刷，將其放進預裝細胞保存液的洗脫管中；在管口處沿刷柄折痕將宮頸刷折斷，宮頸刷頭留在洗脫液中；旋緊管蓋，做好樣本標識，并保持洗脫管直立放置。

1.2.3 HPV檢測方法:按說明書操作步驟提取DNA后進行PCR擴增。擴增反應條件為95℃ 5 min，1個循環；95℃ 30 s、58℃ 30 s、72℃ 30 s，5個循環；95℃ 30 s、55℃ 30 s、72℃ 30 s，35個循環，72℃ 3 min，1個循環。PCR擴增結束后，按照試劑說明書加入雜交試劑進行雜交然后檢測，雜交條件為95℃ 5 min變性，48℃ 30 min雜交，48℃ 15 min孵育。用多功能流式點陣分析儀進行數據采集。

1.2.4 雜交結果判定：本研究共檢測27個HPV基因型，其中低危型HPV包括HPV6、HPV11、HPV40、HPV42、HPV43、HPV44、HPV55、HPV61、HPV81、HPV83；高危型HPV包括HPV16、HPV18、HPV26、HPV31、HPV33、HPV35、HPV39、HPV45、HPV51、HPV52、HPV53、HPV56、HPV58、HPV59、HPV66、HPV68、HPV82。

1.3 統計學分析 采用SPSS 19.0軟件進行統計分析。計數資料以例數(率)表示，組間比較采用χ2檢驗。以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 HPV的陽性檢出率 4 190例標本中，陽性標本共757例，陽性檢出率為18.07%。檢出率位列前6位的HPV型別為HPV52、HPV16、HPV58、HPV53、HPV39、HPV18，均為高危型HPV，占51.38%(389/757)。見表1。

表1 各型HPV的陽性檢出情況

2.2 不同年齡段女性HPV陽性率比較 不同年齡段HPV陽性檢出率比較差異有統計學意義(χ2=30.557，P<0.001)。≤20歲的孕前女性陽性率最高，但與其他年齡段女性比較，差異無統計學意義(P>0.05)。見表2。

表2 各年齡段女性孕前HPV陽性檢出率比較[n(%)]

2.3 不同臨床表現女性HPV陽性檢出率比較 不同臨床表現女性間HPV陽性檢出率差異有統計學意義(χ2=10.712，P=0.005)。宮頸炎女性的HPV陽性率高于其他臨床表現者(P<0.05)，但與無癥狀者比較，差異無統計意義(P>0.05)。見表3。

表3 不同臨床表現的女性孕前HPV陽性檢出率比較[n(%)]

3 討 論

宮頸癌是婦女第二大常見腫瘤，每年平均新發病患者人數約為50萬例，病死人數約為25萬例[4]。研究表明，從HPV感染到宮頸癌病變需要5～10年的時間[5]；有較大一部分女性為無癥狀攜帶，只有高危型的HPV持續感染才會有致病的風險[6]。另有研究表明，母嬰HPV垂直感染率可達24.44%，且不同分娩方式HPV的垂直感染率差異無統計學意義[7]，因此孕前對HPV的篩查意義重大。目前，已經形成的專家共識建議采用以病因學為主的高危型HPV檢測技術在我國大面積開展女性宮頸癌篩查[8]。臨床醫師根據共識意見對患者進行治療和管理的同時，應該結合所在地的具體實際情況對患者進行正確的診斷和個體化治療。

本研究4 190例孕前女性的HPV陽性檢出率為18.07%，與趙菊芬等[9]報告的感染率相似，遠低于曾錦婷等[10]報告的感染率，這可能與就診人群不同及地域差別有關。本研究中，孕前女性生殖道感染的HPV以高危型感染為主，其中HPV52、HPV16、HPV58、HPV53的陽性檢出率居前4位。關于HPV感染的常見型別，國內不同的研究所得結果有一定的差異，例如，趙海英等[11]報告HPV感染的常見型別為HPV16、HPV52、HPV58、HPV6，而吳銳浩等[12]報告的常見型別為HPV52、HPV53、HPV39、HPV16。雖然HPV基因分型具有較大的地區差異，但總體以高危型為主。

研究表明，隨著年齡增長，HPV感染率有逐漸增高的趨勢，其中≥59歲組的總感染率、多重感染率和高危型感染率均高于其他年齡組[13]。有學者報告≥61歲年齡組的HPV感染率最高，其次是51～60歲年齡組[14]，也有研究結果顯示≤25和>46歲年齡組的陽性檢出率均高于其他各組[15]。本研究中，≤20歲女性人數最少，但其HPV陽性檢出率卻很高，可能是由于這個年齡段的女性在發生性生活時缺乏自我保護意識所致，應加強對青少年的宣傳教育工作；但≤20歲年齡組的人數相對較少，可能不足以代表真實情況；21～<31歲女性的HPV陽性檢出率也較高，可能原因是此年齡段的女性性生活較活躍。由于檢測人群及地域分布的不同，本研究納入的是17～48歲行孕前檢查的人群，因此與各地區的研究結果有所差異。總之，女性在各年齡段都應加強預防HPV感染并且要定期進行HPV篩查。

此外，本研究中大部分女性具有宮頸炎的表現，其HPV陽性檢出率達19.17%，而無癥狀者的HPV陽性檢出率達16.37%，但與宮頸炎女性差異并無統計學意義(P>0.05)。因此，HPV檢測不僅有利于對宮頸炎患者進行病因的精確診斷，且對于無癥狀人群也有重大意義，有助于預防宮頸疾病的發生。

綜上所述，孕前女性的HPV感染以高危型為主，傾向年輕化；宮頸炎患者與無癥狀人群的HPV陽性檢出率無明顯差異，因此對無癥狀攜帶患者的篩查也不容忽視。