檢測HBV-DNA載量在使用核苷酸類似物治療慢性乙型肝炎的臨床應用

韓霞 ，施麗 ，王路 ，沈黎俊

1.新疆巴州人民醫院醫學檢驗科，新疆巴州 841000；2.新疆巴州人民醫院感染科，新疆巴州 841000

慢性乙型肝炎(CHB)是由HBV病毒持續感染引起的慢性肝臟炎癥性疾病，嚴重危害著人們的身心健康。抗病毒治療是乙型肝炎治療的基礎，能阻止疾病的進展，延長患者的生存率，提高生活質量。目前國際公認的口服抗病毒藥物為核苷酸類似物(NAs)，包括：拉米夫定(LAM)、替比夫定(LdT)、阿德福韋酯(ADV)、替諾福韋(TDF)和恩替卡韋(ETV)[1]。無論哪種抗病毒藥物治療，HBV-DNA載量和轉陰都是考核抗病毒治療的硬性指標。因此，采用高靈敏度精確度的實時定量聚合酶鏈 (RT-qPCR)法檢測HBVDNA尤為重要。該文記錄了在2016年1月—2017年12月就診于該院使用不同抗病毒藥物治療的167例HBeAg陽性CHB患者的血清HBV-DNA載量變化及應答情況，現報道如下。

1 對象與方法

1.1 研究對象

選取在新疆巴州人民醫院就診的CHB患者167例，診斷符合我國《慢性乙型肝炎防治指南（2015）》，適合并接受單藥抗病毒治療的初治HBeAg陽性CHB患者，HBVDNA≥1.0×105IU/mL，ALT≥2×ULN， 依從性好并規律復查。排除標準：嚴重肝硬化、肝癌、肝移植以及使用免疫抑制劑、合并HIV、HDV、HCV患者。研究所選病例經過該院倫理委員會批準，并且患者簽訂知情同意書。

1.2 儀器與試劑

HBV-DNA定量檢測采用宏石科技SLAN-96P實時熒光定量PCR儀，試劑來源于湖南圣湘生物。HBeAg使用深圳市愛康生物的URANUS AE120，試劑由廣州市達瑞生物提供。ALT采用羅氏Cobas8000檢測。

1.3 方法

選定研究對象，告知治療風險及長期服藥性，根據患者病情和意愿雙向選擇，確定抗病毒治療方案并分為5組，依次為 LAM 組 100 mg，TdT 組 600 mg，ADV 組 10 mg，TDF組 300 mg，ETV組0.5 mg，均1次/d口服。分別收集患者基線水平和接受 NAs治療 12、24、48、72、96 周時的血清標本，檢測其HBV-DNA、HBeAg、ALT。5組患者在初始抗病毒治療時，性別、年齡、HBV-DNA、ALT差異無統計學意義(P＞0.05)。

1.4 統計方法

采用Excel 2007，SPSS 22.0統計學軟件進行統計數據分析，計量資料用（±s）表示，采用t檢驗；計數資料用百分數(%)表示，采用χ2檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 不同抗病毒周期內各組HBV-DNA轉陰率比較

5組患者接受治療12周時HBV-DNA轉陰率差異無統計學意義(χ2=2.348，P=0.672)，而在 24、48、72、96 周時差異有統計學意義 (χ2=11.086，P=0.026；χ2=10.942，P=0.017；χ2=10.738，P=0.030；χ2=30.788，P=0.000)。 5 組患者在不同抗病毒治療周期內HBV-DNA轉陰率變化見圖1。

圖1 5組患者在不同抗病毒周期內HBV-DNA轉陰率的變化

2.2 抗病毒治療48周時各組患者HBV-DNA、HBeAg、ALT變化情況

患者在分別接受5組藥物抗病毒治療48周，HbeAg轉陰率、ALT復常率差異無統計學意義(P＞0.05)；而 HBVDNA轉陰率差異有統計學意義(P<0.05)，見表1。

表1 治療48周5組患者血清病毒學變化及ALT復常情況比較(%)

2.3 抗病毒治療72、96周各組病毒學應答情況

接受抗病毒治療72周時，TDF組獲得完全病毒學應答，ETV組有8.33%未獲得病毒學應答；96周時，TDF組和ETV組獲得完全病毒學應答，而LAM組、TdT組、ADV組分別有20.00%、20.00%、15.00%未獲得病毒學應答。

3 討論

在我國，乙型肝炎病毒(HBV)感染率一直位居前列，CHB患者居多。臨床治愈CHB的主要指標是HBsAg的清除[2]，但清除HBsAg的新策略，還沒有進入臨床應用的案例。目前，最大限度地長期抑制HBV-DNA病毒復制是治療CHB的關鍵，它可以減輕肝細胞壞死，延長生存期[3]。熒光定量PCR技術檢測HBV-DNA，可以全面了解乙肝病情，達到科學用藥、科學治療的目的。有研究表明，適當的免疫反應有助于清除病毒和修復肝損傷[4]，NAs可以通過調節免疫應答，有效抑制HBV的復制。近年來TDF、ETV被世界衛生組織(WHO)、美國肝病學會(AASLD)等推薦為一線抗病毒藥物[5]。但鑒于我國國情，仍有基層患者在應用非一線藥物LAM、TdT、ADV治療。

新疆巴州地區位于中國西部，屬于乙肝高發區[6]，該研究分析近2年該地167例CHB患者抗病毒治療情況，有32.93%的患者選擇非一線抗病毒藥物；而選用一線抗病毒藥物的112例患者中，替諾福韋者占12.28%，這可能與該地經濟發展水平和醫保報銷政策有關。CHB患者在使用5組抗病毒藥物治療12周時，HBV-DNA轉陰率差異無統計學意義 （P＞0.05）；24周后，HBV-DNA轉陰率TDF組、ETV組高于LAM組、TdT組、ADV組，這與張穎慧等人[7]發表的抗病毒療效較好的預測時間為12周或24周類似，提示檢測血清HBV-DNA載量變化對抗病毒療效的判斷優于HBeAg、ALT；48周時，5組HBV-DNA轉陰率差異有統計學意義（P＜0.05），其 ETV組HBV-DNA轉陰率與段文文[8]報道的84%相似，HBeAg轉陰率、ALT復常率無明顯差異，而TDF和ETV組HBV-DNA轉陰率差異無統計學意義（P＞0.05），這不同于有關TDF在48周時其HBV-DNA轉陰率方面優于ETV的報道[9]；72周時，TDF組全部獲得完全病毒學應答，而ETV組有8.33%的患者未獲得病毒學應答，這相似于楊有道等人[10]報道的在抗病毒治療到72周時，TDF在根除HBV-DNA有效性方面優于ETV(P=0.010)；96周時，TDF組、ETV組均獲得病毒學應答，而LAM組、TdT組、ADV組均存在病毒學應答不良者，提示該地區還未發現TDF、ETV耐藥的情況。

治療CHB應長期服用NAs，TDF和ETV具有抗病毒作用強、低耐藥率、在不同階段均能有效抑制病毒復制等優點[8,11]，被大力提倡，但由于部分患者經濟條件、依從性不佳等因素導致停藥或換用低級別藥物，增大了耐藥率。有研究結果表明[12]，國產ETV膠囊能迅速、持續抑制HBV的復制，可長期治療CHB。不僅要在基層醫院推廣PCR技術檢測HBV-DNA，還要發展國產TDF、ETV藥物，降低價格，全面納入醫保，給更多乙肝患者帶來福音。