幾種禽流感疫苗免疫鵪鶉的抗體效價(jià)評(píng)估

顏艾 尹鑫 楊浩 丁瑞碧

摘要：近年，鵪鶉的養(yǎng)殖量逐年上漲，但國內(nèi)外關(guān)于鵪鶉禽流感免疫抗體消長規(guī)律的報(bào)道較少。因此，該文就不同的疫苗對(duì)鵪鶉免疫產(chǎn)生的抗體消長規(guī)律展開研究，以期為制定科學(xué)的鵪鶉免疫方案提供科學(xué)依據(jù)。

關(guān)鍵詞：鵪鶉;禽流感;抗體;免疫效價(jià)

中圖分類號(hào)：S852.65

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B

doi： 10.3969/j.issn.2096-3637.2019.07.008

0 引言

禽流感是由正粘病毒科流感病毒屬A型病毒所引起的一種禽類全身性傳染病。世界動(dòng)物Ii生組織（OIE）將其劃為A類動(dòng)物疫病，被國際衛(wèi)生武器公約列為傳染病[1]。根據(jù)禽流感病毒的蛋白質(zhì)外殼上的血凝素（HA）和神經(jīng)氨酸酶（NA）蛋白抗原性的不同組合方式可以分為不同的血清型，目前已從禽類鑒定出 16個(gè)HA亞型（Hl～ H16），9個(gè)NA亞型（Nl～ N9），不同血清型容易發(fā)生基因漂變、排列組合或出現(xiàn)新的血清型。其中具有高致病性的是H5和H7 2個(gè)亞型，已知這2個(gè)血清型屬于已發(fā)現(xiàn)的人畜共患血清型，以傳播迅速、發(fā)病快、死亡率高為限制特征。據(jù)衛(wèi)生部門報(bào)道，2014年-2016年2月貴州先后報(bào)告3起人感染H7N9高致病性禽流感。2016年入冬以來共確診人感染H7N9流感病例6例，其中死亡4例，遵義市有1例人感染H7N9死亡病例。2004年，國家將其列入為動(dòng)物強(qiáng)制免疫疫病[2]。免疫依然是該病的主要控制手段，科學(xué)的免疫程序據(jù)有重要的公共衛(wèi)生學(xué)意義。近年，水禽和家禽主要的免疫的血清型包括H5型、H7型和H9型。隨著生活水平的提高，鵪鶉的養(yǎng)殖量逐年上漲，本文針對(duì)不同的疫苗對(duì)鵪鶉免疫產(chǎn)生的抗體消長規(guī)律展開研究。

1 方法與材料

1.1 方法

按照GB/T 18936-2003《高致病性禽流感診斷技術(shù)》對(duì)鵪鶉的禽流感H5、H7、H9 3種血清型的免疫抗體進(jìn)行監(jiān)測。

1.2 材料

隨機(jī)選擇遵義市1家鵪鶉養(yǎng)殖場，對(duì)該場的600只40日齡左右的商品鵪鶉進(jìn)行分組試驗(yàn)。

試驗(yàn)用疫苗為哈爾濱維科生物技術(shù)開發(fā)公司生產(chǎn)，青島易邦生物工程有限公司生產(chǎn)的重組禽流感病毒（ H5+H7）二價(jià)滅活疫苗（H5NIRe-8株+H7N9H7-Rel株）、重組禽流感H5亞型二價(jià)滅活疫苗（Re-6毒株+Re-8毒株）和禽流感H5+H9二價(jià)滅活疫苗（H5NIRe-6+H9N2Re-2）。

禽流感病毒H5亞型標(biāo)準(zhǔn)抗原（中國哈爾濱維型科生物技術(shù)開發(fā)公司）;U型96孔血凝板;0.1 mol/L pH為7.2的PBS;1%紅細(xì)胞懸液。

2 試驗(yàn)與分組

2.1 試驗(yàn)

對(duì)200只鵪鶉進(jìn)行母源抗體監(jiān)測，剔除據(jù)有母源抗體的鵪鶉后進(jìn)行分組。隨機(jī)將試驗(yàn)用鵪鶉分為3組。組1皮下注射2 mL H5+H9_價(jià)滅活疫苗（H5NIRe-6+ H9N2Re-2）;組2皮下注射2 mL重組禽流感病毒（H5+H7）二價(jià)滅活疫苗（H5NIRe-8株+H7N9H7-Rel株）;組3皮下注射2 mL重組禽流感H5亞型二價(jià)滅活疫苗（Re-6毒fA+Re-8毒株）。

2.2 采樣方案

按照免疫日齡隨機(jī)抽取每一組鵪鶉20～30只/次，采樣方案如表1所示。

3 結(jié)果分析

由表2可知，禽流感H9型和H7型在14 d時(shí)抗體滴度高于禽流感H5型;禽流感H7型的抗體在14 d時(shí)達(dá)到峰值，在免疫后21 d開始下降。在28 d時(shí)H5型、H7型、Hg型抗體合格率均達(dá)到80%以上，保護(hù)時(shí)長可持續(xù)到免疫后42 d。

由表3和圖1可知，禽流感H7型產(chǎn)生免疫應(yīng)答最快，組1和組2在28 d前免疫應(yīng)答協(xié)同，28 d后組1和組2開始下降，組3抗體保護(hù)率仍然上升。

由表4可知，禽流感H7型抗體合格率在14 d達(dá)到100.00%，但在21 d后下降為95.7%，在28 d時(shí)又恢復(fù)抗體合格率為100.00%，在28 d后出現(xiàn)下降，42 d時(shí)下降為84.60%，、

由表5可知，H9j禽流感疫苗抗體合格率免疫應(yīng)答曲線在28 d時(shí)達(dá)到峰值100%，并持續(xù)至42 d，未出現(xiàn)下降趨勢。

4 討論與結(jié)論

與禽流感H5型抗體保護(hù)率對(duì)比，重組禽流感H5亞型二價(jià)滅活疫苗（Re-6毒株+Re-8毒株）高于重組禽流感病毒（H5+H7）二價(jià)滅活疫苗（H5NIRe-8株+H7N9H7-Rel株）和禽流感H5+H9二價(jià)滅活疫苗（H5NIRe-6+H9N2Re-2）。青島易邦生產(chǎn)的禽流感病毒H5（Re-6）株的抗體滴度在19～ 26 d后開始下降，重組禽流感H5亞型二價(jià)滅活疫苗（Re-6毒株+Re-8毒株）保護(hù)較長[3]。重組禽流感病毒（H5+H7）二價(jià)滅活疫苗（H5NIRe-8株+H7N9H7-Rel株）免疫鵪鶉的H5型抗體合格率不理想。

與報(bào)道稱SPF雞和矮腳黃雞均可產(chǎn)生較高水平的禽流感H5、H9型抗體，目能持續(xù)至85d以上相比，鵪鶉能產(chǎn)生較高水平的禽流感H5、H9型抗體，保護(hù)時(shí)長較矮腳黃雞短。因此，在設(shè)計(jì)免疫方案時(shí)補(bǔ)免間隔要短于肉雞免疫程序。

禽流感H5+H9二價(jià)滅活疫苗（H5NIRe-6+ H9N2Re-2）的H9型免疫應(yīng)答曲線最為理想，在42日齡后抗體合格率未出現(xiàn)下降趨勢。鵪鶉免疫H9型采用該疫苗較為理想。

用重組禽流感病毒（ H5+H7）二價(jià)滅活疫苗（H5NIRe-8株+H7N9H7-Rel株）免疫鵪鶉的H7型抗體合格率不理想。

單型苗的免疫效果較多型聯(lián)苗效果好，在制定免疫程序時(shí)盡量混合選擇?；蜻x擇單型苗和多型苗交叉間隔免疫，能產(chǎn)生較好的保護(hù)。鵪鶉免疫禽流感疫苗能產(chǎn)生較好的免疫效果。

參考文獻(xiàn)

[1]甘孟候禽流感[M].第2版北京：中國農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社，2002：32-38

[2]陳華，陳靜，田夫林，等2009 2013年山東省H5業(yè)型禽流感抗體檢測[J].山東畜牧獸醫(yī)，2014，35（9）：3-5.

[3]何飛，付太銀，朱明霞某肉雞場新城疫和禽流感抗體監(jiān)測與調(diào)查分析[J].家禽科學(xué)，2015（4）：36-39.

作者簡介：顏艾（19 88-），女，中級(jí)獸醫(yī)師，研究方向：動(dòng)物疫病預(yù)防、臨床診斷、實(shí)驗(yàn)室診斷。