羊肚菌胞內多糖對小鼠運動心肌損傷的影響*

鄭紅波

（沈陽藥科大學，遼寧 沈陽 110016）

近幾年，食用菌發展較為迅速，目前大概有350多種供人類食用，食用菌指的是實體碩大，可以食用的大型真菌，常見的食用菌主要包括木耳、香菇、銀耳、蘑菇、松茸、蟲草、松露等，而羊肚菌是其中一種較為珍貴的食用菌，主要是因為該菌菇表面形狀與羊肚相似，并且凹凸不平，固將其稱為羊肚菌[1]。同時，羊肚菌還被稱為草笠竹，還具備藥用的功效，可以改善痰壅氣逆喘咳、脘腹脹滿、食積氣滯等[2]。羊肚菌一般生長在經歷過山火的山上，從而產量較為稀少，故此而變得比較珍貴。另外，羊肚菌胞內具有多糖類物質，其具有抗腫瘤、抗疲勞、抗菌、增強免疫力等特性，可以對生物體運動心肌損傷產生一定的影響[2]。為了證明羊肚菌胞內多糖對小鼠運動心肌損傷的具體影響，設計試驗就羊肚菌胞內多糖對小鼠運動心肌損傷的影響進行相應的分析[4]。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

針對羊肚菌胞內多糖對小鼠運動心肌損傷的影響進行相應的分析，首先采用乙醇對羊肚菌內的多糖進行相應的提取，得知羊肚菌多糖主要是由摩爾比1∶1.059的甘露糖與半乳糖組成。將提取得到的羊肚菌多糖調制成一定的濃度，作為試驗的主要材料[5]。

1.2 試驗對象

利用100只患有運動心肌損傷的昆明小鼠，保證小鼠的體質重量為（20±2）g，雌性小鼠與雄性小鼠的數量比為1∶1，并且保證小鼠有同等級別的運動心肌損傷疾病。

1.3 試驗方法

將試驗對象小鼠根據雌、雄進行正比例分配，分為A組與B組，均分別含有25只雌小鼠、25只雄小鼠。

A組：在試驗前4周對該組的小鼠口服安慰劑，劑量為1 g·d-1。安慰劑主要是由糊精裝入空膠囊內構成，安慰劑對小鼠不存在任何功能。

B組：在試驗前4周對該組的小鼠口服多糖腸溶膠丸，劑量也為1 g·d-1。多糖主要是通過乙醇在羊肚菌胞內提取而來，性狀為深褐色粉末，將其裝入膠囊，投喂給小鼠。

將上述服用了4周安慰劑與多糖膠囊的兩組小鼠進行一次大強度運動，以此來驗證羊肚菌胞內多糖對小鼠運動心肌損傷的影響[6]。具體的運動試驗如下所示。

首先，在正式運動試驗前，使A組、B組小鼠在無坡度、速度為5 m·h-1的跑臺上進行短時間的適應性運動，然后進行同等時間的休息。其次，進行正式運動。運動方法為：設定跑臺坡度為零，起始速度為5 m·h-1，隨著時間的增加，不斷增加跑臺的速度，加速度為1/3 m ·h-1，當速度增加到15 m·h-1或者小鼠的心率維持在170 bpm以上時，加速度設置為0，并穩定跑臺速度，在這樣的運動強度下，每隔3 min對小鼠的RPE等級進行測量，同時對小鼠的心率進行全程的監控[7]。當小鼠心率在180 bpm以上，RPE等級在19～20范圍內，小鼠出現呼吸困難，運動動作不協調，不能堅持運動時，終止運動試驗。最后，在運動試驗的過程中需要注意的是，在運動前以及服藥期間小鼠必須保證正常的飲食與作息，在正式運動試驗前72 h小鼠不能進行劇烈的運動[8]。

為了對小鼠運動心肌損傷的影響進行分析，對小鼠的相關數據進行相應的采集。

1.4 檢測指標與檢測方法

為了驗證羊肚菌胞內多糖對小鼠運動心肌損傷的影響，對小鼠心肌損傷恢復蛋白T濃度進行檢測，利用相關的公式對心肌損傷恢復率進行計算[7]。

心肌損傷恢復蛋白T主要存在于心肌原纖維絲中，主要采用目前最先進的第三代檢測技術ECLIA法對其進行檢測與測定。在檢測過程中采用的試劑盒由北京北方生物技術研究所提供，測定儀器為FT-630+探頭微機γ儀[9-11]。

1.5 統計學處理

檢測指標數據一致采用平均值±標準差，即以x±s形式對數據進行相應的表示，采用SPSS 18. 0軟件對檢測數據進行統計與分析。對于同一時間的兩組數據之間主要通過獨立t檢驗進行比較與分析，差異顯著性標準為P<0.05，當P<0.01時認為數據之間具有極顯著差異[12-14]。

2 結果與分析

為了驗證羊肚菌胞內多糖對小鼠運動心肌損傷的具體影響，分別在羊肚菌胞內多糖濃度為20%、40%、80%的情況下進行運動試驗，然后分別對試驗結果進行相應的分析，對結果進行統計，得到試驗結論。

小鼠心肌損傷的恢復主要由心肌損傷恢復率來體現。因此，在試驗過程中，主要觀察小鼠心肌損傷恢復率的變化。心肌損傷恢復率主要由心肌損傷恢復蛋白T來決定。一般情況下，心肌損傷恢復蛋白T的濃度越高，則表示心肌損傷恢復率越大。

心肌損傷恢復蛋白T主要存在于心肌原纖維絲中，用于心肌損傷的恢復。該指標被美國心臟協會認定為判斷急性心肌梗死的標準指標，健康動物血液中心肌損傷恢復蛋白T的含量應該較低。具體的試驗結果如下。

2.1 20%多糖濃度對心肌損傷的影響分析

當多糖濃度為20%時，通過運動試驗得到兩組小鼠運動前后心肌損傷恢復蛋白T濃度變化情況見表1。

表1 運動前后心肌損傷恢復蛋白T濃度變化情況Tab.1 Changes of cardiac troponin T concentration before and after exercise

由表1可知，A、B兩組小鼠在運動前的心肌損傷恢復蛋白T濃度值沒有明顯的差異，但是經過運動試驗后，A、B兩組小鼠的心肌損傷恢復蛋白T濃度值顯著性增加，其中，A組P<0.01，表示運動試驗后小鼠的心肌損傷恢復蛋白T濃度值得到了顯著性的增加；B組P<0.05，也表示小鼠的心肌損傷恢復蛋白T濃度得到了顯著增加。

在運動試驗過程中，A組10號小鼠運動前心肌損傷恢復蛋白T濃度為0.05 ng·mL-1，運動后心肌損傷恢復蛋白T濃度為0.16 ng·mL-1，超出了心肌損傷恢復蛋白T濃度度的標準水平，對于此類數據，將其判定為異常數據，并且不對其進行統計分析。

通過計算得到當多糖濃度為20%時，B組小鼠心肌損傷恢復率為23.26%。說明多糖濃度為20%時，其對小鼠運動心肌損傷恢復具有一定的促進作用，但是促進作用不太明顯。

2.2 40%多糖濃度對心肌損傷的影響分析

當多糖濃度為40%時，通過運動試驗得到兩組小鼠運動前后心肌損傷恢復蛋白T濃度變化情況見表2。

表2 運動前后心肌損傷恢復蛋白T濃度變化情況Tab.2 Changes of cardiac troponin T concentration before and after exercise

由表2可知，運動前B組小鼠心肌損傷恢復蛋白T濃度與A組相同，兩組之間并無統計學差異；隨著運動試驗的進行，時間與運動強度的增加，兩組小鼠運動后心肌損傷恢復蛋白T濃度均得到了增長，B組小鼠心肌損傷恢復蛋白T濃度明顯高于A組。

通過計算得到當多糖濃度為40%時，B組小鼠心肌損傷恢復率為45.21%。說明多糖濃度為40%時，其對小鼠運動心肌損傷恢復具有較大的促進作用。

2.3 80%多糖濃度對心肌損傷的影響分析

當多糖濃度為80%時，通過運動試驗得到兩組小鼠運動前后心肌損傷恢復蛋白T濃度變化情況見表3。

表3 運動前后心肌損傷恢復蛋白T濃度變化情況Tab.3 Changes of cardiac troponin T concentration before and after exercise

由表3可知，運動前B組小鼠心肌損傷恢復蛋白T濃度與A組相近，2組之間并無統計學差異；隨著運動試驗的進行，時間與運動強度的增加，兩組小鼠運動后心肌損傷恢復蛋白T濃度均得到了增長，B組小鼠心肌損傷恢復蛋白T濃度明顯高于A組。

通過計算得到當多糖濃度為40%時，B組小鼠心肌損傷恢復率為68. 94%。說明多糖濃度為40%時，其對小鼠運動心肌損傷恢復具有極大的促進作用。

2.4 試驗結果對比

將上述的試驗結果進行整合，得到B組試驗對比情況見圖1。

圖1 試驗結果多糖濃度對比Fig.1 Comparison of polysaccharide concentration

由圖1可知，隨著投喂多糖膠囊濃度的增加，B組小鼠運動后心肌損傷恢復蛋白T濃度也越來越高，得到的心肌損傷恢復率也越來越大，其對小鼠運動心肌損傷恢復的促進作用也就越大。說明羊肚菌胞內多糖濃度越大，其對小鼠運動心肌損傷恢復的促進作用越大。

3 結語

心肌是生物體的重要組成部分，從試驗結果可以看出，隨著羊肚菌胞內多糖濃度的增加，小鼠運動后心肌損傷恢復蛋白T濃度也越來越高，得到的心肌損傷恢復率也越來越大，其對小鼠運動心肌損傷恢復的促進作用也就越大。因此，對羊肚菌胞內多糖的作用進行詳細驗證，若是羊肚菌胞內多糖的作用是有利的，可以采用羊肚菌胞內多糖對運動心肌損傷進行治療。