摘要:該文結合基層防疫工作實踐,介紹一項因現場無法確診而需要采集病料送權威機構進行微生物學、血清學、病理學檢測而開展的樣品采集、保存、送檢技術,指導基層更好地開展畜禽防疫衛生監督工作。
關鍵詞:疑似病(死)畜禽動物;樣品采集;保存;送檢
中圖分類號:S851.34
文獻標識碼:B
doi: 10.3969/j.issn.2096-3637.2019.15.009
作者簡介:譚菊(1969-),女,大專,高級獸醫師,從事動物衛生監督工作。
0引言
在日常工作中,檢疫人員會遇到疑似患病動物死亡或者染病的動物產品,為明確病因,更好地開展工作,亦為更強有力地說服畜禽戶主采取相關處理措施,需抽取病理樣品送到有檢測能力的權威機構進行微生物學、血清學、病理學檢測,然后根據權威機構提供的檢測報告進行處理。疑似病(死)畜禽動物的樣品采集與保存送檢是開展動物疫病監測的前提,采樣方法、采樣部位、采樣數量和樣品是否具有代表性直接決定檢測結果的準確性和結論的科學性,是指導動物防疫衛生監督工作的重要環節,是基層防疫檢疫人員必須掌握的一項實用技術。
1采樣材料
1.1防護品
防護衣、防護手套、防護口罩、防護帽、護目鏡。
1.2采樣工具
采樣箱、保濕箱、解剖刀、剪刀、鉤、鑷子、酒精燈、酒精棉、碘灑棉、注射器、棉球(棒)、玻片等。
1.3裝納樣品的容器
小瓶、玻片、平皿、離心管、封口樣品袋、塑料樣品袋、鋁盒、膠布等。
1.4采樣記錄用品
采樣登記表、不干膠標簽、簽字筆、記號筆、采樣單。
1.5樣品保存液
石碳酸溶液、滅菌生理鹽水、50%滅菌甘油生理鹽水、10%甲醛溶液、血液抗凝劑等。
2采樣前準備
(1)采樣前對畜禽進行疫病診斷。
(2)采樣前確定采樣對象(疑似患病動物)和采樣部位以及采樣量,并準備好相應材料和工具。
3采樣方法
根據不同疫病或檢驗目的采集疑似病死畜禽動物相應的樣品,分述如下。
(1)對于豬瘟(含非洲豬瘟)、豬丹毒、豬口蹄疫或豬水泡病、豬肺疫、豬流行性感冒、豬呼吸性鏈球菌病、豬藍耳病、雞新城疫等高熱性病疑似死亡的畜禽可以采集病死畜禽的分泌物,如鼻液、膿性分泌液、水泡液、陰道分泌物等,采集方法:用棉棒蘸取分泌物(鼻液、膿液、水泡液、陰道分泌物等)放在消過毒的樣品容器中。
(2)對于炭疽和一些血液寄生蟲病疑似病死的動物需采取血液樣本,采樣方法:用注射器在頸部靜脈抽取5mL,放在樣品容器內,不要搖動,或者滴1~2滴在玻片上,等干燥后固定,可以多做幾張。
(3)對于被毛粗亂無光澤、過分消瘦的動物懷疑寄生蟲病死亡的動物樣品,采集方法:采集動物糞便,放在容器瓶里,或者用玻片做成壓片。
(4)對于染病的動物產品,如豬瘟(含非洲豬瘟)、豬丹毒等瀕臨死亡已被養殖業主宰殺后的病畜產品樣,采集方法是采集實質病變臟器,如淋巴結、腎臟、心包、皮膚等,選擇病變組織和正常組織相鄰的部位,用剪刀剪下含正常組織和病變組織樣品2、3塊(每塊5~10 g)放在10%甲醛溶液(病毒使用)或者消毒過的容器中(細菌)。
(5)對于皮膚疥癬的病料,采集方法是用刃口鈍的刮刀使勁刮皮膚表面,然后將刮出的皮屑放到容器瓶內,加入70%酒精,密封蓋緊。
(6)對于即將瀕死的疑似非洲豬瘟病豬,用75%酒精擦拭患豬頸靜脈處,然后用無菌注射器在病豬頸靜脈抽取血液,放入盛有抗凝劑的采血小管中,數量達采血小管2/3處。
(7)在樣品采集時,采樣人員穿戴好防護服、防護帽、護目鏡,做好個人衛生防護。盡量采用無菌操作采集具有代表性的病料作樣品。操作熟練麻利,不要污染樣品及其他物品。及時填寫樣品登記表、標簽、采樣單,在樣品上貼好標簽(與登記表對應),用記號筆做好標記。如需加入保存劑或其他處理劑的,立即進行現場處理并清點采樣數量(包括復檢和留樣備份)。
4樣品保存和送檢
(1)樣品保存。病樣采好后,通常將病樣放在有冰塊的保溫箱內保存,并立即送往權威機構檢測。如果病樣不能很快送到權威機構檢測,那么根據需要加入適量的保存劑,根據檢驗項目種類進行相應處理。如需要血清檢測的,不加抗凝血劑,將采集的血液在室溫下靜置至凝固,收集析出的血清,裝于小瓶中,將小瓶盛裝在鋁盒內,在鋁盒內加填塞物;需做細菌或病毒學檢驗的,每10 mL血液加1 mL抗凝血劑等。
(2)病樣送檢前開具委托檢測書(簡單說明目的要求以及病料病理變化及疑似病情說明、檢測項目等信息),填制檢測項目表和樣品交接單,進行樣品交接。
5疑似病死動物及環境的處理
在病樣送檢后結果未出來前,擬定一份裁定協議后,對該采樣病死畜禽嚴格作無害化處理,對環境和相關人員進行消毒。
6討論與結論
6.1討論
疑似病死畜禽動物的確診,第一,加強檢疫人員和養殖業主對動物疫病的業務知識培訓,提高對疫病病理病狀病征的認識;第二,強化基層檢疫人員安全知識和操作技能培訓,在與疑似病死畜禽動物接觸時,一定要戴口罩和護目鏡,穿防護服,做好個人衛生;第三,嚴格按規范的疑似病死畜禽動物病料樣品采集、保存與送檢。
6.2結論
規范的疑似病死畜禽動物樣品的采集、保存和送檢直接決定檢測的準確性和結論的科學性,是基層動物防疫和動物公共衛生常見的工作手段,是解決防疫人員與養殖業主爭執的重要依據,是做好基層防疫工作必須掌握的一門實用技術。特別是目前國內非洲豬瘟疫情頻發,采集病樣送與有資質的檢測機構確診是一項長期的常規性的工作,所以有必要加強樣品采集保存送檢的規范操作技術的普及。
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