液質(zhì)聯(lián)用儀測定辣椒中氟蟲腈及其代謝物的殘留

豆志培

隨著人們物質(zhì)生活和文化生活水平的提高，辣椒作為一種低脂肪的健康辛香食品備受人們喜愛，從而有力地促進了辣椒的快速發(fā)展和辣椒需求量的不斷增加。由于農(nóng)戶在種植過程中忽視對農(nóng)藥的正確、合理使用，農(nóng)藥超標現(xiàn)象逐年增加。為保障人們的身體健康，有效控制農(nóng)藥在辣椒生產(chǎn)中的使用和對其殘留量進行監(jiān)控，大力開展農(nóng)藥殘留檢測技術特別是相關的前處理技術的研究是非常必要的。本文主要介紹了檢測氟蟲腈及其代謝物在辣椒中的殘留分析方法。氟蟲腈英文通用名稱為Fipronil，商品名稱銳勁特，化學名稱5-氨基-1-（2.6-二氯-4-三氟甲基苯基）-4-三氟甲基亞磺酰基吡唑-3-腈，是法國羅納普朗克農(nóng)化公司于1987 年開發(fā)研制的苯基吡唑類新型高活性殺蟲劑，用于防治水稻、蔬菜、棉花等多種作物害蟲，因防蟲效果好、用量低、生效時間長等優(yōu)點是代替高毒有機磷農(nóng)藥的首選藥劑。隨著氟蟲腈的廣泛應用，在正常施用下，氟蟲腈代謝物主要有氟甲腈（MB46513）、氟蟲腈砜（MB46136）、氟蟲腈硫醚（MB45950），殘留物之和以氟蟲腈表示，辣椒中氟蟲腈最大殘留限量為0.02 mg/kg，它們都具有一定的毒性，有的毒性甚至高于母體。

一、試驗部分

（一）主要儀器、試劑與材料

1.主要儀器。液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用儀，配有電噴霧離子源（美國AB公司 QTRAP5500）;高速勻漿機（德國IKA）;Milli-Q超純水儀（美國Millipore公司）;快速混合器（SK-1，金壇市華峰儀器有限公司）;分析天平，感量0.01 mg（梅特勒-托利多PL602-S）;離心機，最大轉(zhuǎn)速8000 r/min（上海飛鴿TGL-15B）。

2.試劑。氟蟲腈標準品（純度>

99%），氟甲腈標準品（純度>99%），氟蟲腈硫醚標準品（純度>

99%），氟蟲腈砜標準品（純度>99%），由農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護科研監(jiān)測所提供。用甲醇稀釋1000 mg/L氟蟲腈及其代謝標準溶液，配置成100 mg/L單標標準儲備液，置于-20 ℃保存，使用時用甲醇水（1+1）溶液稀釋配置標準工作液，有效期3個月。混合標準溶液避光在0～4 ℃下保存，有效期1個月。基質(zhì)混合標準工作溶液應現(xiàn)用現(xiàn)配。

3.材料。甲醇：色譜純;乙腈：色譜純;氯化鈉：分析純;復合凈化柱：填料為50 mg PSA、50 mg C18、50 mg MgSo4。

（二）樣品前處理

稱取25.0 g試樣（精確至0.01 g）于廣口瓶中，加入50.0 mL乙腈，用高速組織搗碎機在15 000 r/min下勻漿提取高速勻漿1 min，放入盛有5～7 g氯化鈉的具塞量筒中，收集濾液40～50 mL，蓋上塞子劇烈震蕩1 min，在室溫下靜置20 min，使乙腈相和水相分層。從上述具塞量筒中吸取2.0 mL上層液于復合柱凈化管中，混勻器混勻;于8000 r/min下離心5 min，從凈化管中準確吸取1 mL上清液于5 mL離心管中，離心管中再加入1 mL的超純水，在混勻器上混勻;經(jīng)0.2μm的有機濾膜過濾并轉(zhuǎn)移到2 mL的進樣瓶中，供液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測定。

（三）儀器條件

色譜柱：XR-ODS 2.0 mmi.d×

75 mm;柱溫：40 ℃;進樣量：1uL;離子源：ESI;掃描方式：負離子掃

描;檢測方式：多反應監(jiān)測;電噴霧電壓：5500V;離子源溫度：550 ℃;霧化氣壓力：0.38 mpa;流動相及梯度洗脫條件見表1;氟蟲腈及其代謝物離子選擇參數(shù)見表2。

二、測定與分析

（一）標準曲線

取10.0 ug/mL的標準品儲備溶液，用辣椒的空白基質(zhì)液逐級稀釋，配置成濃度分別為0.005 ug/mL、0.01 ug/mL、0.025 ug/mL、0.035 ug/mL、0.045 ug/mL系列溶液，經(jīng)液質(zhì)聯(lián)用儀分析測定，檢測各個濃度的峰面積。橫坐標為質(zhì)量濃度，縱坐標為峰面積繪制標準曲線，得出氟蟲腈及其代謝物的相關系數(shù)，結(jié)果見表3。由此可見，氟蟲腈及其代謝物的峰面積響應值與其質(zhì)量濃度0.005～0.045 ug/mL線性回歸方程r≥0.998 53。

（二）方法的靈敏度

在上述儀器條件下以3倍的信噪比S/N計算方法檢出限，結(jié)果見表3。

（三）方法的準確度與精密度

用空白辣椒樣品進行添加回收試驗，添加濃度為0.01 mg/kg、

0.02 mg/kg、0.05 mg/kg，每個添加

濃度重復5遍，分別按照上述前處理操作以及儀器分析方法計算回收率和相對標準偏差（RSD），結(jié)果辣椒中氟蟲腈及其代謝物的添加回收率0.01～0.05 mg/kg為85.2%～93.3%，變異系數(shù)為4.54%～

8.16%。

三、結(jié)論

由于近年來液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術得到了快速發(fā)展而且可以提高方法的選擇性和靈敏度，簡化前處理的操作步驟。本試驗采用相對簡單的前處理方法，以乙腈作為提取劑，復合凈化柱凈化，經(jīng)液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法分析。該方法簡單、快速、靈敏度高，可作為辣椒中氟蟲腈及其代謝物殘留的定性定量檢測。