XpertMTB/RIF技術(shù)在肺結(jié)核診斷及利福平耐藥檢測中的臨床應(yīng)用

劉永莉 呂正煊（通訊作者） 張鳳翔

（1昆明市第三人民醫(yī)院介入結(jié)核科 云南 昆明 650041）

（2昆明醫(yī)學(xué)科學(xué)研究所 云南 昆明 650000）

肺結(jié)核是嚴(yán)重危害人類健康的呼吸道傳染疾病，同時(shí)也是導(dǎo)致成年人的死亡的第二大感染性疾?。?］。我國肺結(jié)核病防治面臨形勢較為嚴(yán)峻，統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)表明，我國每年新增的結(jié)核病患者中，肺結(jié)核占其40%，達(dá)到60萬人，而每年死于肺結(jié)核病約15萬人，高居全球第二位［2］。本研究采用痰涂片、羅氏固體培養(yǎng)基、BACTEC MGI T960系統(tǒng)、Xpert MTB/RIF系統(tǒng)進(jìn)行活動(dòng)性肺結(jié)核疾病的診斷和耐藥性的檢驗(yàn)，分析其診斷效果以及對(duì)利福平耐藥性檢測的意義。

1.資料與方法

1.1 資料來源與分組

隨機(jī)選取2017年2月－2018年2月我院接診的211例肺結(jié)核患者作為樣本，并從中篩選出120例作為研究對(duì)象。篩選標(biāo)準(zhǔn)為：被確診為活動(dòng)性肺結(jié)核；無其他并發(fā)癥；自愿參加該對(duì)比研究。其中其中對(duì)照組為進(jìn)行痰涂片檢測，觀察組1為采用Gene Xpert MTB/RIF技術(shù)檢測，觀察組2為采用羅氏固體培養(yǎng)基法檢測，觀察組3為采用BAC TEC MGI T960系統(tǒng)方法進(jìn)行檢測。對(duì)比四組方法的檢測效果以及對(duì)利福平耐藥性檢測結(jié)果。

1.2 方法

取患者晨間的口痰作為檢測樣本。讓患者在早晨漱口后咳出濃痰，分別用于各組檢測。在取痰時(shí)注意以下事項(xiàng)：在醫(yī)生或醫(yī)護(hù)人員的協(xié)助下取樣取清晨的痰，因?yàn)樵摃r(shí)間段痰量多且含菌量多；取痰時(shí)患者應(yīng)漱口3遍及以上。取痰結(jié)束后對(duì)照組采用痰涂片檢測，觀察組1采用Gene Xpert MTB/RIF技術(shù)檢測，痰樣品先按1：2的比例加入處理液，渦旋振蕩器上進(jìn)行渦旋振蕩15～30s，并放入室溫靜置，使其液化，再將其轉(zhuǎn)移到反應(yīng)試劑盒中，再將試劑盒放入GeneXpert儀器（美國Cepheid公司生產(chǎn)）中進(jìn)行檢測。觀察組2使用羅氏固體培養(yǎng)基進(jìn)行結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)；觀察組3使用BD公司BACTECTM MGITTM 960系統(tǒng)進(jìn)行檢測。

1.3 療效評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)和觀察指標(biāo)

根據(jù)四組方法的檢測結(jié)果，對(duì)比患者的耐藥性和診斷效果。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)采用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)數(shù)資料采用率（%）表示，進(jìn)行χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料采用（±s）表示，進(jìn)行t檢驗(yàn)，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.結(jié)果

2.1 四組方法結(jié)核分枝桿菌檢測結(jié)果，見表。

表 四組檢測結(jié)核分枝桿菌結(jié)果比較（例）

2.2 利福平耐藥監(jiān)測結(jié)果

對(duì)38例痰涂片后呈陽性的患者進(jìn)行傳統(tǒng)藥敏試驗(yàn)，其中利福平耐藥11例（28.94%），利福平敏感27例（71.06%）；GeneXpert MT/RIF檢測出對(duì)利福平耐藥11例，對(duì)利福平敏感26例,。以傳統(tǒng)藥敏試驗(yàn)作為標(biāo)準(zhǔn)，GeneXpert MTB/RIF檢測利福平耐藥結(jié)核病的敏感性為72.72%，特異性為88.89%。

3.討論

目前用于結(jié)核病診斷的方法有多種，痰涂片法是應(yīng)用的較早的一種，其操作簡單，成本低廉，在結(jié)核病診斷過程中起到了重要的作用，但其靈敏度低，特異性低，易受雜菌干擾限制了其推廣應(yīng)用，而羅氏固體培養(yǎng)基法是我國廣大醫(yī)院通用的方法，其敏感性和特異性較高，但缺點(diǎn)在于檢測時(shí)間長。BACTECTM MGITTM960系統(tǒng)是BD公司推出的快速分枝桿菌培養(yǎng)、鑒定、藥敏系統(tǒng)，其靈敏性和特異性較高，但成本較高，Gene Xpert MTB/RIF技術(shù)檢測分析原理是熒光標(biāo)記定量診斷技術(shù)，能夠有效的檢測患者的身體是否出現(xiàn)病變癥狀以及對(duì)利福平藥物的耐受性進(jìn)行檢測，其應(yīng)用越來越引起人們的注意[3-5]。

在本次研究中，通過痰涂片法、Gene Xpert MTB/RIF檢測法、羅氏固體培養(yǎng)基法、BACTECTM MGITTM960系統(tǒng)檢測法四組比較發(fā)現(xiàn)，Gene Xpert MTB/RIF檢測法、羅氏固體培養(yǎng)基法、BACTECTM MGITTM960用于檢測結(jié)核病其確診率要遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于痰涂片法，其檢測結(jié)核分枝桿菌靈敏性依次為31.7%、48.3%、40.8%和50.0%。以傳統(tǒng)藥敏實(shí)驗(yàn)作為標(biāo)準(zhǔn)，Gene Xpert MTB/RIF檢測法其檢測利福平耐藥結(jié)核病的敏感性、特異性為分別達(dá)到了72.72%和88.89%，說明其有較高的敏感性和特異性。另外，Gene Xpert MTB/RIF檢測法與BACTECTM MGITTM960系統(tǒng)檢測法有相近的靈敏度，但是，其成本遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于與BACTECTM MGITTM960系統(tǒng)檢測。

綜上所述，針對(duì)肺結(jié)核患者在本院采用Gene Xpert MTB/RIF技術(shù)以后，相較于痰涂片診斷，其靈敏度更高，其又克服了羅氏固體培養(yǎng)基法檢測時(shí)間長，BACTECTM MGITTM960系統(tǒng)檢測成本高昂等特點(diǎn)，值得在臨床應(yīng)用。