妊娠期肝內膽汁淤積癥患者胎盤內質網蛋白髓過氧化酶的表達量分析

邱大健 張怡 華益民

（四川大學華西第二醫院心臟發育與早期干預研究室出生缺陷與相關婦兒疾病教育部重點實驗室 四川 成都 610041）

妊娠期肝內膽汁淤積癥（ICP）是一種多種因素共同作用的發病機制不明的妊娠期特有嚴重并發癥，病理特征為細小膽管內膽汁淤積，臨床表現主要有皮膚瘙癢、黃疸及肝臟酶學指標及血清膽汁酸的升高，雖對母體影響不大，但容易導致胎兒不良結局，增加新生兒患病及死亡風險。基于此，本研究探討了ICP患者胎盤中內質網蛋白(ERp29)及髓過氧化酶（MPO）的表達，旨在為明確ICP發病機制，為ICP的防治提供新的方向。

1.資料與方法

1.1 一般資料

本研究選取2016年1月－2019年1月在我院住院分娩的80例ICP孕產婦作為ICP組，均確診為ICP，診斷標準參照《ICP患者診療指南(第一版)》［1］；同期選取在我院因胎位不正及社會因素等原因選擇剖宮產的80例正常孕產婦作為對照組，納入標準：漢族，初產婦，單胎妊娠，所有孕產婦均在我院建檔并按時產檢且臨床資料完整，本研究經我院倫理委員會批準，所有孕產婦及家屬知情同意并自愿參與。排除標準：孕周＞40周者，妊娠期高血壓疾病者，肝膽疾病者，合并嚴重內科疾病者，有口服避孕藥史者，免疫系統及血液系統疾病者，合并其他影響ICP診斷疾病者，不能配合完成研究者。ICP組年齡22～31歲，平均年齡（26.5±2.1）歲；孕周36+3～40周，平均孕周（37.9±1.1）周。對照組年齡22-33歲，平均年齡（27.2±2.8）歲；孕周37+1～40周，平均孕周（38.7±0.7）周。兩組一般資料經統計分析，差異不顯著（P＞0.05），組間具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 生化指標檢測 剖宮產前所有受試者均晨起空腹采靜脈血，用于檢測血清總膽汁酸(TBA)、天冬氨酸氨基轉移酶(AST)及丙氨酸氨基轉移酶(ALT)等，具體操作按試劑盒說明書進行。

1.2.2 胎盤標本采集及指標檢測 剖宮產胎盤娩出即刻，避開鈣化區及梗死區，在胎盤組織母體面中央區取大小約1 cm×1cm×1cm的組織兩塊，一塊用于制作組織切片，一塊用于提取組織總蛋白。采用免疫組織化學方法檢測胎盤組織ERp29及MPO表達陽性率（高倍鏡下取10個視野，平均陽性細胞數占比＞30%即為陽性），Western blot檢測胎盤組織ERp29及MPO蛋白表達（以tubulin作為內參）。

1.3 統計學方法

數據采用SPSS20.0統計軟件進行統計學分析，計數資料采用率（%）表示，進行χ2檢驗，計量資料采用（±s）表示，進行t檢驗，P＜0.05為差異具有統計學意義。

2.結果

2.1 兩組TBA、AST及ALT比較結果

ICP組血清TBA、AST及ALT水平均顯著高于對照組（P＜0.05），見表1。

表1 兩組血清TBA、AST及ALT比較結果（±s）

表1 兩組血清TBA、AST及ALT比較結果（±s）

組別 n TBA（μmol/l） AST（IU/L） ALT（IU/L）ICP組 80 71.21±5.63 127.96±6.64 181.63±11.58對照組 80 3.12±0.45 14.95±2.63 11.39±1.52 t 107.8294 141.5302 130.3733 P＜0.05 ＜0.05 ＜0.05

2.2 兩組胎盤組織ERp29及MPO表達陽性率

ICP組胎盤組織ERp29表達陽性率顯著高于對照組（P＜0.05），MPO表達陽性率顯著低于對照組（P＜0.05），見表2。

表2 兩組胎盤組織ERp29及MPO表達陽性率[n(%)]

2.3 兩組胎盤組織ERp29及MPO蛋白表達

ICP組胎盤組織ERp29蛋白表達量顯著高于對照組（P＜0.05），MPO蛋白表達量顯著低于對照組（P＜0.05），見表3。

表3 兩組胎盤組織ERp29及MPO蛋白表達（±s）

表3 兩組胎盤組織ERp29及MPO蛋白表達（±s）

組別 n ERp29 MPO對照組 80 0.23±0.07 0.63±0.05 ICP組 80 0.59±0.06 0.28±0.02 t 34.9251 53.1318 P＜0.05 ＜0.05

3.討論

ICP的發生發展與胎盤功能密切相關，且高膽酸水平對導致胎盤滋養細胞凋亡，由此我們推測，高膽酸誘導的胎盤凋亡可能參與了ICP的發生發展。ERp29屬于內質網蛋白的一種，在氧化應激的誘導及細胞凋亡中發揮重要作用，ERp29過表達可誘導腫瘤細胞凋亡，抑制其增殖［2］。MPO屬于過氧化物酶，可通過抑制caspase-3的活化達到抑制細胞凋亡的目的，目前，MPO已經被證實在多種惡性腫瘤中過表達。

本研究結果提示，ERp29、MPO的表達參與ICP的發生發展，可能成為該病治療的新靶點。