多花黃精中總黃酮提取工藝優化及可視化分析

劉清華 高漢云 陳桂芬 華碧春 王英豪

摘要：目的? 優化多花黃精中總黃酮的提取工藝。方法? 采用U10（108）均勻設計，以乙醇濃度、提取時間、提取次數、提取溫度、固液比為考察因素，以總黃酮含量為評價指標，對多花黃精提取工藝進行可視化分析。結果? 除提取次數外，乙醇濃度、提取時間、提取溫度及固液比對多花黃精中總黃酮的含量均有影響。最佳提取工藝范圍為：乙醇濃度50%～70%，提取溫度50～60 ℃，提取時間140～150 min，提取2次，固液比1∶14～1∶18。結論? 可視化分析可用于優化多花黃精中總黃酮的提取工藝。

關鍵詞：多花黃精;總黃酮;提取工藝;可視化分析;均勻設計

中圖分類號：R284.2??? 文獻標識碼：A??? 文章編號：1005-5304（2019）08-0089-05

DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2019.08.018????? 開放科學（資源服務）標識碼（OSID）：

Abstract： Objective To optimize the extraction process of total flavonoids from Polygonatum cyrtonema Hua. Methods U10（108） uniform design was used. The factors of investigation were ethanol concentration， extraction duration， extraction times， extraction temperature and solid-liquid ratio. The content of flavonoids was analyzed by visualization analysis. Results Except for extraction times， the content of flavonoids was all affected by ethanol concentration， extraction duration， extraction temperature and solid-liquid ratio. The best technological parameters for extracting were： ethanol concentration 50%–70%， extraction temperature 50–60 ℃， extraction duration 140–150 min， extract 2 times， solid-liquid ratio 1：14–1：18. Conclusion The visualization analysis can be used to optimize the extraction process of flavonoids from Polygonatum cyrtonema Hua.

Keywords： Polygonatum sibiricum Hua.; total flavonoids; extraction process; visualization analysis; uniform design

黃精為百合科植物多花黃精Polygonatum cyrtonema Hua.、黃精Polygonatum sibiricum Red.、滇黃精Polygonatum kingianum Coll. et Hemsl.的干燥根莖[1]，主要分布于我國中南部地區及江蘇、安徽、福建、江西、浙江等省[2]，現為緊缺的大宗藥材之一[3]。據多項科學考察報告及藥用植物志記載，福建龍棲山、閩江源自然保護區、君子峰自然保護區、天寶巖自然保護區、明溪縣等地區蘊藏有豐富的多花黃精野生資源[4]。因此，本研究采用可視化分析技術，初步探索多花黃精的總黃酮提取工藝，為深入研究多花黃精的藥材質量，以及確定其優質藥材的評價標準提供依據。

1? 儀器與試藥

FA20004N型電子分析天平，上海精密科學儀器有限公司;UV-9100型紫外可見分光光度計，北京瑞利分析儀器公司;KQ-500E型超聲波清洗儀，昆山市超聲儀器有限公司;HH-4型數顯恒溫水浴鍋，國華電器有限公司;SHB-Ⅲ型循環水式多用真空泵，鄭州長城科工貿有限公司。

黃精飲片，購于福建中醫藥大學國醫堂，經福建中醫藥大學藥學院實驗師王河山鑒定，為百合科植物多花黃精Polygonatum cyrtonema Hua.的干燥根莖;蘆丁對照品（HPLC純度≥98%，批號Y06J8S37439），上海源葉生物科技有限公司;亞硝酸鈉、硝酸鋁、氫氧化鈉、無水乙醇等試劑均為分析純，實驗用水為超純水。

2? 方法與結果

2.1? 總黃酮含量測定

精密稱取蘆丁對照品10 mg，置于50 mL量瓶中，用70%乙醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得濃度為0.2 mg/mL的蘆丁對照品溶液。分別精密吸取蘆丁對照品溶液0.5、1.0、2.0、4.0、8.0 mL于25 mL量瓶中，均加入70%乙醇至10 mL，再加入5%亞硝酸鈉溶液0.7 mL，搖勻，放置6 min，再加入10%硝酸鋁溶液0.7 mL，搖勻，放置6 min，再加入4%氫氧化鈉溶液5.5 mL，用70%乙醇定容至刻度，搖勻，放置15 min，以70%乙醇作為參比溶液，于分光光度計波長510 nm處測定吸光度值。以吸光度為縱坐標，蘆丁含量（mg）為橫坐標，進行回歸處理，繪制標準曲線[5]。結果表明，蘆丁對照品含量在0.1～1.6 mg范圍內與吸光度線性關系良好，回歸方程為Y=0.538X+0.013，r2=0.998。