胸腔積液細胞蠟塊免疫組化檢測對胸腔積液的價值分析

姜洪翠

[摘要] 目的 分析胸腔積液細胞蠟塊免疫組化檢測對胸腔積液的價值。 方法 方便選取2018年2月—2019年2月該院診斷的96例胸腔積液病患，進行隨機分組，46例病患進行單純細胞涂片HE染色作為參照組，50例病患進行細胞蠟塊免疫組化檢測作為探究組，觀察并對比診斷結果。 結果 不同方式診斷后對比兩組診斷準確率，探究組98.00%顯著高于參照組86.96%（χ2=4.32，P<0.05）;對比兩組檢測結果的陽性率，探究組陽性率100.00%顯著高于參照組78.26%（χ2=10.45，P<0.05）;96例胸腔積液病患中，48例診斷為查見腺癌細胞，48例為查見反應性增生間皮細胞。從抗體表達來看，發現腺癌細胞的特異性抗體有CK7、CEA和TTF-1，反應性增生間皮細胞的特異性抗體有 WT-1、Calretinin和CK5/6（P<0.05）。結論 細胞蠟塊免疫組化檢測對胸腔積液的診斷準確率高，值得臨床推廣。

[關鍵詞] 胸腔積液;細胞蠟塊免疫組化檢測;胸腔積液

[中圖分類號] R561? ? ? ? ? [文獻標識碼] A? ? ? ? ? [文章編號] 1674-0742（2019）06（b）-0023-03

[Abstract] Objective To analyze the value of immunohistochemical detection of pleural effusion cells in pleural effusion. Methods A total of 96 patients with pleural effusion diagnosed in our hospital from February 20 to February 2019 were convenient enrolled in a randomized group. 46 patients underwent HE staining with a single cell smear as a reference group， and 50 patients underwent cell waxing block immunohistochemistry was used as an exploration group to observe and compare the diagnosis results. Results After diagnosis， the diagnostic accuracy of the two groups was compared. 98.00% of the exploration group was significantly higher than the reference group by 86.96% （χ2=4.32， P<0.05）. The positive rate of the two groups was 100.00%， higher than the reference group of 78.26% （χ2=10.45， P<0.05）; of the 96 patients with pleural effusion， 48 were diagnosed as adenocarcinoma cells， and 48 were found to be reactive hyperplastic mesothelial cells. From the expression of antibodies， specific antibodies against adenocarcinoma cells were found to be CK7， CEA and TTF-1， and specific antibodies to reactive proliferative mesothelial cells were WT-1， Calretinin and CK5/6 （P<0.05）. Conclusion The immunohistochemical detection of cell wax block has a high diagnostic accuracy for pleural effusion， which is worthy of clinical promotion.

[Key words] Pleural effusion; Immunohistochemistry detection of cell wax block; Pleural effusion

胸腔積液是臨床常見的一種癥候，主要特征為胸膜腔內病理性液體積聚，臨床表現為胸悶、呼吸困難、氣短、心悸等[1]。任何原因導致的胸膜腔內液體超出正常值，都屬于胸腔積液，該研究方便選取2018年2月—2019年2月該院診斷的96例胸腔積液病患作為研究對象，分析細胞蠟塊免疫組化檢測的診斷價值，現報道如下。

1? 資料與方法

1.1? 一般資料

方便選取該院診斷的96例胸腔積液待查病患，納入標準[2]：①所有病患均符合胸腔積液的診斷標準;②年齡超過25歲;③該研究已經倫理學委員會批準，患者均知情同意。排除心肝腎障礙及認知障礙病患。隨機分為50例探究組和46例參照組。兩組病患的年齡、性別等基本資料，差異無統計學意義（P>0.05）。見表1。

1.2? 方法

所有病患先進行標本采集，選擇清晨取50 mL新鮮的胸腔積液，將取好的新鮮血液放入4個試管中，進行離心處理，控制在2 500 r/min轉速，離心15 min，吸出上層清液，保留沉渣[3]。

1.2.1? 參照組? 參照組46例病患進行單純細胞涂片HE染色，直接用棉簽對沉渣中的水分進行吸取，然后進行細胞涂片。將剩下的沉渣加入濃度為90%的乙醇中，進行固定處理，將固定好的濕片放在通風柜中晾干，然后進行常規HE染色[4]。

1.2.2? 探究組? 探究組50例病患進行細胞蠟塊免疫組化檢測：①細胞蠟塊制取：第1次離心后的沉渣，再加入濃度為1%的融化瓊脂，進行第2次離心處理;然后吸走上層清液，用濾紙包好沉渣進行脫水;最后用石蠟進行包埋制成細胞蠟塊，然后連續切片，切片的厚度控制在3 μm[5]。②免疫組化檢測：按照染色流程，選擇SP法（Maxvision快捷免疫組織化學），選擇Maxvision試劑盒和二氨基聯苯胺顯色試劑，嚴格按照說明書進行檢測操作[6]。觀察特異性抗體CK7、CEA、WT-1、Calretinin、CK5/6和TTF-1的表達，對比分析腺癌細胞和反應性增生間皮細胞的診斷準確率。

1.3? 觀察指標

①同方式診斷后對比兩組診斷準確率（良性率、惡性率和不確定率）;②對比兩組檢測結果的陽性例數、陽性率、陰性例數、陰性率;③腺癌細胞和反應性增生間皮細胞對特異性抗體CK7、CEA、WT-1、Calretinin、CK5/6和TTF-1的表達。

1.4? 評價標準

①診斷結果評價[7]：細胞有彌散且形態溫和，無不典型性為良性（即反應性增生間皮細胞）;細胞出現成團且形態與核有不典型性為惡性（即腺癌）：細胞有彌散且成團，但細胞核出現輕中度不典型性為不確定。②陽性診斷標準：CK7、CEA、CK5/6出現黃色細胞質染色，WT-1和TTF-1的細胞核出現棕黃色染色，Calretinin的細胞質和核都出現著色。

1.5? 統計方法

該文所得實驗數據均采用SPSS 23.0統計學軟件進行檢驗，組間計量資料用（x±s）表示，采用t檢驗;計數資料以率（%）表示，采用χ2檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2? 結果

2.1? 診斷結果對比分析

不同方式診斷后對比兩組診斷準確率，探究組98.00%（49/50）顯著高于參照組86.96%（40/46），差異有統計學意義（χ2=4.32，P<0.05），見表2。

2.2? 檢測結果陽性率對比分析

對比兩組檢測結果的陽性率，探究組陽性率100.00%顯著高于參照組78.26%，差異有統計學意義（χ2=10.45，P<0.05），見表3。

2.3? 不同癌細胞的抗體表達對比分析

96例胸腔積液病患中，48例診斷為腺癌細胞，48例為反應性增生間皮細胞。從抗體表達來看，發現腺癌細胞的特異性抗體有CK7、CEA和TTF-1，反應性增生間皮細胞的特異性抗體有 WT-1、Calretinin和CK5/6，差異有統計學意義（P<0.05），見表4。

3? 討論

胸部腫瘤的并發癥之一是胸腔積液，引發胸腔積液的因素很多，主要由炎癥和肺腺癌引起，有效的診斷方式是治療胸腔積液的前提[8]。胸腔積液最為常見的是惡性腫瘤，包括轉移性癌（以肺癌、腸癌和乳腺癌最為常見）、淋巴瘤、惡性間皮瘤等[9]。臨床常規的診斷方式為細胞涂片檢測，通過離心可以收集細胞少、假陰性的情況，但這種檢測方式因容易出現細胞成團、成堆、角質化和內黏液不明顯等情況[10]。另外，細胞成分復雜，腺癌細胞核增生間皮細胞的細胞形態較為相似，進行細胞涂片檢測，不容易鑒別。此外，由于癌細胞分布較為分散，進行細胞涂片HE染色的陽性率很低，導致檢測結果不準確[11]。隨著醫學的發展和診斷技術的進步，細胞蠟塊技術成為了胸腔積液診斷的有效方式，該技術的主要原理是通過離心操作，將細胞進行濃縮，最后變為沉淀物，再進行固定、脫水、包埋、切片和染色處理，診斷的準確率高。細胞蠟塊具有連續切片、保存時間長的點，可以通過反復觀察，從而提高漿膜腔積液的診斷準確率。

該研究選取2018年2月—2019年2月該院診斷的96例胸腔積液病患，對比單純細胞涂片HE染色與細胞蠟塊免疫組化檢測的診斷結果。通過研究發現，兩組診斷準確率比較，探究組98.00%顯著高于參照組86.96%，表明單純細胞涂片HE染色的準確率偏低，細胞蠟塊免疫組化檢測的診斷效果顯著。與李清苗[1]的研究結果基本一致，他的研究結果顯示，確診的39例惡性類型，經細胞塊免疫組化驗的診斷出38例，誤診1例，診斷符合率97.44%。細胞涂片在顯微鏡下，腺癌細胞呈現三維立體的團狀圖形，有乳頭狀的排列順序，染色質有增粗，核質比有增大，有核分裂的情況。細胞蠟塊免疫組化檢測是經過一系列的探索，才發現的一種有效的檢測方式，其通過兩次離心胸腔積液，從而收集較多的癌細胞，并制成細胞蠟塊，使得細胞的結構清晰可見，而且細胞的排列方式和結構都保存良好，更有利于提高診斷的準確性。細胞蠟塊免疫組化檢測呈現腺管樣，細胞異性顯著，核質比也大，染色質增粗，核膜清晰可見，增厚明顯，有核分裂情況。

通過研究發現，對比兩組檢測結果的陽性率，探究組陽性率100.00%顯著高于參照組78.26%，表明細胞蠟塊免疫組化檢測可以有效判斷細胞性質，提高診斷準確率，降低誤診率。另外，細胞蠟塊的制作過程簡單，而且細胞蠟塊還有方便保存和便于檢測的特點，可以積極推廣到基層醫院。

通過研究發現，96例胸腔積液病患中，48例診斷為查見腺癌細胞，48例為查見反應性增生間皮細胞。從抗體表達來看，發現腺癌細胞的特異性抗體有CK7、CEA和TTF-1。表明腺癌細胞與反應性增生間皮細胞的表達存在差異性，而反應性增生間皮細胞的特異性抗體有 WT-1、Calretinin和CK5/6且特異性很強，將兩種抗體進行聯合應用，可以有效鑒別疾病。免疫組化運用的原理是免疫學抗原-抗體特異性結合，利用化學反應，促使標記抗體的顯色劑進行顯色，從而確定機體內抗原的分布，再對其進行細胞定位和定性，從而提高診斷的準確率。CK7、CEA和TTF-1都是腺癌細胞的特異性抗體，其中CK7屬于相對分子質量細胞角蛋白，可以應用到上皮和尿路上皮細胞中進行標記;CEA屬于胚胎性癌抗原，作為診斷上皮性腫瘤的標記，一般位置在胎兒消化道上皮組織、肝臟和胰腺等地方;TTF-1是作為診斷轉移性腺癌細胞的標記，屬于核轉錄蛋白NKx2，對肺腺癌的靈敏度和特異度都較高。WT-1、Calretinin和CK5/6是反應性增生間皮細胞的特異性抗體，其中，WT-1屬于抑癌基因，是鑒別間皮瘤的有效手段;Calretinin屬于鈣結合蛋白，相對分子質量為2.9×104，神經系統是其主要存在位置，研究發現，在間皮細胞中，Calretinin的陽性率高達80%，是診斷反應性增生間皮細胞的有效標志物;CK5/6是以一種基底細胞角蛋白，在正常組織中，鱗狀上皮和導管上皮的基底細胞以及部分的鱗狀上皮生發層細胞、肌上皮細胞、間皮細胞陽性、腺上皮細胞陰性，適合用于反應性增生間皮瘤的診斷。

綜上所述，細胞蠟塊免疫組化檢測被廣泛應用于臨床的診斷中，對胸腔積液的診斷準確率高，檢測效果好，可以有效鑒別出腺癌細胞與反應性增生間皮細胞，值得臨床推廣。

[參考文獻]

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（收稿日期：2019-03-12）