血液性疾病疑難性交叉配血分析

紀(jì)桂香 夏和鳳 賁燕華

[摘要] 目的 探討血液性疾病疑難交叉配血不合原因，提出解決對(duì)策，為提高疑難配血處理能力提供依據(jù)參考。方法 方便選取2014年5月—2018年9月該院72例有輸血指征的血液性疾病患者為研究對(duì)象，全部入選病例交叉配血試驗(yàn)均提示配血不合，回顧性分析患者配血試驗(yàn)結(jié)果以及抗體篩選與鑒定結(jié)果，查找配血不合原因。 結(jié)果 鹽水法交叉配血不合45例（62.50%），以緡錢狀凝集構(gòu)成比最高（51.11%），自身溫抗體次之（17.78%）;凝聚胺法交叉配血不合6例（8.33%）;抗人球法交叉配血不合18例（25.0%），血清中均含IgG抗體，以抗-E構(gòu)成比最高（50.0%）;鹽水法與抗人球法交叉配血均不合2例（2.78%），均為自身免疫性溶血性貧血。 結(jié)論 由于血液性疾病自身特性，患者同型輸血也存在交叉配血不合的問(wèn)題，為降低或消除輸血不良反應(yīng)，臨床應(yīng)積極根據(jù)患者病因去除配血不利影響因素，以更好的保障輸血療效及安全。

[關(guān)鍵詞] 血液性疾病;交叉配血;鹽水法;凝聚胺法;抗人球法;抗體鑒定

[中圖分類號(hào)] R55? ? ? ? ? [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A? ? ? ? ? [文章編號(hào)] 1674-0742（2019）06（b）-0070-03

[Abstract] Objective To investigate the causes of mismatched blood matching in blood diseases， and to propose solutions to provide reference for improving the ability of difficult blood matching treatment. Methods From May 2014 to September 2018， 72 patients with blood diseases with blood transfusion indications in our hospital were conveniently selected as subjects. All the matched cases of blood matching tests indicated that the blood was not matched. The results of the blood test， antibody screening and identification results were retrospectively analyzed to find the cause of mismatching. Results There were 45 cases （62.50%） of the cross-matching blood in the saline method. The highest ratio of agglomeration was observed （51.11%）， followed by self-warming antibody （17.78%）. The condensed amine method was not suitable for 6 cases （8.33%）. The anti-human ball method did not match 18 cases （25.0%）， and the serum contained IgG antibody， which had the highest anti-E ratio （50.0%）; the salt method and the anti-human ball method did not match 2 cases（2.78%）， all of which are autoimmune hemolytic anemia. Conclusion Due to the characteristics of blood diseases， patients with homologous blood transfusion also have cross-matching problems. In order to reduce or eliminate adverse reactions of blood transfusion， clinically， the adverse factors of blood matching should be removed according to the cause of the patients， so as to better ensure the efficacy and safety of blood transfusion.

[Key words] Blood diseases; Cross-matching; Saline method; Condensed amine method; Anti-human ball method; Antibody identification

交叉配血試驗(yàn)指將受血者的血清和紅細(xì)胞懸液分別與供血者的紅細(xì)胞懸液和血清進(jìn)行交叉匹配，以發(fā)現(xiàn)兩者間是否存在血型不合的抗原-抗體反應(yīng)，防止引起溶血性輸血反應(yīng)[1]。在臨床實(shí)踐中，受血者與供血者血型相同但交叉配血不合的現(xiàn)象并不十分少見(jiàn)，給輸血相容性檢測(cè)結(jié)果的判定帶來(lái)了諸多困難，也給臨床及時(shí)輸血增添了困擾，因此，準(zhǔn)確查找交叉配血不合原因，并采取有效方法進(jìn)行特異性鑒定，對(duì)輸血患者臨床救治具有重要意義[2]。該研究現(xiàn)以2014年5月—2018年9月該院72例患者為例進(jìn)行分析探討，報(bào)道如下。

1? 資料與方法

1.1? 一般資料

方便擇取該院72例血液性疾病患者為研究對(duì)象。納入標(biāo)準(zhǔn)：臨床綜合檢查確診為造血系統(tǒng)疾病;輸血前檢驗(yàn);接受血型鑒定與交叉配血試驗(yàn)，結(jié)果提示配血不合;簽署知情同意書(shū);獲倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并其他系統(tǒng)疾病;臨床資料不全。入選病例中，男34例，女38例;年齡24～75歲，平均（53.1±10.4）歲;急性白血病15例，自身免疫性溶血性貧血11例，多發(fā)性骨髓瘤11例，慢性再生障礙性貧血9例，慢性粒細(xì)胞白血病7例，骨髓增生異常綜合征7例，巨球蛋白血癥3例，惡性淋巴瘤3例，血小板減少性紫癜2例，其他4例。

1.2? 方法

取受血者和供血者新鮮無(wú)溶血的EDTA抗凝靜脈血液樣本各2份，每份2～3 mL，送檢實(shí)驗(yàn)室。一份以生理鹽水稀釋成5%紅細(xì)胞懸液備用，一份上機(jī)離心提取上清液。以鹽水法、凝聚胺法和抗人球法進(jìn)行配血試驗(yàn)，對(duì)于配血不合者進(jìn)行抗體篩選及鑒定。

1.2.1? 儀器與試劑? 凝聚胺（珠海貝索生物）、ABO、RhD血型定型檢測(cè)卡、不規(guī)則抗體篩檢卡、ABO反定型紅細(xì)胞、篩選細(xì)胞（長(zhǎng)春博迅），譜細(xì)胞、抗-E、抗-e、抗-C、抗-S、抗-M、抗-H、抗-A1標(biāo)準(zhǔn)血清（上海血液生物）。BASO2005-1型離心機(jī)（臺(tái)灣貝索），TD-3A型血型血清學(xué)離心機(jī)和FYQ型免疫微柱孵育器（長(zhǎng)春博研）。

1.2.2? 檢測(cè)方法? 鹽水法：取2支小試管，1支加受血者血清和供血者紅細(xì)胞懸液，為主側(cè)配合，另一支反之，為次側(cè)配合。血樣充分混勻后，1 300 g/min離心15 s，觀察管底反應(yīng)物及有無(wú)凝集。

凝聚胺法：取2支小試管，分別做主側(cè)與次側(cè)配合。試管中分別加入0.65 mL低離子強(qiáng)度溶液和凝聚胺2滴，充分混勻后，3 400 r/min速離心10 s，倒掉上清液，觀察管底紅細(xì)胞聚集情況。最后再于試管中分別加入解聚液2滴，充分混勻后觀察凝集有無(wú)散開(kāi)，散開(kāi)提示非特異性凝集，配血相符，不散提示抗原抗體特異性反應(yīng)，配血不合。

抗人球法：鹽水法和凝聚胺法配血試驗(yàn)均提示陽(yáng)性者，以抗人球法進(jìn)行復(fù)檢。分別取血清2滴和紅細(xì)胞懸液1滴，混合后置37 ℃水浴30 min，后洗滌3次去上清液后分別加入抗人球蛋白試劑，1 300 g/min離心15 s，觀察有無(wú)凝集。

不規(guī)則抗體測(cè)定：取受血者血清與自身細(xì)胞以及抗體篩選細(xì)胞進(jìn)行不規(guī)則抗體篩選，提示含有不規(guī)則抗體者，取其血清與譜細(xì)胞進(jìn)行不規(guī)則抗體特異性鑒定，確定抗體性質(zhì)及特異性。

2? 結(jié)果

72例患者中，45例患者鹽水法交叉配血試驗(yàn)提示配血不合（62.50%），見(jiàn)表1。統(tǒng)計(jì)顯示，緡錢狀凝集構(gòu)成比最高，占5

1.11%;自身溫抗體8例，抗體篩查證實(shí)抗-E9例，無(wú)特異性3例;ABO血型誤定4例，其中3例為急性白血病患者，1例為慢性粒細(xì)胞性白血病患者;IgM血型抗體3例，抗體鑒定抗-M，重新為3例患者選擇M抗原陰性供血者，復(fù)行交叉配血試驗(yàn)提示配血相合。6例患者凝聚胺法交叉配血試驗(yàn)提示配血不合（8.33%），包括受血者存在自身抗體3例，受血者IgM血型抗體3例，受血者血小板聚集2例。18例患者抗人球法交叉配血試驗(yàn)提示配血不合（25.0%），譜細(xì)胞鑒定結(jié)果顯示，其血清中均含IgG抗體，其中以抗-E構(gòu)成比最高，見(jiàn)表2。對(duì)此，選擇不含該抗體相應(yīng)抗原的供血者血液樣本，與受血者復(fù)行交叉配血試驗(yàn)，均提示配血相合，予以患者輸血均未見(jiàn)溶血性輸血反應(yīng)。此外，2例患者鹽水法與抗人球法交叉配血試驗(yàn)均提示配血不合（2.78%），均為自身免疫性溶血性貧血患者，譜細(xì)胞鑒定結(jié)果顯示，血清中同時(shí)有IgG抗-C和自身溫抗體。

3? 討論

輸血指將全血或成分血等經(jīng)血管途徑輸入到人體，是臨床常用救治手段[3]，能夠有效補(bǔ)充血容、血紅蛋白、血小板、血漿蛋白及各種凝血因子，從而增加有效循環(huán)血量，促進(jìn)攜氧功能，預(yù)防和控制出血，減輕組織滲出與水腫[4]，對(duì)挽救患者生命具有重要意義。但是，輸血前必須進(jìn)行血型鑒定、交叉配血試驗(yàn)、抗體篩查等血液相容性檢測(cè)項(xiàng)目，是保證輸血安全的前提和必要手段[5]。

免疫性因素是導(dǎo)致配血不合的常見(jiàn)原因，主要由自身抗體或機(jī)體產(chǎn)生不完全抗體所致，以主側(cè)或伴次側(cè)凝集為主要表現(xiàn)[6]。另外，受血清蛋白紊亂、藥物破壞紅細(xì)胞表面電勢(shì)電位、球白蛋白倒置等非免疫性反應(yīng)因素影響[7]，交叉配血也可見(jiàn)主側(cè)紅細(xì)胞緡錢狀凝集。該研究中，抗人球法交叉配血不合占25%，其中以IgG-E構(gòu)成比最高，占50%，與文獻(xiàn)報(bào)道抗人球法配血不合IgG-E構(gòu)成比56.3%的研究結(jié)論相近[8]。

自身免疫性溶血性貧血（AIHA）是抗原抗體反應(yīng)加速紅細(xì)胞破壞所引起的血液性疾病，研究發(fā)現(xiàn)AIHA患者血清中常常含有自身抗體，導(dǎo)致主次側(cè)均可見(jiàn)交叉凝集[9]。此類患者在交叉配血時(shí)可行吸收放散試驗(yàn)，以37 ℃生理鹽水洗滌紅細(xì)胞先放散掉自身抗體，做交叉配血試驗(yàn)時(shí)，取用放散掉抗體的自身紅細(xì)胞與吸收后的血清，能夠有效避免上述問(wèn)題[10]。白血病患者血液中原始及幼稚細(xì)胞數(shù)量多，惡性淋巴瘤患者長(zhǎng)期化療，兩者均會(huì)削弱紅細(xì)胞膜血型抗原，導(dǎo)致正定型時(shí)紅細(xì)胞弱凝聚，配血時(shí)應(yīng)加強(qiáng)觀察，必要者鏡下觀察，避免誤判。同時(shí)，我們可以通過(guò)洗滌來(lái)維持紅細(xì)胞血型抗原，增強(qiáng)凝聚性，以提高試驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性。對(duì)于IgM血型抗體所致配血不合，可以巰基試劑對(duì)紅細(xì)胞進(jìn)行預(yù)處理，以解裂IgM抗體分子間的二硫鍵，消除其對(duì)交叉配血的影響。此外，輸血史、妊娠史等也會(huì)對(duì)輸血配血產(chǎn)生影響，為防止溶血性輸血反應(yīng)，應(yīng)予以此類患者多介質(zhì)交叉配血，同時(shí)結(jié)合病史分析，以排除假凝集。

綜上所述，由于血液性疾病自身特性，患者同型輸血也存在交叉配血不合的問(wèn)題，為降低或消除輸血不良反應(yīng)，臨床應(yīng)積極根據(jù)患者病因去除配血不利影響因素，以更好的保障輸血療效及安全。

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（收稿日期：2019-03-14）