微柱凝膠免疫反應技術在檢測IgG抗A(B)效價中的應用

孫長杰,王曉寧,劉 冰,趙 霞，李凌波

(吉林大學第一醫院，吉林 長春130021)

ABO新生兒溶血病(HDN)由IgG抗A(B)引起，且母親為O型的最常見，檢測母親血清中有無IgG性質的抗體并測定其效價，可預測ABO HDN發生的可能性。傳統檢測方法常用間接抗球蛋白試驗(即間接Coombs試驗)，是一種可靠的檢測IgG抗體的方法，但操作很繁瑣且費時。微柱凝膠免疫反應技術是綜合了分子篩技術、離心技術和免疫反應技術的一種新的檢汕方法，且簡便、時間短，結果明顯，可較長時間保存。為了更好地研究和應用這一新技術，我們作檢測結果準確性的研究。

1 材料和方法

1.1 材料

我院產科及生殖中心門診懷孕的“O”型孕婦血清標本60份，(其中測IgG抗A 29例，IgG抗B 23例，抗AB 8例)。

(1)DianaGel Coombs 卡：由北京斑珀斯技術有限責任公司提供。(2)Diana稀釋液2：含有穩定劑的低離子強度緩沖液，由北京斑珀斯技貿有限責任公司提供。(3)抗人球蛋白試劑(間接抗球蛋白法用)、2-Me(二巰基乙醇)由上海血液生物醫藥有限責任公司生產。(4)1%“A”型或“B”型紅細胞懸液，長春博德生物技術有限責任公司生產的4%標準細胞用9%Nacl注射液稀釋成1%的紅細胞。(5)儀器：專用的Diana血型檢測儀和Diana孵育器北京斑珀斯有限責任公司提供。

1.2 方法

(1)標本處理：破壞血清中IgG球蛋白，受檢血清100 ml加2-Me應用液100 ml混勻，將試管口塞緊置37℃水浴1 h后取出。另取6支試管，用pH7.4PBS作倍比稀釋，即每份標本血清分別稀釋成1∶8，1∶16…1∶2048。(2)微柱凝膠技術方法：取DianaGel Coombs卡一張，加50 μl 1%“A”型或“B”型紅細胞懸液于卡上各微孔管中，再加各個倍比稀釋濃度的血清50 μl，置Diana孵育器15分鐘，后置DianaFuge離心機離心。……