隱匿性乙型肝炎病毒感染情況分析

張小蘭　趙潤玲　吳依蕓　李紅梅

摘要目的：對隱匿性乙肝流行現狀進行調查，分析乙肝病毒（HBV）隱匿性感染的血清學及HBV-DNA特點。方法：采用時間分辨熒光法和熒光定量聚合酶鏈反應（PCR）法檢測血清乙肝血清標志物和HBV-DNA600例。結果：血清血清表面抗原（HBsAg）陰性而HBV-DNA陽性90例，隱匿性HBV檢出率為15%。其中HBsAg（-）的患者中，抗-HBe（+）抗-HBc（+）患者的隱匿性感染率顯著高于抗-HBe（-）抗-HBc（+）患者，差異有統計學意義（P<0.05）;Anti-HBe（+）隱匿性感染者的HBV-DNA水平顯著高于Anti-HBe（-）隱匿性感染者，差異有統計學意義（P<0.05）。結論：日常門診血清的隱匿性HBV檢出率較高，尤其是抗-HBe（+）抗-HBc（+）患者的隱匿性HBV感染率顯著高于其他人群，在診斷時需要注意。

關鍵詞 隱匿性感染;HBV;高敏HBV-DNA;時間分辨

隱匿性乙肝病毒（HBV）感染，又稱為免疫靜默感染，已發現應用聚合酶鏈反應（PCR）技術檢測部分血清表面抗原（HBsAg）陰性的個體血清和（或）肝組織中HBV-DNA呈陽性"。這種感染狀態可見于HBV血清學標志均陰性的個體，也可發生于抗-HBs和（或）抗-HBc陽性的患者。我國是HBV高流行地區，可能存在很多未被證實的隱匿性HBV感染者，引起不明原因肝病。對五家渠第六師醫院的600份樣本進行HBV血清學和核酸檢測，統計分析隱匿性感染情況及其血清學和HBV-DNA特點。

資料與方法

2016年6月-2017年12月收集日常檢查乙肝五項的門診患者血清學標本600例。

HBV血清學檢測：采用時間分辨熒光分析法檢測乙肝五項標志物。使用Abbott微粒子化學發光確認。

HBV-DNA定量檢測：采用熒光定量PCR技術進行定量檢測。

統計學方法：采用SPSS17.0統計學軟件進行數據分析，計數資料用[n（%）]表，示，采用x“檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

結果

600例樣本中共檢測到90例隱匿性感染患者，Anti-HBe陽性、Anti-HBe陽性66例，Anti-HBe陰性、Anti-HBc陽性24例，見表1。

隱匿性感染患者情況分析：HBsAg陰性且Anti-HBc陽性患者中，Anti-HBe陽性患者的隱匿性檢出率顯著高于Anti-HBe陰性患者，差異有統計學意義（P<0.05）。Anti-HBe陽性隱匿性感染者的HBV-DNA水平顯著高于Anti-HBe陰性隱匿性感染者（357.52IU/mLvs64.52IU/mL），差異有統計學意義（P<0.05），見表2。

討論

血清乙肝五項標志是反映HBV復制能力和感染狀態的主要手段。一般情況下，HBsAg（-），抗-HBc（+）或抗HBe（+），表示機體已清除HBV或乙肝恢復期。但是近年來隨著基因診斷技術的發展，尤其是PCR技術已廣泛應用于HBV診斷和治療，HBsAg（-）但HBV-DNA（+）的隱匿性感染狀態已越來越多地出現在臨床診療過程中，由于感染狀態因為其特殊的攜帶方式和臨床表現，會帶來嚴重的危害。本次研究在600例日常乙肝檢測樣本中發現90例為隱匿性HBV感染，隱匿性HBV檢出率為15%，與不明原因肝炎密切相關，與文獻報道一致。其中抗-HBe（+）抗-HBc（+）患者的隱匿性HBV感染率顯著高于其他人群，在診斷時需要注意。隱匿性感染的原因暫無定論，主要由以下幾種假設：①不同亞型HBV再感染：共同的抗原決定簇a和相互排.斥的抗原決定簇w/r.d/y決定了HBV的4個主要血清亞型（adw、adr、ayw.ayr）。而HBV核苷酸序列上的個別堿基決定了亞型的不同，從而決定了HBV的高度變異性。②宿主及相關因素：HBV隱匿性感染的另一個因素為感染時間長或免疫應答異常。普遍認為終止HBV病毒的主要機制為細胞免疫介導的免疫應答，隱匿性HBV感染會在機體免疫功能低下或處于免疫耐受狀態時出現，因此低水平病毒起不到清除作用。③HBV基因突變可能為隱匿性HBV感染者血清HbsAg陰性的一個原因：HBV變異體感染，產生HBVS蛋白（呈抗原性變化），即使用最靈敏的檢測試劑仍無法檢出，或攜帶能抑制S基因表達和（或）病毒復制的突變，Hu等也報道OBI患者體內的乙肝病毒S區的MHR的變異導致HbsAg的抗原性的改變和減低病毒顆粒的分泌量，但對HBV-DNA和HBV-RNA的水平無影響”。④檢測試劑的特異性和靈敏度：臨床診斷試劑盒一般僅對某一種基因型或血清型有特異性。如由ay亞型抗體和抗原制備的Abbott試劑盒，對ad亞型靈敏度的檢測相對較低。⑤其他因素對HBsAg合成的影響或受其他病毒感染的干擾：體外實驗已證實丙型肝炎病毒（HCV）的重疊感染可抑制HBV復制，丁型肝炎病毒（HDV）和血吸蟲感染同樣可抑制肝實質內HBV活性，導致HBV復制受限而呈低水平的HBsAg。⑥多數研究發現，隱匿性HBV感染可能與低于檢測限的低水平HBV感染：隱匿性HBv感染者血清HBV-DNA水平很低，常規PCR技術無法檢出，其水平一般為l0～100copies/mL，需采用靈敏度及特異度高的PCR技術并進行分子檢測確認4。HBV血清學標志檢測試劑的靈敏度低可能是我國隱匿性HBV感染的原因之一。

現代醫學對乙肝病毒感染的治療主要采用保肝、抗感染、抗纖維化、抗病毒、免疫調節。抗病毒治療作為一種重要手段在臨床上被廣泛應用，但抗病毒治療的指征僅為HBsAg陽性的患者。目前對于HBsAg陰性患者是否應接受抗病毒治療，如何規范用藥尚無相關研究。患者對病毒感染的清除能力因機體特異性免疫應答缺陷而降低，可導致持續的HBV感染。因此，對HBsAg陰性HBV感染的治療，強化細胞免疫應答可能為一種方法。

參考文獻

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