紫花苜蓿用于水產飼料的特性探究

朱勤　陳憶鳳　顏婕　孫偉　祝海梅

摘 要 通過對紫花苜蓿基礎成分進行測定，發現其可作為飼料蛋白源原料，采用酸性、堿性和中性蛋白酶、魚體內源酶酶測定紫花苜蓿消化率，發現其能夠被很好地消化，可初步確定紫花苜蓿可作為水產飼料的原料。結果表明，飼料中添加適量的苜蓿草粉對提高動物的免疫機能、繁殖性能都有促進作用。

關鍵詞 紫花苜蓿;營養成分;消化率;胰蛋白酶

中圖分類號：S823.5 文獻標志碼：B DOI：10.19415/j.cnki.1673-890x.2019.12.003

紫花苜蓿又名紫苜蓿，是豆科植物家族中的一員，是世界上分布最廣、栽培歷史最古老的豆科牧草。隨著我國牧草產業化及對草產品需求的快速增加，紫花苜蓿的栽培面積呈迅速擴大之勢[1-2]，且其氨基酸種類齊全且較平衡，是最具經濟價值的牧草品種之一。并且其適口性好，營養豐富，有良好的飼喂效果，因此在養殖中占有重要的地位，可作為優良的飼草推動漁牧業的發展[3]。本研究在測定紫花苜蓿的主要成分含量的基礎上，測定紫花苜蓿在水產動物中的消化情況，以探索其作為水產飼料原料的應用情況。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

紫花苜蓿草來自內蒙古阿魯科爾沁旗惠農草業有限公司;硫酸、混合指示劑、氫氧化鈉等均為分析純購自國藥集團化學試劑有限公司;胰蛋白酶、堿性蛋白酶購自南寧龐博有限公司;胃蛋白酶購自Sigma有限公司。

1.2 主要儀器設備

HH-2數顯恒溫水浴振蕩器，產自國華公司;自動定氮儀，產自上海纖檢儀器有限公司;電子分析天平、pH計，產自梅特勒—托利多儀器上海有限公司。

1.3 試驗方法

1.3.1 基礎成分測定

粗灰分測定參照GB/T6438-2007中的方法，水分測定參照GB/T6435-2014中的方法，粗脂肪測定參照GB/T6433-2006中的方法，粗纖維測定參照GB/T6434-2006中的方法，粗纖維測定參照GB/T6432-2018中的方法。

1.3.2 草魚內臟酶酶液的制取

解剖鮮活的草魚，取其腸道部分，加入1∶30磷酸鹽緩沖溶液，然后勻漿器勻漿后，過濾，去除結締組織，濾液放入冰箱冷凍保藏。

1.3.3 魷魚內臟酶的制取

將新鮮的魷魚內臟，加入1∶20的Tris-鹽酸緩沖溶液，然后勻漿器勻漿后，過濾，去除結締組織，濾液放入冰箱冷凍保藏。

1.3.4 蛋白質消化率的測定

取試樣2 g，分別加入一定量的胰蛋白酶、堿性蛋白酶、胃蛋白酶酶液和制備的魷魚內臟酶和草魚內臟酶酶液，在40 ℃恒溫振蕩酶解6 h，將酶解液過濾，并用丙酮洗滌2次;將殘渣無損地移入凱氏燒瓶中，105 ℃烘箱內烘干，測定粗蛋白含量，同時稱取烘干后的樣品（精確至0.000 2 g）測定未酶解樣品蛋白含量。

2 結果與分析

2.1 紫花苜蓿基礎成分的測定

每個指標的測定均做兩組試驗，每組三個平行，得到紫花苜蓿的基礎成分如表1所示。由結果可知，紫花苜蓿的粗蛋白含量為20.37%，粗纖維含量為33.62%。蛋白質是魚類生長的主要營養物質，魚粉一直以來是重要的蛋白源提供者，但因為其短缺、價格高漲的問題，急需尋找可替代它的原料[4]。紫花苜蓿粗蛋白含量高，轉化效價高，是良好的蛋白源提供者。

2.2 不同的酶在紫花苜蓿中消化率的測定

為了研究紫花苜蓿蛋白是否適合水產動物腸道的吸收利用，以胰蛋白酶、堿性蛋白酶、胃蛋白酶、草魚及魷魚內臟酶進行蛋白消化的離體試驗，得到以不同的酶酶解后蛋白消化率，結果如圖1所示。

由圖1可知，草魚內臟酶酶解紫花苜蓿的消化率為37.42%，魷魚內臟酶酶解紫花苜蓿的消化率為40.37%，與胰蛋白酶的結果接近，均優于堿性蛋白酶和酸性蛋白酶。但由于是離體試驗且酶活力不穩定，實際消化率應偏高于本試驗結果。何云等[5]發現，在黃河鯉魚飼糧中添加10%苜蓿草粉能顯著提高其消化酶活性及腸絨毛高度。此外研究發現，在魚飼料中添加適當的苜蓿草粉有利于提高魚的生長性能，改善外觀體型[6]。因此，紫花苜蓿所含蛋白能被食草類和雜食魚類腸道消化利用，可作為水產飼料原料。

2.3 不同飼料原料的蛋白消化率

在飼料原料行業中，豆粕是飼料生產中最優質的蛋白原料，菜粕是水產飼料使用量最大的原料，玉米蛋白飼料也是使用普遍的蛋白原料之一。本試驗進行了對比測定，以胰蛋白酶作為消化酶以最適宜的條件分別測定不同原料的消化率，結果如圖2所示。

由結果可知，在相同加酶量條件下，豆粕的蛋白質消化率最高，達87.1%;其次是紫花苜蓿74.84%;最后是玉米蛋白飼料53.07%。由此可看出，紫花苜蓿具有良好的可消化性，可作為水產飼料原料。

3 結語

研究表明，飼料中添加適量的苜蓿草粉對提高動物的免疫機能、繁殖性能都有促進作用。目前，苜蓿草粉及其提取物在豬、牛、羊和兔等畜禽動物養殖方面已被廣泛應用，且應用效果很好，但在水產動物方面，只有在草魚、團頭魴鯉魚等魚類中有所研究[7-8]。本試驗為進一步研究紫花苜蓿在水產飼料中的應用提供一定的理論數據。

參考文獻：

[1] 張春梅，王成章，胡喜峰，等.紫花苜蓿的營養價值及應用研究進展[J].中國飼料，2005（1）：15-17.

[2] 王雪，李志萍，孫建軍，等.中國苜蓿品種的選育與研究[J].草業科學，2014，31（3）：512-518.

[3] 王鳳芝.紫花苜蓿的栽培技術及在養殖業中的應用[J].現代畜牧科技，2019（5）：26-27.

[4] 艾春香，陶青燕.魚粉替代：魚粉高價運行下水產配合飼料研發的技術對策[J].飼料工業，2013，34（10）：1-7.

[5] 何云，王成章，嚴學兵，等.苜蓿草粉對黃河鯉魚消化生理指標的影響[J].草地學報，2010，18（1）：121-125，136.

[6] 李科云，龔福春，李大雄.魚用優質高產飼草的引種與品比篩選試驗報告[J].草業科學，1999（4）：54-60.

[7] 馮德慶，唐龍飛，黃秀聲，等.優質牧草對提高草魚品質的研究[J].水利漁業，2006（2）：81-82.

[8] 胡喜峰，王成章，張春梅，等.不同水平苜蓿草粉對團頭魴生長性能及肉品質的影響[J].西北農林科技大學學報（自然科學版），2005（11）：49-56.

（責任編輯：劉昀）