P16蛋白在胃癌組織中的異常表達及其意義

李旭峰 白勇 周娟 倪鵬飛

（1 貴陽護理職業學院衛生管理系 貴州 貴陽 550081）

（2 新疆醫科大學第二附屬醫院腫瘤科 新疆 烏魯木齊 830002）

（3 貴陽護理職業學院文基部 貴州 貴陽 550081）

P16是一種抑癌基因，有研究表明癌癥的形成與發展和P16的表達異常存在一定關聯[1]，

這是因為P16為能夠抑制細胞周期分化依賴激酶（CDK），和CDK產生結合反應，使其失活，從而阻止細胞進一步增殖。因此當P16表達異常時，可導致細胞增殖失控，誘發惡性腫瘤。基于P16在抑制癌癥過程中對細胞增殖發生的作用，推斷P16的異常表達和胃癌存在一定關系。為進一步驗證此種推斷，明確P16蛋白在胃癌組織中異常表達的特征，以此為胃癌的臨床癥狀及預后判斷提供參考，本次選取新疆醫科大學第二附屬醫院近年收治的70例胃癌患者為觀察組，另選取同期于新疆醫科大學第二附屬醫院健康體檢的70例正常人群為對照組，觀察不同類型人群P16的檢測結果并比較，現報道如下。

1.資料和方法

1.1 一般資料

選取2017年12月-2018年12月新疆醫科大學第二附屬醫院收治的70例胃癌患者為觀察組，另選取同期于新疆醫科大學第二附屬醫院健康體檢的70例正常人群歸為對照組。其中觀察組男性52例，女性18例。年齡42-77歲，平均（54.26±2.74）歲。對照組男性49例，女性21例。年齡41-76歲，平均（53.87±3.19）歲。兩組在年齡、性別等一般資料方面沒有統計學差異，P＞0.05，具可比性。

1.2 方法

取檢驗標本后，在半小時內通過10%的福爾馬林固定[2]，經24h后，通過乙醇脫水，以及二甲苯透明處理2次，之后浸泡包埋，并制作成厚度為4μm的切片。之后分別通過免疫組織化學SP法兩組組織標本切片進行P16檢測，檢測試劑由武漢博士德公司制造，嚴格根據檢測試劑說明進行操作。

1.3 判定標準

P16陽性染色細胞表達呈胞核型，并為清晰的棕黃色。陽性分級：（-）切片中沒有陽性細胞。（+）切片中的陽性細胞在25%以下。（++）切片中的陽性細胞在25%-50%之間。（+++）切片中的陽性細胞超過50%。以（+）、（++）、（+++）為陽性。陰性即為P16異常表達。

1.4 統計學分析

本次實驗數據采用SPSS20.0軟件進行統計學分析，其中計量資料用t檢驗，計數資料用χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2.結果

2.1 組間對比

對照組P16陽性例數為70例，陽性率為100%，觀察組P16的陽性例數為30例，陽性率為42.86%，對照組陽性率顯著高于觀察組，P＜0.05。

2.2 組內對比

胃癌組織分化程度低的患者P16陽性率顯著低于分化程度高的患者，發生淋巴結轉移的患者P16陽性率顯著低于未發生淋巴結轉移的患者，TNM分期為Ⅲ-Ⅳ級的患者P16陽性率顯著低于TNM分期為I-Ⅱ級的患者，P＜0.05。但在性別和浸潤程度方面，P16的陽性率沒有差異，P＞0.05，見表。

表 不同類型胃癌組織的P16表達情況

3.討論

P16蛋白是近年來所發現可抑制癌癥的基因[3]，由2個內含子以及3個外顯子所構成，在人類9號位染色體上的p21位置，長度約為8.5kb。之所以認為P16為抑癌基因，是因為P16能夠調節細胞的分化周期，組織細胞的異常分化與增生，達到抑制腫瘤的目的[4]，這一功能的實現是因為P16為一種能夠抑制細胞周期分化依賴激酶（CDK）的蛋白，P16能夠和CDK產生結合反應，使其失活，從而阻止細胞進一步增殖。

如果P16蛋白出現異常，不能有效起到CDK的一直作用，就無法阻止細胞的分化增殖，導致細胞出現非正常性的增殖，將衍變為惡性腫瘤[5]。胃癌的發病機理尚不明確，開展胃癌和細胞增殖周期相關的基因研究，有助于明確胃癌的發病機制，并為胃癌的資料提供新思路。目前已發現食管癌、肺癌、食管癌、卵巢癌等多種原發惡性腫瘤疾病患者中存在高頻率的異常表達[6]。但鮮有對于P16異常表達和胃癌關系的相關研究[7]。但經P16參與抑制細胞非正常增殖的原理，推斷胃癌的發生也和P16表達異常存在一定關聯[8]。為進一步驗證這種推斷，明確P16蛋白在胃癌組織中異常表達的特征，以此為胃癌的臨床癥狀及預后判斷提供參考，本次研究就選取新疆醫科大學第二附屬醫院近年來收治的70例胃癌患者作為研究對象，通過免疫化學SP法對患者的胃癌組織進行檢測。檢測結果顯示，胃癌患者的P16陽性率要顯著低于正常人群，P＜0.05。此外胃癌組織分化程度低的患者P16陽性率顯著低于分化程度高的患者，發生淋巴結轉移的患者P16陽性率顯著低于未發生淋巴結轉移的患者，TNM分期為Ⅲ-Ⅳ級的患者P16陽性率顯著低于TNM分期為I-Ⅱ級的患者，P＜0.05。可見癌癥的惡化程度越高，P16的陽性率也就越低，即P16異常表達。在性別和浸潤程度方面，P16的陽性率沒有差異，P＞0.05。可見沒有胃癌的人群其胃黏膜組織中的P16均為正常表達。而進展到不同階段的胃癌組織，其P16表達存在差異，胃癌惡化程度越高，異常表達的頻率也隨之升高，表明P16蛋白基因的異常表達可能和胃癌癌變以及進展存在關聯，促進了胃癌病情的發展。

綜上，P16異常表達和胃癌存在相關性，胃癌患者的P16異常表達發生率高，而健康人群的P16沒有異常表達。且TNM分期越高、發生淋巴結轉移、癌癥組織分化程度越低的胃癌患者期P16基因更容易為異常表達，故可通過P16對胃癌進行輔助檢測并判斷預后，具有臨床參考意義。