——腐敗希瓦氏菌" />
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(蘇州市相城區(qū)水產(chǎn)技術(shù)推廣站,江蘇 蘇州 215131)
中華絨螯蟹是蘇州地區(qū)的主要水產(chǎn)養(yǎng)殖品種之一。在養(yǎng)殖過(guò)程中,部分養(yǎng)殖戶塘口的中華絨螯蟹出現(xiàn)了活力下降甚至死亡的情況,造成了較大的損失。從患病蟹體內(nèi)分離到腐敗希瓦氏菌(Shewanella putrefaciens)并人工回感成功,該文有關(guān)腐敗希瓦氏菌及其藥物敏感性的結(jié)果有助于對(duì)中華絨螯蟹的細(xì)菌性疾病進(jìn)行預(yù)防和治療。
患病蟹來(lái)自相城區(qū)陽(yáng)澄湖鎮(zhèn)的發(fā)病蟹塘,規(guī)格60~80 g,病蟹十肢無(wú)力,行動(dòng)遲緩,血液凝固慢或不凝。人工回感試驗(yàn)所用健康蟹購(gòu)自陽(yáng)澄湖鎮(zhèn)養(yǎng)殖池塘,平均體質(zhì)量62 g/只。
胰蛋白胨大豆瓊脂(TSA)、麥康凱瓊脂(MCKA)、RS瓊脂(RSA)(北京陸橋技術(shù)有限責(zé)任公司);藥敏板(南京菲恩醫(yī)療科技有限公司);E/NF生化鑒定板條、BBL Crystl微生物鑒定系統(tǒng)、比濁儀(Becton,Dickinson and Company,USA)。
將病蟹在自來(lái)水中洗刷外殼,并用干凈紗布吸干表面水分,然后以無(wú)菌操作打開外殼,取肝臟在TSA平板上劃線分離,28℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h,從平板上形態(tài)一致的優(yōu)勢(shì)菌落中選取單個(gè)菌落,再次TSA平板劃線,直至獲得細(xì)菌純培養(yǎng)物。再取單個(gè)菌落分別劃線于MCKA平板和RSA平板,28℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h,觀察菌落生長(zhǎng)情況。
1.4.1 生化鑒定 將分離菌純培養(yǎng)物劃線MCKA平板,28℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)20~24 h,挑取菌苔至0.85%NaCl生理鹽水中,用比濁儀配制成0.5麥?zhǔn)蠞舛染?,菌液接入E/NF生化鑒定板條,28℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)20h,板條通過(guò)BBL Crystl微生物鑒定系統(tǒng)進(jìn)行鑒定分析?!?br>