膝關節骨性關節炎與髖關節退變的相關性研究

戴錫金

（沈陽市骨科醫院，遼寧 沈陽 110044）

本文對膝關節骨性關節炎與髖關節退變的相關性進行探究，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料：取60例幼鼠隨機等分為三組，即正常對照組、直立組、直立聯合Hulth組各20例。

1.2 試劑：乙二胺四乙酸二鈉、氯霉素眼膏、磷酸二氫鈉I、MMP-13的I抗與II抗、水、二甲苯、乙醇等。

1.3 儀器：電子稱、量筒、切片機、自動脫水機、免疫熒光試劑盒、冷凍機、顯微鏡、常規手術器械等。

1.4 模型建設：把對立組、直立聯合Hulth組中所有小鼠的雙前肢毛發剔除并進行消毒常規處理，按照一定配比配置麻醉藥物進行腹腔注射麻醉，在麻醉藥物見效后，對小鼠實施手術操作，主要步驟有雙前肢消毒、剝離周邊軟組織、結扎上肢肱動脈、橈動脈等重要靜脈，利用手術器具夾斷肱骨、有效止血后進行常規縫合。

1.5 形態學染色

1.5.1 HE染色：采用的藥劑有無水乙醇、95%乙醇、85%乙醇、鹽酸乙醇、氨水返藍以及伊紅染液等。

1.5.2 甲苯胺藍染色：無水乙醇、95%乙醇、85%乙醇、甲苯胺藍染液等，最后應用中性樹膠密封，光學顯微鏡下觀察并采片，對三組大鼠關節軟骨結合Mankin評分標準進行打分。

1.6 免疫熒光檢測：在光學顯微鏡下觀察陽性細胞數目，每一個標本取脛骨內髁、脛骨外髁、關節中心3個主要區段，分別計算上述區段內所有細胞數目以及陽性細胞數目。

1.7 統計學處理：采用SPSS16.0軟件包對本次研究數據進行處理，納入到Excel表格中，計量資料采用（x-±s）表示，計數資料采用百分率（%）表示，比較行χ2檢驗。

2 結 果

2.1 動物情況：在建設直立大鼠KOA模型時，無死亡現象，但是在建設直立聯合Hulth模型時，由2只大鼠死亡，病死率為3.3%。由此可見，去雙前肢直立聯合Hulth模型具有成活率高、病死率低、操作流程相對簡單以及時間短暫等特征[1]。

2.2 膝、髖關節影像學檢查：對三組大鼠膝、髖關節影像學檢查結果進行整體分析，發現正常對照組中大鼠的膝關節結構與功能無異常，未出現典型性退變癥狀，但是其他兩組大鼠的膝、髖關節可發現有不同程度關節縫隙狹窄、苗杜增高影，這代表直立組與直立聯合假Hulth組大鼠的膝、髖關節存在不同程度的退行性改變。

2.3 關節軟骨形態學觀察

2.3.1 HE染色：直立組與左側直立聯合假Hulth組大鼠髖關節關節面結構平滑，軟骨層次結構清楚可見，軟骨細胞有次序分布在股骨頭上，結合上述表征可以將其視為關節應力匯集的表現；右側直立聯合假Hulth組中關節面較粗糙但結構完整，關節縫隙狹窄，軟骨細胞排列無規律，表層的軟骨細胞數目減少，可見潮線，考慮髖關節退行性改變。

2.3.2 甲苯胺藍染：右側直立聯合Hulth組中髖關節面較粗糙但結構完整，染色不均勻，表層的軟骨細胞數目降低，且多以線型軟骨細胞呈現，認為是髖關節退行性改變[2]。

2.3.3 免疫熒光檢測：在不同波段熒光激發下，不同小組Aggrecan免疫熒光表達效果有所差異，除正常對照組之外，其他兩組大鼠髖關節Aggrecan所表達的陽性細胞勻稱的分布在表層、移形層與放射層的軟骨細胞內，陽性細胞表達數目相對較多；右側直立Hulth組中髖關節Aggrecan所表達的陽性細胞表達很少，熒光強度相對較低，髖關節軟骨細胞中Aggrecan所表達的陽性細胞百分比如下表，可見右側直立聯合Hulth組中髖關節軟骨的退變。見表1。

表1 Aggrecan所表達的陽性細胞百分比（±s）

表1 Aggrecan所表達的陽性細胞百分比（±s）

組別 例數(n) Aggrecan陽性百分比直立組 12 67.76±2.81左側直立Hulth組 12 66.31±3.11右側直立Hulth組 12 60.51±3.30

2.2.3 Collagen X免疫熒光測定：在直立組、左側直立聯合Hulth組中髖關節軟骨Collagen X所表達的陽性細胞百分比分別為（34.70±2.02）、（35.95±2.13）、（40.37±2.37）。由于右側直立聯合Hulth組中髖關節軟骨的Collagen X陽性，故此，可推測髖關節軟骨的退變與其他兩組相比更嚴重。

3 討 論

膝關節骨性關節炎（KOA）又叫退行性骨關節病，為一種常見的風濕性疾病[4]。有報道顯示，KOA的發生發展有明顯的解剖與生物學基礎，KOA可誘發附近髖關節力學改變，但是否影響髖關節退變依然沒有確切結論[5]。

本次研究結果顯示：通過對HE、甲苯胺藍、藏紅固綠、Collagenll、MMP-13進行染色，進而其他組相比較，Hulth組大鼠膝關節軟骨Mankin評分與MMP-13陽性細胞比例最高、CollagenⅡ陽性細胞比率最低；和其他組相比，Malthus組大鼠同側髖關節軟骨Mankin評分與MMP-13陽性細胞比例最高、CollagenⅡ陽性細胞比率最低，軟骨退行病變最嚴重。膝關節疼痛、僵硬、關節活動范圍減縮以及X線檢查結果和髖關節對應癥狀無相關性或相關性微小。由此可見，去雙前肢直立聯合Malthus組大鼠膝關節退變更為顯著，大鼠的KOA可促使其髖關節退變更為嚴重化，對統計學結果進行分析，得出人體KOA和髖關節的退變之間無相關性的結論。