王國倉,李根新,陳長江,薛萬朝,余 梅,徐生瑞
(1.青海省西寧市湟源縣畜牧獸醫站,西寧812100;2.陜西省西安市鄠邑區祖庵鎮人民政府,710308)
衣原體病是由各類衣原體寄生在人和動物體細胞內所引起的一種人畜共患傳染病。牛、羊感染衣原體病后妊娠母畜表現為流產、產死胎或活力弱的的仔畜、胎衣不下;部分母畜感染后出現子宮內膜炎、乳房炎、產奶量下降等;公畜主要表現為精囊、副性腺、睪丸及附睪的慢性炎癥,嚴重影響著畜牧業的健康發展。近年來,從各地的衣原體檢測情況顯示,我國衣原體陽性率有所上升,而我省也不乏關于衣原體病的報道。為掌握湟源縣牛羊衣原體病的感染情況,為本地區牛羊衣原體病的防控提供指導依據,2015-2018年連續4年對我縣牛、羊開展了衣原體病血清學調查。
1.1 血清樣品的來源 每年從全縣9個鄉鎮采集血清樣品,每個鄉鎮采集牛血清20份、羊血清40份以上,開展牛羊衣原體病血清學調查。
1.2 診斷試劑 衣原體IHA 抗原、陽、陰性標準血清、稀釋液,蘭州獸醫研究所。
1.3 器械 單、多道微量加液器(10ul-100ul)、96孔“110°V”型有機玻璃微量反應板、恒溫培養箱、微性震蕩器等。
2.1 鋪板:每孔加稀釋液75ul。
2.2 稀釋血清:首孔加25ul 待檢血清,依次呈4倍遞增稀釋,至第3孔(1:4~1:64)。第3孔稀釋完成后棄25ul。檢測時每板設陽、陰性對照及空白對照各2孔。
2.3 加抗原:每孔加入25ul的稀釋抗原,用微型振蕩器振蕩2分鐘,蓋板,37℃作用2小時。
2.4 結果判定:陰、陽及空白對照各孔均成立,則被檢血清1:16孔出現“++”以上者為陽性;……