普通胰島素注射液與維生素C注射液配伍的穩定性考察

章 瑾 王青青 蔡鑫君 周 峰

胰島素是機體內唯一能降低血糖的激素，也是唯一能促進糖、蛋白質、脂肪合成和貯存的激素[1]，它能很好地控制餐后血糖；與葡萄糖注射液混合，可有效抵消葡萄糖載體溶液帶來的血糖波動。維生素C作為一種抗氧化劑參與體內多種代謝過程，幫助膽固醇的轉化，可減少毛細血管的脆性，增加機體免疫力，同時也是許多酶的輔因子，在膠原、神經遞質和許多神經肽的合成中發揮重要作用，因此，在傷口愈合、能量代謝和神經系統中具有重要功能[2-3]。也有學者提出，維生素C可促進免疫細胞產生細胞因子IL-6和IL-8減少炎癥，并且具有直接的抗病毒效應及抗癌作用[4-5]。維生素C注射液作為輔助用藥應用廣泛，對于一些不能用生理鹽水作為輸液溶媒的糖尿病患者，比如合并嚴重高血壓或其他心血管疾病時，只能將維生素C混合到葡萄糖溶液中輸注。維生素C是一種多羥基化合物，結構類似于葡萄糖，其分子中第2、3位上兩個相鄰的烯醇式羥基，極易解離釋放出H+，故具有酸性。維生素C具有強還原性，易被可逆氧化成脫氫維生素C。脫氫維生素C若繼續氧化，則生成不可逆轉的二酮古樂糖酸，完全失去生理活性。而胰島素是由A、B兩個肽鏈共51個氨基酸組成的2雙鏈，兩條肽鏈之間由兩個二硫鍵連接，具有蛋白質兩性，溶液不穩定，易發生脫氨、分解和交鏈反應。胰島素在維生素C存在的情況下可能會降解失效，本次研究將對不同胰島素濃度下的混合溶液進行理化性質的分析比對，為臨床合理有效用藥提供參考依據。

1 實驗材料

1.1 藥品與試劑 磷酸二氫鈉（分析純）；乙腈（分析純）；胰島素標準品（27IU/mg，中國藥品生物制品檢定所）；普通胰島素注射液（江蘇萬邦生化醫藥集團有限責任公司，批號21712204）；維生素C注射液（上海信誼金朱藥業有限公司，批號1730205）；5%葡萄糖注射液500mL（杭州民生藥業有限公司，批號 A1712202）。

1.2 儀 器 Agilent1260高效液相色譜儀（Agilent Technologies，USA）；FE28-Standard 臺式 pH 計 [梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司]；BT25S型電子天平[賽多利斯科學儀器（北京）有限公司]；SHZ-D（Ⅲ）循環水式多用真空泵（河南省予華儀器有限公司）。

2 方法

2.1 供試液配置 在靜脈用藥調配中心（PIVAS）萬級潔凈度環境、百級潔凈度生物安全柜中，由藥學人員按照無菌操作技術規程進行配置。

2.1.1 對照組供試液 分別精密量取普通胰島素注射液2、4、6、8IU加入到500mL5%葡萄糖注射液中，得供試液A～D。

2.1.2 實驗組供試液 分別精密量取普通胰島素注射液2、4、6、8IU加入到500mL5%葡萄糖注射液中，再分別加入2g維生素C注射液，得供試液E～H。供試液組成見表1。

2.2 外觀、pH值檢查 在室溫（25℃）下，觀察并記錄配置后4h 內各供試液的外觀是否有變化，并于 0、0.5、1、2、4、6h 時使用pH計分別測定其pH值（各供試液重復測定3次）

2.3 胰島素含量測定

2.3.1 色譜條件 色譜柱：Aglient Extend C18（250mm×4.6mm，5μm）；流動相：0.1mol/L 磷酸二氫鈉：乙腈（75:25）；柱溫：40℃；流速：1.0mL/min；檢測波長：214nm；進樣量：20μL。

表1 供試液組成

2.3.2 標準品溶液配制 精密稱取胰島素標準品1mg（27IU）用流動相定容至50mL，置冰箱保存。

2.3.3 標準曲線制備 分別精密量取標準品溶液0.5、1.0、2.0、3.0、6.0和8.0mL，用流動相定容至 100mL，分別進樣20μL，以胰島素峰面積（A）對胰島素濃度（C）作線性回歸，得方程：A=3681.9C+3.0836，r=0.9997，說明胰島素在濃度0.0027IU/mL～0.0432IU/mL范圍內具有良好的線性關系。

2.3.4 精密度和重現性 在“2.3.1”項色譜條件下，精密量取標準品溶液1mL（0.54IU），用流動相定容至50mL，重復進樣6次，記錄峰面積，測得相對標準差（RSD）值為1.56%，說明該方法精密度良好。

精密量取普通胰島素注射液1mL（4IU），用流動相定容至100mL，連續進樣6次，記錄峰面積，測得RSD值為1.58%，說明該方法重現性良好。

3 結果

3.1 外觀檢查結果 在室溫（25℃）下，6h內各供試液外觀均澄清透明，且無顏色變化，無沉淀或氣體產生，無結晶析出。

3.2 pH值檢查結果 配置6h內，各供試液pH值檢查結果見表 2。A、B、E供試液在 4h內pH值變化不大（RSD＜2%，n=5）；其他各供試液在4h內的pH值變化均較大（RSD＞2%，n=5）；各供試液在6h內的pH值變化均較大（RSD＞2%，n=6）；配伍溶液E、F、G、H的pH值較配伍前均明顯升高。

表2 各供試液pH值檢查結果

3.3 配伍液胰島素含量變化 在室溫（25℃）下，6h內各供試液的胰島素含量與新鮮配置的輸液中胰島素含量比值均＞90%；配伍溶液中的胰島素含量與配伍前溶液中的胰島素含量比值也均＞90%。結果表明，在500mL5%葡萄糖溶劑中，2IU～8IU胰島素與2g維生素C配伍后含量未明顯下降。見表3。

表3 各供試液的胰島素峰面積及配伍后胰島素含量下降情況

4 討論

由于維生素C穩定性較差，配置后無法長期保存，但是臨床藥師查房發現常有上午配置的輸液到下午還未完全用到病人身上。因此，本研究考察了普通胰島素與維生素C的葡萄糖配伍溶液在6h內的外觀、pH值和胰島素的含量等穩定性指標。通過臨床調研，發現胰島素濃度小于0.016IU/mL，維生素C的常用劑量為2g。

本研究結果顯示，在室溫6h內，各配伍液的外觀均無明顯改變。pH值檢查結果顯示，6h內配伍液的pH值均有不同程度升高，特別是在最后2h，升高明顯；配伍液與配伍前的胰島素溶液相比，pH值明顯升高，這可能與維生素C的pH值有關。維生素C的烯二醇式結構在酸性條件下易生成2，3-二酮古洛糖酸，再氧化水解生成蘇阿糖酸和草酸，所以引起pH值升高。6h內，輸液中的維生素C是否已氧化水解失效還需進一步對維生素C作定量分析。

胰島素的定量分析結果顯示，配伍后的輸液胰島素含量未明顯下降，均為配伍前溶液的90%以上。單從含量變化分析，胰島素含量未明顯減少，結果提示，6h內0.016IU/mL及以下濃度的胰島素與0.004g/mL維生素C的5%葡萄糖配伍溶液穩定性良好。