硫化氫對自發性高血壓大鼠心肌重構的作用及機制研究*

張曉景，王童，孔繁秀，劉宇航，陳宇鑫，張亮，李玲，司軍強

[石河子大學醫學院 1.生理教研室（新疆地方與民族高發病教育部重點實驗室），2.醫學教學實驗中心，新疆 石河子832000]

心臟作為高血壓直接損傷的靶器官之一，最顯著的特征性病理變化是心肌肥厚，以左心室肥厚最為明顯[1]。高血壓所致的心室壁增厚和心室幾何構型改變稱為高血壓心肌重構。自發性高血壓大鼠（spontaneous hypertensive rat,SHR）的肥厚心肌中間隙連接蛋白43（connexin 43,Cx43）表達上調且分布紊亂[2]。硫化氫H2S 可改善由亞硝基左旋精氨酸甲酯（l-nitro-arginine methyl ester,L-NAME）誘導的高血壓性心臟病[3]，可抑制腎血管性高血壓大鼠的心肌重構[4]，還可以抑制大鼠因高鹽飲食導致的心肌肥厚[5]。然而H2S 是否通過間隙連接蛋白影響心肌重構的研究甚少，因此，本文以SHR為研究對象，應用分光光度計檢測硫氫化鈉NaHS 對外周血及心肌組織中內源性H2S 含量的影響，應用蘇木精-伊紅（Hematoxylin-eosin,HE）染色及馬松（Masson）三色染色觀察心肌重構情況，通過免疫組織化學檢測H2S 對間隙連接蛋白40（Connexin 40,Cx40）、Cx43表達的影響；通過Western blotting 檢測H2S 對Cx40、Cx43 及α-平滑肌肌動蛋白（α-smooth muscle actin,α-SMA）、骨橋蛋白（Osteopontin,OPN）表達的調節作用，由此來探討H2S 對心肌重構的可能作用機制。

1 材料與方法

1.1 實驗動物

選取8 周齡SHR 雄鼠16 只和同齡Wistar 京都（Wistar-Kyoto,WKY）雄鼠8 只，清潔級，由北京維通利華實驗動物技術有限公司提供[動物合格證號：SCXK（京）2016-0006]，動物適應飼養1 周后進入實驗，動物房室內溫度為20 ～25℃，濕度為50%～ 55%。大鼠分籠喂養，給予標準飼料，自由進食水，環境安靜。

1.2 主要試劑

NaHS（美國索萊寶公司），H2S 檢測試劑盒（南京建成生物工程研究所），Masson 三色染色試劑盒、HE 試劑盒（北京索萊寶公司），Cx43 抗體、OPN 抗體（英國Abcam 公司），Cx40 抗體、α-SMA 抗體（美國Bioworld 公司）。……