中藥當歸化學成分的分離及其內酯類成分結構的鑒定研究

王傳娟

【摘 要】 目的：對中藥當歸中的化學成分以及內酯類成分結構進行分析，以此來為臨床用藥提供科學合理的依據。方法：相關化學成分均采用硅膠柱色譜和制備薄層色譜等方式進行分離純化，將波譜數據以及理化性質作為依據，對中藥當歸中的藁本內酯類化合物結構進行鑒定。結果：分離后共獲得15個化合物，采用色譜方法從當歸根乙醇提取物中分離出（Z）-藁本內酯、（Z）-6，7-反式-二羥基藁苯內酯、（Z）-6，7-環氧藁苯內酯、當歸酸（Z）-藁苯內酯-11-醇酯。結論：中藥當歸的化學成分采用薄層色譜法與硅膠柱色譜法進行分離操作簡單，為當歸化學成分的理化性質研究提供了重要參考依據。

【關鍵詞】 中藥;當歸;化學成分;內酯類成分;鑒定

【中圖分類號】R284.1

【文獻標志碼】A

【文章編號】 1005-0019（2019）14-118-02

現階段，中藥當歸已被廣泛應用于臨床，在血栓性淺靜脈炎、冠心病、高血壓、中風、腫瘤、婦科疾病以及貧血等疾病治療中得到了廣泛應用，能促使機體免疫力提高，同時還具備抗氧化、改善肺功能、抗炎等諸多功效[1-2]。本研究主要針對中藥當歸中的化學成分以及內酯類成分結構進行分析，以此來為臨床用藥提供科學合理的依據，報道如下。

1 儀器與試劑

1.1 儀器

JascoJ-1010旋光分析儀器;MP-A4型顯微熔點測定儀器;AV-612型以及Bruker ARS-300型核磁共振光譜儀器;DU-640紫外光譜儀器;996二極管陣列檢測儀器;Waters717高效液相色譜儀器。

1.2 試劑

三蒸水;柱色譜硅膠;薄層色譜硅膠H;;薄層色譜硅膠GF251;甲醇為色譜純;正己烷;丙酮;石油醚。

1.3 實驗試藥

批號為20150217的當歸，我院相關專業教授對其進行鑒定之后，確定為為傘形科植物當歸的干燥根。

2 方法與結果

2.1 提取與分離當歸有效成分

提取當歸有效成分：稱取10g干燥的中藥材當歸，粉碎之后浸泡在95%的乙醇溶液中，然后再采用旋轉蒸發儀器對其進行濃縮，獲取濃縮液與藥渣，然后再將95%的乙醇溶液加入藥渣中，嚴格按照以上方式進行浸提，行3次反復操作之后，合并濃縮液，獲得1.5L總浸膏[3];在水溶液中懸浮浸膏，對其進行萃取，獲得49.95g正丁醇萃取物、26.97g石油醚萃取物、53.1g乙酸乙酯萃取物。

分離當歸有效成分：經硅膠柱色譜部分分離醋酸乙酯，梯度洗脫石油醚—醋酸乙酯系統，最終共獲得15個化合物與15個部分，經甲醇溶液將第5部分析出白色固體，抽濾之后獲得雙藁苯內酯，第6部分經硅膠柱色譜分離，獲得5-羥甲基糠醛、5-乙酰氧甲基糠醛;第7部分經反復硅膠柱色譜分離，獲得對甲基苯酚;第15部分經硅膠柱色譜與柱色譜分離，獲得4-（2 羥基-1-甲氧乙基）-苯酚、阿魏酸、4-（2-羥基-1-乙氧乙基）-苯酚。經硅膠柱色譜將乙酸乙酯萃取物反復分離純化，獲得異歐前胡素、菠菜甾醇、發卡二醇、厚樸酚、反式阿魏酸、正丁基苯酞，采用以氯仿—甲醇行梯度洗脫，反復分離純化后獲得黃芩苷。

2.2 內酯類化合物藁苯內酯的分離與鑒定

提取方法：采用超臨界CO2萃取法，利用HA141-50-01超臨界萃取裝置，2取500g當歸中藥材，采用超臨界 CO2（SC-CO2）對其進行萃取，萃取壓力控制為20MPa，溫度控制為40攝氏度，流量控制為15kg/h，萃取時間控制在2h。

藁本內酯分離方法：選擇硅膠柱色譜進行分離，藁本內酯具有較小極性，采行5次反復梯度洗脫，獲得藁本內酯，純度在98%以上。

提取藁本內酯化合物：取當歸CO2超臨界萃取物，每次試驗時均取500g中藥當歸藥材，將其粉碎之后放入超臨界萃取釜中，采用CO2對其進行萃取;合并超臨界CO2萃取釜提取的揮發油，干燥后采用薄層制備方式行分離處理，行梯度洗脫，每100ml對溶液進行收集，然后再行GC-MS檢測，分成5分組份，各個組份均將溶劑揮發干燥后，行薄層色譜分離處理，萃取，溶劑回收之后獲得25.4g乙酸乙酯，324g油狀物質。再次硅膠柱色譜分離第1份之后，行梯度洗脫，獲物（Z）-藁本內酯;第3份經Sephadex LH-20柱色譜獲得當歸酸（Z）-藁苯內酯-11-醇酯;第7份經高效液相色譜以及硅膠柱色譜 Sephadex LH-20分離獲得物（Z）- 6，7-反式-二羥基藁苯內酯;分經過反復硅膠柱色譜后，乙酸乙酯部分獲得物（Z）- 6，7-環氧藁苯內酯。

藁本內酯類化合物結構鑒定：（1）（Z）-藁本內酯：經13C-NMR譜中，δ值為126.7、127.5、152.0/145.6等位移值表明有共軛價健存在于結構中，δ值為158.7表明有羰基存在于結構中，按照峰型分裂情況，可知其屬于內酯類化合物。（2）（Z）-6，7-反式-二羥基藁苯內酯：經13-NMR，可觀察到有12個碳原子存在于本結構中，含有雙鍵碳4個，連氧雙鍵碳1個，羰基結構1個，δ值為42.6 處可以觀察到有連氧烷基碳原子存在，同時還有烷基碳5個;Dept顯示，有4 個季碳原子存在于低場處，從1H-NMR譜中可以觀察到雙鍵氫2個。

3 討論

當歸屬于一種常見的中藥，主要分布于我國湖南、湖北、貴州、山西、青海、四川、云南以及甘肅等地區[4-5]。該藥物具有潤腸滑腸、調經止血以及補血和血等諸多功效，主要化學成分包括多糖類、苯酞類、內酯類、酚酸類、黃酮類以及揮發油等[6]。揮發油是當歸的主要有效成分，在總生物含量中占有1.2%左右的比例，包括酸性油、酚性油以及中性油3種，其中比重最高的為中性油，其主要成分包括松柏醇阿魏酸酯、新當歸內酯、亞丁基苯酞、川芎內酯類以及藁本內酯類等19種，具有降血壓等諸多作用，能有效保護實驗性心肌缺血癥。本研究中提取到了15種化合物，同時還對當歸揮發油中的藁本內酯類成分進行結構鑒定，通過超臨界CO2萃取法提取當歸中的揮發油成分，經硅膠柱色譜法分離出四種化合物，分別為（Z）-藁本內酯、（Z）-6，7-反式-二羥基藁苯內酯、（Z）-6，7-環氧藁苯內酯、當歸酸（Z）-藁苯內酯-11-醇酯。

綜上所述，中藥當歸的化學成分采用薄層色譜法與硅膠柱色譜法進行分離操作簡單，為當歸化學成分的理化性質研究提供了重要參考依據。

參考文獻

[1] 朱邵晴， 郭盛， 錢大瑋，等. 基于多元功效成分的當歸藥材產地現代干燥加工方法研究[J]. 中國中藥雜志， 2017， 42（2）：264-273.

[2] 李靜. 基于NMR代謝組學技術的當歸不同部位化學成分比較[J]. 中草藥， 2017， 48（7）：1409-1415.

[3] 陳廷廷，劉波，王秀梅. 川西高原當歸藥花蜜酒發酵條件優化及其風味成分分析[J]. 食品工業科技， 2017， 38（15）：146-151.