土霉素分散片的制備及質量評價

蔣公建，魏世軍，駱世軍，雷元軍，范建彪，符華林

（1.重慶市萬州區畜牧站，重慶 萬州 404100；2.重慶先鋒動物藥業有限公司，重慶 萬州 404100；3.重慶市開州區畜牧獸醫局，重慶 開州 405400；4.四川農業大學動物醫學院獸藥創新制劑工程技術研究中心，四川 成都 611130）

土霉素是20世紀40年代發現的四環素族廣譜抗菌藥物，獸醫臨床上廣泛用于治療大腸桿菌或沙門氏菌引起的下痢，多殺性巴氏桿菌引起的牛敗血癥、豬肺疫、禽霍亂，支原體引起的牛肺炎、豬氣喘病，血孢子蟲引發的泰勒焦蟲病以及放線菌病等[1]。土霉素在水中極微溶解，易溶于稀酸和稀堿，故常用其鹽酸鹽。臨床主要劑型有土霉素注射液、片劑、預混劑、混懸劑等[2-4]。

藥物的起效時間與藥物劑型息息相關，普通片劑由于崩解時間慢常常導致藥物起效較慢。分散片是一種速釋固體劑型，是指遇水迅速崩解并均勻分散的片劑，可口服或加水分散后飲用，也可咀嚼或含服，主要適用于難溶性藥物及生物利用度較差的藥物。現有的土霉素普通片劑，崩解遲緩，藥物溶出速度慢，生物利用度差，不能滿足臨床需要[4]。本研究將土霉素普通片劑制成分散片，利用分散片能迅速崩解、溶出的特點，解決土霉素內服吸收不規則、不完全的問題，為提高其生物利用度奠定基礎。

1 材料與方法

1.1 藥品及試劑 土霉素，含量9%，來自石家莊某生化有限公司；羧甲基淀粉鈉（CMS-Na）、微晶纖維素（MCC）、低取代羥丙基纖維素（L-HPC）、聚乙二醇（PEG4000），均購自安徽某藥用輔料有限公司；可溶性淀粉，購自成都某化工公司。

1.2 主要儀器 片劑崩解儀，ZRS-6型智能溶出試驗儀，TDP型單沖壓片機，紫外分光光度計。

1.3 土霉素分散片的制備方法

1.3.1 崩解劑的篩選 影響分散片質量的最關鍵因素是崩解劑的選擇，本研究主要對崩解劑的種類和用量進行了正交優化。以可溶性淀粉和糊精按3∶1的比例混合作為填充劑，以10%淀粉漿作黏合劑，以崩解時限為主要檢測指標，對預試驗篩選的羧甲基淀粉鈉（CMS-Na）、低取代羥丙基纖維素（L-HPC）和微晶纖維素（MCC）三種不同崩解劑進行考察。3種崩解劑的用量范圍分別為：CMS-Na 5%～9%，L-HPC 2%～4%，MCC 10%～20%。然后采取正交設計對各崩解劑的用量進行優化（見表1）。

表1 正交試驗因素水平表

1.3.2 制備步驟 采取濕法制粒壓片的方法制備土霉素分散片[5]，崩解劑采取內外加入法。具體制備過程：先稱取處方量的L-HPC、CMS-Na、MCC混合均勻；隨后分別稱取處方量的土霉素原藥、可溶性淀粉、糊精和50%崩解劑混合，加入適量10%淀粉漿，制成松、軟、黏、濕度適宜的軟材，過16目篩制粒，置于60℃干燥箱中烘干15 min；整粒過16目篩，加入潤滑劑聚乙二醇（PEG4000）和剩余的50%崩解劑混合，用單沖壓片機壓片即得到土霉素分散片。

1.4 土霉素分散片的質量檢測

1.4.1 崩解時限檢查 按照《中國藥典》附錄XA規定的崩解時限檢查法[6]，取土霉素分散片各6片，分別置崩解儀吊籃的玻璃管中，溫度為37±1℃，啟動崩解儀，記錄崩解時間。

1.4.2 分散均勻性測定 按照《中國藥典》附錄IA有關片劑的規定[6]，分散片還應該進行分散均勻性測定，方法：取分散片6片，加入裝有100mL水（水溫控制在15～25℃）的燒杯中，照崩解時限檢查法，選擇篩孔內徑為710μm的不銹鋼篩網，振搖3 min，考察分散片是否全部崩解并通過篩網。

1.4.3 片重差異測定 取20片土霉素分散片，精確稱量每片片重，求得平均值，計算片重差異，然后進行統計分析[6]。

1.4.4 脆碎度檢查 按照藥典2015版附錄項下的檢查法進行測定[6]。取若干片分散片，使其總重量約為6.5 g，用吹風機吹去脫落的粉末，精密稱重，置圓筒中，轉動100次，取出，同法除去粉末，精密稱重，計算減失重量。

1.4.5 溶出度測定 先建立土霉素含量測定方法[4]。精密稱取土霉素0.1 g，用適量稀鹽酸溶解并定容至100mL，得到1mg/mL的溶液，分別移取2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0mL于50mL容量瓶中，用水定容至刻度。以水為空白，在354nm處測定吸光度（A）值，將A值對濃度（C）進行線性回歸，得標準曲線方程：A=0.006874C-0.002389（r=0.9996，n=6）。結果表明，鹽酸土霉素在29.4～116.7μg/mL濃度范圍內，吸光度與濃度呈良好的線性關系，精密度和回收率良好，可用于土霉素定量。

參考《中國藥典》附錄規定的方法測定溶出度[6]。以水為溶出介質（500 mL），取最優處方土霉素分散片和自制土霉素普通片，分別投入溶出度測定儀，設置溫度為37±0.5℃，轉速為75r/min，然后計時，至規定的取樣時間，每次吸取溶出液10mL（同時補充相同體積、相同溫度的水），立即用0.45μm微孔濾膜過濾（取樣至過濾應在30s內完成）。取澄清濾液，測定吸光度，并根據標準曲線計算藥物濃度，然后推算出每片的溶出度。

2 結果與分析

2.1 崩解劑篩選結果 分散片與普通片的主要區別在于崩解時間不一樣，因此本研究主要對崩解劑進行了優化，其結果見表2。采用極差法對不同崩解劑組合的崩解時間進行分析，得出3種崩解劑對崩解時間的影響順序為A＞C＞B，即CMS-Na對崩解時間影響最大，其次是MCC，最后是L-HPC。3種崩解劑的最優組合是A3B2C3。

表2 崩解劑篩選正交試驗結果

驗證試驗：由于最后得到的崩解劑組合并未包括在9次試驗中，故進行了驗證試驗。按處方A3B2C3制備分散片，平行操作3次，結果3份樣品的崩解時限分別為45、37、41s，平均41s。可見驗證試驗和正交試驗結果一致，表明該處方穩定可行，所制得的三批分散片外觀光潔、完整，在水中崩解快，符合分散片的各項質量指標。

2.2 最優處方土霉素分散片的質量評價

2.2.1 片重差異測定 20片土霉素分散片的片重及平均片重結果見表3。根據《中國藥典》規定的片重差異限度計算各片的片重差異[6]，并判斷各片是否符合規定。結果表明，制得的分散片片重差異在-2.810%～2.621%，符合《中國藥典》規定的“0.3 g以下片劑的片重差異在±7.5%內”，說明本研究研制的土霉素分散片片重差異符合要求。

表3 土霉素分散片片重差異分析

2.2.2 分散均勻性測定 結果顯示：所選取的6片分散片全部在3 min內崩解并通過710 μm篩網，符合《中國藥典》規定[6]。

2.2.3 脆碎度檢查 結果顯示：所選取的分散片在規定時間內減失重量為0.27%，未檢出斷裂、龜裂和粉碎的藥片，符合藥典規定。

2.2.4 溶出度測定 按照《中國藥典》附錄XC規定的方法測定溶出度，計算每個藥片在不同時間點的累積溶出度[6]，繪制分散片和普通片的溶出度曲線（圖1）。從圖1可以看出，土霉素分散片在30min時的累積溶出度已經達到85%，而普通片的溶出度僅為55%，分散片的溶出速率明顯大于普通片，更有利于藥物的吸收和療效的發揮。

圖1 土霉素分散片和普通片的溶出度曲線圖

3 小結

控制分散片質量的主要因素是結合主藥的性質選擇能快速崩解溶出的適宜輔料，崩解劑的種類和量直接影響到分散片的內在質量[5]。本試驗選擇L-HPC、CMS-Na、MCC三種崩解劑聯合使用，比單用一種崩解劑效果更好，而且在制備工藝中采用內外加法，既有利于崩解，又利于溶出，提高了分散性。

CMS-Na是一種白色無定形粉末，由于分子結構特殊致其在水中容易分散并溶脹，吸水后可膨脹至原體積的300倍，是性能優良的崩解劑。MCC具有海綿狀的多孔管狀結構，具有優良的填充性和崩解性，常用于調節溶出速率。L-HPC具有很大的表面積和孔隙度，所以有很好的吸水速度和吸水量，其吸水膨脹率在500%～700%，崩解后的顆粒較細，利于藥物溶出。

通過以上試驗結果分析得出，鹽酸土霉素分散片崩解迅速、溶出度高，符合分散片制劑要求，所用輔料價格便宜，且制備工藝簡單，適合工業化生產，具有良好的開發利用價值。