膠乳增強(qiáng)免疫比濁法甲胎蛋白AFP診斷試劑盒應(yīng)用評(píng)價(jià)

楊柳

（國(guó)藥控股湖北有限公司 湖北 武漢 430000）

（湖北省婦幼保健院 湖北 武漢 430000）

甲胎蛋白是胎兒肝臟及胃腸道和孕期卵黃囊分泌的一種蛋白，新生兒在1周歲以前血清中的含量高，之后會(huì)降低到正常水平。甲胎蛋白含量＞20ng/ml且數(shù)值有增加的患者，就有可能肝臟出現(xiàn)問(wèn)題，尤其可能出現(xiàn)肝細(xì)胞癌變。臨床上唯一推薦甲胎蛋白作為肝癌檢測(cè)標(biāo)志物，對(duì)膠乳增強(qiáng)免疫比濁法甲胎蛋白AFP檢測(cè)試劑盒的精密度、線性范圍和準(zhǔn)確性進(jìn)行評(píng)價(jià)，判斷其是否適用于臨床，以下是詳盡報(bào)道。

1.資料與方法

1.1 一般資料

選取2018年1－12月來(lái)湖北省婦幼保健院就診的50例健康血清樣本、80例原發(fā)性肝癌血清樣本和50例原發(fā)性肝病血清樣本，所有樣本采集完后均加入EDTA防止血凝，離心機(jī)離心取含有血細(xì)胞層的液體，之后加入溶血試劑，混勻，待測(cè)。膠乳增強(qiáng)免疫比濁法甲胎蛋白AFP診斷試劑盒為目前市場(chǎng)上中等價(jià)位的試劑盒。

1.2 方法

分析湖北省婦幼保健院原發(fā)性肝癌患者、原發(fā)性肝病患者和健康體檢者的血清中甲胎蛋白的含量水平，每個(gè)樣本測(cè)試3次，重復(fù)測(cè)試5天，比較分析試劑盒的精密度。線性范圍：依據(jù)WST420～2013中提到的試劑盒性能分析要求，將高濃度樣本在生理鹽水溶液中倍比稀釋，稀釋成6個(gè)濃度梯度，每個(gè)樣本濃度重復(fù)測(cè)定2 次取平均值；以濃度為橫坐標(biāo)，以測(cè)量值為縱坐標(biāo)，分析6個(gè)濃度測(cè)量值的線性回歸性，得到線性回歸方程式Y(jié)=aX+b，將實(shí)際測(cè)量得到的數(shù)值與通過(guò)線性回歸方程式Y(jié)=aX+b計(jì)算得到的理論濃度進(jìn)行比較，又比較計(jì)算得到兩個(gè)數(shù)值之間的差異，多次比較分析測(cè)量不同濃度與計(jì)算得到理論數(shù)值之間的差異，觀察是否在供貨商使用說(shuō)明書中的最大允許偏差之內(nèi)。準(zhǔn)確性：檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)樣品的數(shù)據(jù)水平，與標(biāo)準(zhǔn)值作比較并計(jì)算相對(duì)偏差，觀察是否在允許范圍內(nèi)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

研究數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)和分析使用SPSS17.0軟件，分別采用χ2和t檢驗(yàn)，差異有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。

2.結(jié)果

2.1 試劑盒線性回歸方程結(jié)果評(píng)價(jià)

線性回歸方程Y=1.8776X+37.342。如下圖1所示。供貨商說(shuō)明書中給出的線性參考范圍：5～900ng/ml，相關(guān)系數(shù)R2=0.9989，且橫縱標(biāo)參數(shù)X和縱坐標(biāo)參數(shù)Y的相對(duì)偏差≤4%，膠乳增強(qiáng)免疫比濁法甲胎蛋白AFP診斷試劑盒的線性范圍滿足測(cè)試要求。詳細(xì)的數(shù)據(jù)情況見(jiàn)下圖。

圖 試劑盒線性回歸方程結(jié)果評(píng)價(jià)

2.2 試劑盒精密度和準(zhǔn)確性的對(duì)比情況

精密度的試驗(yàn)見(jiàn)表1所示。試劑盒的測(cè)量值與標(biāo)示值的具體數(shù)值均列入表中，通過(guò)計(jì)算可得到相對(duì)偏差均小于±3%，該數(shù)值在WST420～2013要求的誤差±10%以內(nèi)，準(zhǔn)確性符合臨床要求。對(duì)兩個(gè)標(biāo)準(zhǔn)樣的檢測(cè)數(shù)據(jù)結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)值比較，通過(guò)計(jì)算得出相對(duì)偏差為2.1%、2.3%，這兩個(gè)相對(duì)偏差在試劑盒說(shuō)明書標(biāo)識(shí)的±5%的范圍以內(nèi)。

表 試劑盒精密度測(cè)試結(jié)果的比較

3.討論

在近些年原發(fā)性肝癌和原發(fā)性肝病的發(fā)病人數(shù)越來(lái)越多，是逐漸上升的趨勢(shì)[1]。而原發(fā)性肝癌的預(yù)后效果較差，5年生存率人數(shù)僅占總數(shù)的小于5%不到，世界上每一年死于原發(fā)性肝癌的就約有59.8萬(wàn)，在惡性腫瘤致死的病例數(shù)中位列第三。在我國(guó)原發(fā)性肝癌是死亡人數(shù)第二的癌癥，占世界此病死亡人數(shù)的50%以上[2-3]。肝癌患者預(yù)后差的主要原因之一就是在早期均未能發(fā)現(xiàn)和診斷，這就錯(cuò)失了治療的時(shí)間，原發(fā)性肝癌在病發(fā)的不同階段治療效果及治療后的恢復(fù)上都有顯著差異。因此，對(duì)原發(fā)性肝癌的早期發(fā)現(xiàn)、診斷和治療是延長(zhǎng)患者生命的重要因素。

該研究的結(jié)果顯示，在經(jīng)過(guò)膠乳增強(qiáng)免疫比濁法甲胎蛋白AFP診斷試劑盒準(zhǔn)確性、精密度和線性范圍的分析比較后，試劑盒測(cè)得的準(zhǔn)確性相對(duì)偏差均比說(shuō)明書上要求的5%要小一半左右，故精確性符合要求。精密度的測(cè)試結(jié)果也在WST420～2013要求的誤差以內(nèi)。試劑盒的線性范圍X和Y的偏差小于4%，在（15～1000ng/ml）內(nèi)也符合臨床要求。結(jié)果表明，膠乳增強(qiáng)免疫比濁法甲胎蛋白AFP診斷試劑盒可準(zhǔn)確測(cè)量肝病患者血清中甲胎蛋白的含量，以此來(lái)判斷患者肝臟狀況，并作為進(jìn)一步化驗(yàn)的依據(jù)。這與李彬等的研究結(jié)果相近［4］。

綜上，通過(guò)對(duì)診斷試劑盒的分析，得到其準(zhǔn)確性、精密度和線性范圍三個(gè)數(shù)據(jù)均符合臨床要求的結(jié)論。可見(jiàn)膠乳增強(qiáng)免疫比濁法甲胎蛋白AFP診斷試劑盒對(duì)甲胎蛋白含量的檢測(cè)數(shù)據(jù)具有可靠性。所以，該診斷試劑盒可以在臨床上進(jìn)行推廣及應(yīng)用。