某地區GH高危人群HSV-2基因檢測結果分析

楊戈（通訊作者） 陳明清 崔凡 雍剛 謝震 沈柱 林昭春

（1 四川省醫學科學院·四川省人民醫院皮膚病性病研究所 四川 成都 610072)

(2 四川省醫療衛生服務指導中心 四川 成都 610041)

生殖器皰疹(Genital herPes,GH)是由單純皰疹病毒（HerPes simPlex virus，HSV）感染所致的常見病毒性性傳播疾病，皮損易復發性及HSV致癌性是臨床關注熱點。既往認為GH多由單純皰疹病毒Ⅱ型（HerPes simPlex virus-tyPe2，HSV-2）感染引起[1]，但隨著近年來生態環境以及性接觸方式的改變，由單純皰疹病毒Ⅰ型（HerPes simPlex virus-tyPe 1，HSV-1）感染所致的GH比例有所增加[2]。為了解本地區HSV-2感染情況，本研究回顧性分析本地區361例疑似GH患者HSV-2脫氧核糖核酸（Deoxyribonucleic acid，DNA）篩查情況，并比較不同性別、年齡和季節陽性檢出率的差異，現報道如下。

1.資料與方法

1.1 一般資料

2017年8 月～2018年1月在四川省醫學科學院·四川省人民醫院皮膚病性病研究所門診就診的疑似GH患者。排除標準：近3月內接受系統或局部免疫/抗病毒治療，合并自身免疫性疾病、感染性疾?。òㄆ渌詡鞑ゼ膊〖癏IV感染）、嚴重系統性疾病、糖尿病、妊娠等以及有再次感染風險者。所有患者均自愿進行HSV-2核酸檢測，并簽署知情同意書。根據不同年齡分為≤20歲組、21～30歲組、31～40歲組、41～50歲組、51～60歲組及≥61歲組，按性別分為男性組和女性組，根據檢測時間不同，分為秋季組（8～10月）和冬季組（11月-次年1月）。

1.2 方法

所有患者均采用實時熒光定量聚合酶鏈反應（realtime fluorescence quantitative Polymerase chain reaction，FQ-PCR）檢測HSV-2DNA。步驟如下：(1)采集標本：先用消毒棉簽拭去皮損表面分泌物，以無菌手術刀片采取皮損組織液及脫落細胞，將其放入裝有滅菌生理鹽水的樣本管中，旋緊管蓋，做好標本標注和日期，于-20℃保存，并在1周內檢測。(2)采用FQ-PCR技術對樣本中HSV-2DNA進行檢測。AFD9600型實時熒光定量PCR儀由杭州安杰思醫學科技有限公司生產，單純皰疹病毒Ⅱ型核酸測定試劑盒由中山大學達安基因股份有限公司生產。主要步驟包括DNA提取、PCR擴增、結果分析及質量控制等，操作嚴格按照試劑說明書進行并在超凈工作臺中完成。所有儀器設備均運轉正常，所有檢測試劑均在有效期內。標本收集和實驗方法均通過本院倫理委員會批準。計算各組陽性檢出率（Positive detection rate，PDR）。

1.3 統計學分析

數據采用SPSS20.0統計軟件進行統計學分析，計數資料采用率（%）表示，進行χ2檢驗，計量資料采用（±s）表示，進行t檢驗，P＜0.05為差異具有統計學意義。

2.結果

2.1 入選對象基本情況

361 例入選患者男性72.30%（261例），女性27.70%（100例），平均（39.38±13.38）歲，總體PDR 36.29%（131/361）。各組性別、季節和年齡上具有可比性（t=0.682、0.753，P=0.496、0.452均＞0.05）。秋季組男女比例145:57，冬季組116:43，經χ2檢驗兩組性別比例差異無統計學意義（χ2=0.061，P=0.805＞0.05）。

2.2 不同性別和年齡陽性檢出率的差異比較

各性別組陽性檢出率，經χ2檢驗，兩者無統計學差異（χ2=0.824，P=0.364＞0.05）；不同年齡段陽性檢出率不同，經χ2檢驗，無統計學差異（χ2=1.646，P=0.342＞0.05），見表1。不同年齡段HSV-2DNA陽性男女患者分布趨勢見表2，經Fisher's精確概率法檢驗，組間無統計學差異（P=0.625＞0.05）。尚發現2例年齡＞80歲檢測陽性的男性患者。

表1 不同性別、年齡和季節HSV-2檢出情況比較

表2 不同年齡段HSV-2DNA檢測陽性性別分布

2.3 不同季節陽性檢出率的差異比較

秋季組為34.16%，冬季組為38.99%，經χ2檢驗，兩者無統計學差異（χ2=0.900，P=0.343＞0.05），見表1。秋季組檢測陽性男女比例52:17,冬季組為39:23，經χ2檢驗，組間無統計學差異（χ2=2.390，P=0.122＞0.05）。

3.討論

HSV感染為人類常見的皰疹病毒感染之一。根據血清型不同，可分為HSV-1和HSV-2。一般認為HSV-1主要是腰以上的感染，HSV-2則是腰以下的感染[3]。HSV除了引起易復發的單純皰疹和生殖器皰疹外，尚可引起角膜炎、腦膜炎、腦炎，甚至壞死性肝炎[4]。妊娠期婦女HSV原發感染還可誘發流產、死產、胎兒畸形等不良妊娠結局。故HSV的核酸篩查十分必要，有助于及早發現和治療HSV感染，減少其在高危人群的傳播，減少不良結局的發生。雖然近年來發現HSV-1感染引起的生殖器皰疹比例增加[5]，但后者仍以HSV-2感染為主[6]。實時熒光定量PCR檢測HSV-2核酸具有穩定性、靈敏度、特異性均高的特點[7]，本次采用該法檢測HSV-2核酸，確保檢測結果的穩定、準確和可靠。

361 例患者HSV-2DNA陽性檢出率36.29%，低于既往報道的成都地區單純皰疹病毒Ⅱ型55.65%的陽性檢出率[8]，可能與入選患者就診季節生殖器皰疹發病率相對較低有關。本研究發現不同性別患者的總體陽性檢出率以及不同年齡段和季節的分組陽性檢出率均無統計學差異，與國內其他研究結果類似[9-10]，與既往報道本地區男性感染率低于女性不同[8]，提示本地區男性HSV-2感染率有上升趨勢，需加強HSV-2感染患者性伴侶同時篩查和防治。不同年齡段雖然陽性檢出率有差異，但無統計學意義，與國內其他報道一致[8-11]。盡管如此，21～50歲年齡段陽性檢出率最高，結合患者平均年齡，說明本地區HSV-2感染仍集中于性活躍人群。還發現2例年齡大于80歲HSV-2陽性的男性患者，提示應加強對老年高危人群的病毒篩查和防治。入選患者秋冬兩季陽性檢出率差異不顯著，有待擴大樣本進一步研究。