雞包涵體肝炎的診斷方法與防制措施

來慶梅 丁愛君 郭龍宗 李玉燕

中圖分類號：S858.311.33? ? ?文獻標識碼：C? ? ?文章編號：1673-1085（2019）3-0027-03

雞包涵體肝炎（IBH）又稱貧血綜合征，是由I亞群禽腺病毒引起的雞的一種急性傳染病，以突然死亡、嚴重貧血、黃疸以及肝臟腫脹出血、有壞死灶和肝細胞內(nèi)形成核內(nèi)包涵體為特征。

1? 病原學

包涵體肝炎（IBH）病毒屬于腺病毒科、禽腺病毒屬，病毒顆粒直徑為70～90nm，無囊膜，呈正20面體對稱結(jié)構(gòu)。在氯化銫中的浮密度為1.32～1.37g/ml。為雙股DNA病毒。病毒復制分兩個階段。雞腺病毒有12個血清型。該病毒對外界環(huán)境的抵抗力較強。耐熱，一般來說，該病毒在水溶液中56℃ 30min被滅活，而存在雙價離子時熱穩(wěn)定性會降低，有的病毒株在60℃，甚至70℃下30min仍具有活力。對脂溶劑，如乙醚和氯仿、脫氧膽堿酸鈉、胰蛋白酶、2%酚和50%乙醇等具有抵抗力，同時耐受pH3～9，但在濃度1：1000的甲醛中可被滅活。另外，病毒的增殖也可被DNA抑制劑IuDR和BuDR所抑制。

2? 發(fā)病機理和流行病學

該病多發(fā)生于3～7周齡的肉雞，早至7日齡、晚至20周齡也有發(fā)生。蛋雞多發(fā)于18周齡前。3周齡以下的雛雞和18周齡以上的成年雞很少發(fā)病。雞包涵體肝炎可發(fā)生垂直傳播和水平傳播。腺病毒可通過胚傳播，用感染雞的胚和子代雛雞來制備細胞培養(yǎng)物時，可再激活腺病毒性。病毒可存在于糞便、氣管和鼻粘膜以及腎臟中。因此病毒可在各種排泄物中傳播，并且糞便中病毒滴度最高。病毒也存在于精液中，預示著人工受精具有潛在的危險。雞感染1d后就能分離到腺病毒，但正常情況下在3周后才會排毒。肉雞排毒的高峰是在感染后第4～6周，后備母雞的排毒高峰是在感染后第5～9周，在產(chǎn)蛋高峰時，出現(xiàn)二次排毒期。春、秋兩季多發(fā)。I亞群禽腺病毒是潛在性、條件性病原。在飼養(yǎng)管理水平差、存在應激反應時易發(fā)病;免疫法氏囊活疫苗或感染傳染性法氏囊病、傳染性貧血等免疫抑制病時則大大增加該病的發(fā)病率和死亡率。

3? 臨床癥狀和病理變化

自然感染的雞群，在3～4d后突然出現(xiàn)死亡高峰，一般第5天停止，但偶爾也持續(xù)2～3周，發(fā)病率低，病雞呈蹲伏姿勢，精神不振、食欲減退、嗜睡、羽毛粗亂且缺少光澤，雞冠、肉髯、耳垂、面部皮膚和眼結(jié)膜蒼白，并有貧血和黃疸癥狀。水樣下痢，肛門周圍有污穢。48h內(nèi)死亡，死亡率可達10%，偶爾高達30%。雞包涵體肝炎與新城疫、法氏囊、貧血因子、大腸桿菌病等疾病混感時可使發(fā)病率和死亡率增高。

病雞全身皮膚蒼白貧血，血液色淡、稀薄如水，末梢血液稀薄，血紅細胞和血小板明顯減少。特征性病變在肝臟，肝腫大、肥厚、褪色，呈淡褐色或黃褐色，質(zhì)脆易破裂，表面呈點狀或條索狀出血，包膜下有較大面積的淤血和灶狀出血，并有大小不等的黃色壞死點或壞死斑（見圖1），肝脂肪變性發(fā)黃，嚴重的雞包涵體肝炎就好像煮熟的雞蛋黃，腎腫大呈灰白色并有出血點（見圖2），骨髓呈灰白色或黃色。胸部及腿部肌肉有出血點和出血斑。肝細胞內(nèi)可見有包涵體，嗜酸性，大而圓，或者不規(guī)則，周邊有明顯的蒼白暈，偶見有嗜堿性包涵體。

4? 診斷方法

根據(jù)流行病學、臨診癥狀和病理特點可做出初步診斷，確診需進行實驗室診斷。

4.1? 實驗室診斷? 可選用病雞的肝臟和脾臟，將樣品制成10%懸液，接種9～12日齡的SPF雞胚，或無母原抗體雞胚的卵黃囊或絨毛尿囊膜上，經(jīng) 2～7d雞胚死亡，胚體全身充血或出血，肝臟有黃色壞死灶，在肝細胞內(nèi)可檢出嗜堿性核內(nèi)包涵體（見圖3）。雞胚成纖維細胞和氣管培養(yǎng)物不敏感。雖然都是經(jīng)過三次傳代，但一般每次培養(yǎng)7d，盲傳兩代也就足夠了。分離鑒定該病毒，可通過電鏡直接檢查培養(yǎng)細胞裂解物，能很快得出陽性結(jié)果。利用異硫氰酸熒光素標記的禽腺病毒抗血清，采用細胞免疫學（直接免疫熒光）染色技術(shù)可檢測感染細胞中的腺病毒。利用所有已知血清型的標準參照血清進行病毒中和實驗可以鑒定分離毒的血清型。也可采用分子生物學方法進行病毒鑒定，利用DNA原位雜交（ISH）技術(shù)檢測組織樣品中的腺病毒。利用普通診斷PCR檢測病毒群時，采用檢測種和血清型的引物更為實用。采用雙向免疫擴散（DID）實驗可以檢測針對群特異性抗原的抗體，該方法對自然感染的病例很敏感。還可采用血清中和試驗、間接免疫熒光抗體試驗和酶聯(lián)免疫吸附試驗等方法診斷。

4.2? 鑒別診斷? 與住白細胞原蟲病的鑒別：二者外觀都有嚴重的貧血癥狀，但住白細胞原蟲病急性死亡的較少，末梢血液涂片可見到配子生殖Ⅱ期原蟲，剖檢時肌肉、內(nèi)臟和腸漿膜出血，多呈大頭針帽狀凸出表面，較硬，肝臟無斑駁狀變化。與傳染性貧血因子的鑒別：二者均有嚴重貧血，但雞傳染性貧血因子急性死亡的較少，發(fā)病的多為2～4周齡雛雞，比包涵體肝炎患病雞的日齡大，而且剖檢不見肝臟斑駁狀。與傳染性法氏囊病的鑒別：區(qū)別點是傳染性法氏囊病有典型的法氏囊腫大、出血和漿膜下膠凍樣水腫的變化。

5? 預防和控制措施

目前治療該病尚無有效疫苗和藥物，只能采取綜合性防制措施，以預防為主，加強飼養(yǎng)管理。

5.1? 防止病原的傳入? 對沒有發(fā)生過該病的地區(qū)、雞場和雞群，要把好引入關(guān)，嚴防傳入該病。堅持自繁自養(yǎng)原則，不從有該病的地區(qū)和雞場引進種雞和種蛋。凈化免疫抑制性疾病，做好法氏囊病和傳染性雞貧血因子等疾病的防制。

5.2? 加強飼養(yǎng)管理? 堅持不同群的雞分群隔離飼養(yǎng)和定期消毒，防止密度過大，經(jīng)常通風換氣，提高雞群的抵抗力。本病共12個血清型，不同血清型交叉保護率低。疑似發(fā)病種禽所產(chǎn)種蛋要停止孵化。發(fā)病種禽排毒高峰在發(fā)病后5～9周，發(fā)現(xiàn)商品代雞群發(fā)病，發(fā)病種禽10周內(nèi)所產(chǎn)種蛋停止孵化，降低商品代雞群的發(fā)病率。

5.3? 發(fā)病雞場執(zhí)行嚴格的消毒和空舍管理制度? 發(fā)病雞場在飲水飼料中添加抗生素和多種維生素預防雞群的繼發(fā)感染。空舍期應在7周以上，雞舍用0.1%～0.3%次氯酸鈉噴霧、福爾馬林熏蒸等徹底消毒;糞便加入0.5%生石灰堆積發(fā)酵，飲水用漂白粉消毒。