小鼠沙蠶毒素類殺蟲劑中毒不同洗胃方法的生存分析

羅小波　蔡昆　吳健鶴

【摘要】 目的：篩選可以減少沙蠶毒素殺蟲劑吸收、提高其臨床搶救成功率的洗胃劑種類。方法：采用動物實(shí)驗(yàn)，分為生理鹽水組、碳酸氫鈉液組、食用菜籽油組3組，每組小鼠30只，分別用生理鹽水、碳酸氫鈉液、食用菜籽油與沙蠶毒素殺蟲劑混合后對實(shí)驗(yàn)小鼠胃管注入，觀察對比三組小鼠對不同混合液胃管注入后的死亡時(shí)間差異，進(jìn)行生存時(shí)間分析，即可找出最好的灌胃方法。結(jié)果：三組小鼠均觀察到中毒表現(xiàn)：神志方面出現(xiàn)躁動、震顫、肌肉抽搐，繼而活動減少，呼吸方面出現(xiàn)呼吸急促、發(fā)紺，經(jīng)方差分析發(fā)現(xiàn)，不同洗胃方法小鼠生存時(shí)間有差異統(tǒng)計(jì)學(xué)（F=260.833，P<0.001）。三組不同洗胃混合液的生存時(shí)間兩兩比較分析發(fā)現(xiàn)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.001），碳酸氫鈉組生存時(shí)間最短，為（10.20±4.358）h，食用菜籽油組生存時(shí)間最長，為（36.87±5.794）h，生理鹽水組的生存時(shí)間介入以上兩組之間，為（24.37±2.977）h。經(jīng)過Kaplan-Meier法分析，繪制三組的生存函數(shù)圖，食用菜籽油組生存函數(shù)圖位于圖表最頂端。結(jié)論：口服沙蠶毒素類殺蟲劑中毒時(shí)，使用食用菜籽油洗胃，有可能提高此類中毒患者的搶救成功率，生存率最高。

【關(guān)鍵詞】 沙蠶毒素類殺蟲劑; 洗胃; 生存時(shí)間

doi：10.14033/j.cnki.cfmr.2019.03.080 文獻(xiàn)標(biāo)識碼 B 文章編號 1674-6805（2019）03-0-03

Analysis of Different Methods of Gastric Lavage on Survival of Mice Nereistoxins Poisoning/LUO Xiaobo，CAI Kun，WU Jianhe.//Chinese and Foreign Medical Research，2019，17（3）：-168

【Abstract】 Objective：To screen the types of gastric lavage that could reduce the absorption of psammophila toxin insecticides and improve the success rate of clinical rescue.Method：Animal experiments were conducted and divided into three groups：normal saline group，sodium bicarbonate group and rapeseed oil group.Thirty mice in each group were injected into the gastric tube of the experimental mice with saline，sodium bicarbonate solution，rapeseed oil and sand silkworm toxin insecticide，respectively.The difference of the time of death of the three groups of mice after the injection of different mixed liquid gastric tube was observed and compared，and the survival time was analyzed.Result：Poisoning manifestations were observed in all three groups of mice：agitation，tremor，muscle twitching，subsequent decrease in activity，shortness of breath and cyanosis in breathing.The survival time of mice with different gastric lavage methods was statistically different（F=260.833，P<0.001）.The survival time of three groups of different gastric lavage mixture was analyzed by two or two comparisons，the difference was statistically significant（P<0.001）.The survival time of sodium bicarbonate group was the shortest （10.20±4.358）h，while that of rapeseed oil group was the longest （36.87±5.794）h.The survival time of saline group was （24.37±2.977）h between the above two groups.Through Kaplan-Meier analysis，three groups of survival function diagrams were drawn.The survival function diagrams of edible rapeseed oil group were located at the top of the diagrams.Conclusion：Gastric lavage with rapeseed oil may improve the rescue success rate and the survival rate of patients with psammophila toxin poisoning.

【Key words】 Nereistoxins; Gastric lavage; Survival time

First-authors address：Zigong Fourth Peoples Hospital，Zigong 643000，China

盡管對有機(jī)磷農(nóng)藥中毒患者的臨床搶救措施已較為規(guī)范成熟，但是對重度沙蠶毒素類殺蟲劑中毒的患者，搶救措施仍以對癥治療為主，尚缺乏治療指南。查閱文獻(xiàn)[1]，沙蠶毒素類殺蟲劑生產(chǎn)性中毒患者的總體死亡率1.4%，非生產(chǎn)性中毒患者的死亡率波動于11.6%～14.0%。臨床工作中，醫(yī)務(wù)工作者對沙蠶毒素類殺蟲劑中毒的認(rèn)識還不全面，并由此而導(dǎo)致?lián)尵却胧┎磺‘?dāng)，甚至誤診，最后引發(fā)嚴(yán)重的臨床事件發(fā)生率逐漸增高[2]。此類重度中毒患者死亡原因多為呼吸肌麻痹、肺水腫、心肌損害，甚至嚴(yán)重心律失常等[3]。除了及時(shí)氣管插管維持患者呼吸，糾正心律失常等對癥措施外，不同的洗胃方法可能有搶救成功率的差異，本課題采用動物實(shí)驗(yàn)，模擬重度沙蠶毒素類殺蟲劑中毒的洗胃治療，采用不同的洗胃方法，對比小鼠的生存時(shí)間差異，篩選出更好的洗胃液種類。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)對象

實(shí)驗(yàn)用小鼠體重15～20 g，由廣西醫(yī)科大學(xué)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心提供，實(shí)驗(yàn)小鼠的飼養(yǎng)、觀察、胃管注入均由中心協(xié)助完成。

1.2 實(shí)驗(yàn)材料

沙蠶毒素類殺蟲劑90%殺蟲單可濕性粉劑，安徽華星廠出產(chǎn)，規(guī)格為每袋30 g，南寧市科園大道農(nóng)業(yè)科技市場售，產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)證GB 28153-2011，生產(chǎn)許可XK 13-000-00126，農(nóng)藥登記PD 20040816;0.9%生理鹽水、2%碳酸氫鈉鹽水、注射用水均為廣西醫(yī)科大學(xué)第三附屬醫(yī)院急診科備用藥品;食用菜籽油自備。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

第一步，參照雌小鼠急性經(jīng)口LD50：86 mg/kg，雄小鼠急性經(jīng)口LD50：83 mg/kg，用注射用水稀釋沙蠶毒素類殺蟲劑殺蟲單配成100 mg/ml濃度，將預(yù)實(shí)驗(yàn)小鼠按1 g體重胃管注入

0.1 ml，發(fā)現(xiàn)該農(nóng)藥對小鼠的最低全數(shù)致死劑量470 mg/kg。第二步，按最低全數(shù)致死劑量，均按1 ml含有4.70 mg沙蠶毒素類殺蟲劑殺蟲單加入三組洗胃液（生理鹽水組、碳酸氫鈉液組、食用菜籽油組）中，組成洗胃液+農(nóng)藥混合液。第三步，每組小鼠30只（雌15只，雄15只）按0.1 ml/g注入混合液。第四步，觀察三組小鼠灌胃后死亡時(shí)間，觀察小鼠中毒后的表現(xiàn)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料以（x±s）表示，采用t或F檢驗(yàn)，Kaplan-Meier法對小鼠的生存資料進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，并繪制生存函數(shù)圖。計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，采用字2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同組別洗胃液灌胃后小鼠的生存狀態(tài)觀察

3組小鼠均觀察到中毒表現(xiàn)：神志方面出現(xiàn)躁動、震顫、肌肉抽搐，繼而活動減少，呼吸方面出現(xiàn)呼吸急促、發(fā)紺，96.7%（87/90）小鼠實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)死亡，僅有3.3%（3/90）小鼠在實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)尚未死亡（生理鹽水組1例，食用菜籽油2例），做刪失處理。

2.2 不同洗胃混合液的實(shí)驗(yàn)效果比較

經(jīng)方差分析發(fā)現(xiàn)，不同洗胃方法小鼠生存時(shí)間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=254.509，P<0.001）。三組不同洗胃混合液的生存時(shí)間兩兩比較分析發(fā)現(xiàn)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.001），碳酸氫鈉組生存時(shí)間最短，為（10.20±4.358）h，食用菜籽油組生存時(shí)間最長，為（36.87±5.794）h，生理鹽水組的生存時(shí)間介入以上兩組之間，為（24.37±2.977）h，見表1。

2.3 不同洗胃方法的小鼠生存曲線圖

碳酸氫鈉組下降最快，而食用菜籽油組下降速度最慢，生理鹽水組居中，見圖1。推測使用食用菜籽油洗胃或?qū)a，對沙蠶毒素類殺蟲劑殺蟲單中毒搶救效果可能更好，延長生存時(shí)間，得到更多機(jī)會救治。

3 討論

3.1 中毒機(jī)制

本實(shí)驗(yàn)用的沙蠶毒素類殺蟲劑（殺蟲單）的中毒機(jī)理分析如下，臨床上見到的沙蠶毒素類中毒患者，絕大部分為經(jīng)口途徑的誤服所導(dǎo)致，此類殺蟲劑毒物在水中很容易溶解，而當(dāng)它遇到強(qiáng)酸或者強(qiáng)堿，能迅速水解轉(zhuǎn)化為沙蠶毒素，所以，胃部成了最主要的轉(zhuǎn)化部位，由此進(jìn)入體循環(huán)，血腦屏障并不能有效屏蔽沙蠶毒素，對中樞系統(tǒng)有直接的毒害作用，沙蠶毒素為一種較弱的膽堿酯酶的抑制劑，競爭性阻斷了神經(jīng)節(jié)的膽堿能突觸間神經(jīng)傳遞，大劑量的沙蠶毒素如果直接作用到中樞神經(jīng)，即可造成呼吸肌麻痹或嚴(yán)重心律失常[4]。另外，沙蠶毒素可以通過硫醇基團(tuán)與受體的巰基形成二硫鍵來競爭受體，通過二硫鍵形式，影響了體內(nèi)許多的巰基酶，這些被影響的巰基酶常常具有重要功能，例如，在線粒體中，呼吸鏈復(fù)合體的酶蛋白部分，就是巰基酶，因此沙蠶毒素中毒引起呼吸困難癥狀，根本原因?yàn)榫€粒體呼吸鏈復(fù)合體的酶蛋白活力受到毒物的抑制所致[4]。沙蠶毒素經(jīng)過體循環(huán)最后才經(jīng)尿液排出體外。因?yàn)槲覆渴嵌疚镛D(zhuǎn)化的主要部位，所以篩選出最適宜的洗胃方法，能提高此類中毒患者的成功率，也是本研究課題設(shè)計(jì)的主要背景[5]。

3.2 中毒表現(xiàn)

本實(shí)驗(yàn)因灌胃致死劑量的沙蠶毒素類殺蟲劑，故觀察到的小鼠均為重度沙蠶毒素中毒。但在人體由于沙蠶毒素在體內(nèi)的代謝途徑，包括吸收、轉(zhuǎn)化及排泄均較快，所以其中毒表現(xiàn)為有可逆性，持續(xù)時(shí)間短，并且逐漸減輕，病程短[6]。但是，部分重度中毒患者仍導(dǎo)致呼吸衰竭，正因?yàn)椴〕潭?，所以相對而言進(jìn)展迅速，在發(fā)生呼吸衰竭前，臨床觀察常常為無特異性中毒癥狀，對沙蠶毒素中毒的程度極易造成醫(yī)生評估不足，而延誤了搶救的時(shí)機(jī)。嚴(yán)重中毒者，首先表現(xiàn)為意識改變、煩躁、抽搐，甚至昏迷。其次，呼吸肌麻痹可導(dǎo)致迅速呼吸衰竭。最后，有研究發(fā)現(xiàn)沙蠶毒素進(jìn)入體循環(huán)后的放射性分布情況，按分布濃度由高到低排序依次為：腎、肝、脾、肺、心、腦、紅細(xì)胞。所以大量中毒可致心、肝、腎等多器官功能臟器衰竭。實(shí)驗(yàn)室表現(xiàn)，可發(fā)現(xiàn)全血膽堿酯酶大多有輕度的下降，而極個(gè)別患者才會有膽堿酯酶明顯降低的情況出現(xiàn)。從上述表現(xiàn)，我們可以看出，針對此類中毒患者，早期發(fā)現(xiàn)，診斷，早期綜合治療占有十分重要的地位，而洗胃是早期綜合治療中重要的一環(huán)，效果好壞直接影響患者的預(yù)后，因此，篩選出最適宜的洗胃方法，具有重要意義[7]。

3.3 中毒后的洗胃治療

中毒患者均強(qiáng)調(diào)綜合治療[8]，包括沙蠶毒素中毒，其他治療方法在本研究中暫不做討論，本研究專注于不同洗胃方法的效果對比。曾有類似研究表明，洗胃首選堿性液，用2%碳酸氫鈉液，原理是堿性液體促使毒物分解，而導(dǎo)瀉液體則可用油類的瀉劑，比如，家用的蓖麻油等[9]。但在本研究中碳酸氫鈉組小鼠生存時(shí)間最短，分析原因?yàn)椋辔盖霸谛∈篌w外，已經(jīng)先用2%碳酸氫鈉混合了殺蟲單制作成混合液（1 ml含有4.70 mg沙蠶毒素類殺蟲劑殺蟲單），而當(dāng)殺蟲單遇到酸或堿，能迅速水解轉(zhuǎn)化為沙蠶毒素，再灌胃，就迅速進(jìn)入體循環(huán)，從而加速了中毒的過程，導(dǎo)致中毒后的死亡時(shí)間明顯縮短[10]。但事實(shí)上，與臨床搶救的實(shí)際情況（誤服的殺蟲單與胃液混合，送到醫(yī)院，醫(yī)生搶救時(shí)再灌注2%碳酸氫鈉洗胃），先后順序不同，需要進(jìn)一步深入研究，此種不同帶來的差異性影響[11]。在本實(shí)驗(yàn)中，觀察到食用菜籽油組較為穩(wěn)定，生存時(shí)間較長的原因分析為，油類含水分相對減少，而殺蟲單在水中很容易溶解，油類的洗胃液大大影響了毒物的溶解到水中的過程，從而延緩了沙蠶毒素的生成，而且油類導(dǎo)瀉作用較強(qiáng)，更進(jìn)一步加速了毒物的排出[12]。

綜上所述，食物菜籽油組生存時(shí)間長的原因?yàn)?，減少沙蠶毒素的生成，并通過導(dǎo)瀉加速排泄，為搶救患者贏得了寶貴的時(shí)間，油類洗胃方法可能是提高此類中毒患者搶救成功率的重要措施之一。

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