Ki-67在基底細胞樣型三陰乳腺癌中的表達及意義

程新宇 周成美 王露雪 王翠芳

(1沈陽醫學院附屬中心醫院病理科，遼寧 沈陽 110024；2錦州醫科大學)

三陰乳腺癌(TNBC)是一種特殊的乳腺癌，組織學分級惡性程度高，內分泌和靶向治療效果不明顯〔1〕，5年生存率低。隨著分子生物學技術飛速發展，乳腺癌基因表達譜提出了基底細胞樣型乳腺癌的概念，多數學者認為其屬于三陰性〔即雌激素受體(ER)、孕激素受體(PR)和人表皮生長因子受體(HER)2均陰性〕并表達基底細胞免疫表型細胞角蛋白(CK)5/6和表皮生長因子受體(EGFR)等標志物〔2〕。Ki-67是細胞增殖特異相關核抗原，臨床上常用作判斷腫瘤惡性程度及預后。本文研究基底或非基底細胞樣型TNBC中Ki-67的表達及意義。

1 材料與方法

1.1臨床資料 收集2015年1月至2017年12月沈陽醫學院附屬中心醫院病理科診斷為TNBC的病例42例，其中基底細胞樣型TNBC 24例為試驗組，非基底細胞樣型TNBC 18例為對照組。年齡30～78歲，中位年齡63歲；組織學分級：Ⅰ級1例，Ⅱ級19例，Ⅲ級22例；有淋巴結轉移16例，無淋巴結轉移26例。患者取樣本前均未行放化療。

1.2試劑 即用型鼠抗人單克隆抗體Ki-67，檸檬酸緩沖液pH6.0，鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶鏈接法(SP)檢測試劑盒及二氨基聯苯胺(DAB)均購自福州邁新生物技術有限公司。

1.3方法 所有標本用10%中性甲醛固定，常規石蠟包埋，4 μm連續切片，常規石蠟脫水，檸檬酸緩沖液pH6.0，抗原高壓修復后,采用免疫組織化學SP法操作，DAB顯色。選取臨床病理工作中已知陽性組織片作陽性對照，磷酸鹽緩沖液(PBS)(pH7.2)代替一抗作為陰性對照。

1.4結果判定 免疫組化片均由兩位經驗豐富的病理科醫師采用雙盲法單獨判讀。Ki-67陽性判斷標準：陽性表達定位于腫瘤細胞核，高倍鏡下任意計數5個視野，每次選取200個細胞進行觀察，按陽性細胞所占比例的平均值定義Ki-67陽性指數，≤10%為陰性(-)，10%～29%為低表達(+)，30%～49%為中表達()，≥50%為強陽性表達()〔3〕。為統計學方便，-～+為陰性，～為陽性。

1.5統計學處理 應用SPSS17.0軟件行χ2檢驗。

2 結 果

2.1兩組臨床病理特征比較 兩組組織學分級比較有統計學差異(P<0.01)，其余臨床特征比較無顯著差異(P>0.05)。見表1。

表1 基底細胞樣型TNBC與臨床病理特征的相關性(n)

2.2形態學特征 基底細胞樣型TNBC多由實性巢狀、片狀的癌細胞組成，腫瘤呈推進性生長；腫瘤周邊有不同程度淋巴細胞浸潤；伴有大片不規則壞死；核/質比高，核呈卵圓形，核分裂多見。見圖1。

圖1 TNBC形態學特征(×100)

2.3Ki-67在兩組中的表達 實驗組Ki-67陽性表達率為95.8%(23/24)，明顯高于對照組的50.0%(9/18，χ2=11.911,P=0.001)。

3 討 論

乳腺癌是高度異質性的惡性腫瘤。基底細胞樣型是乳腺癌的一種特殊亞型，Banerjee等〔4〕研究顯示其ER、PR、HER2表達陰性，屬TNBC范疇。雖然二者組織形態、免疫表型及預后有諸多相似，但基底細胞樣型是一種同質性腫瘤，并在三陰基礎上表達CK5/6或EGFR〔2〕。TNBC 臨床表現為發病年齡小，侵襲力強，無有效治療藥物導致預后較差。本研究結果說明基底細胞樣型較非基底細胞樣型惡性程度高，預后差；且基底細胞樣型較非基底細胞樣型患者發病年齡早，腫瘤體積大，惡性程度高，易發生遠端轉移。Ki-67單克隆抗體在1983年由Gerdes等〔5〕發現，可特異性識別增殖細胞核抗原，是評價惡性腫瘤細胞增殖程度最可靠的指標。有文獻報道〔6〕，Ki-67的表達陽性率與TNBC組織學分級相關，Ki-67高表達>35%能增加患者死亡風險，與本研究結果相似。本研究結果提示Ki-67可能參與乳腺癌發生發展，在基底細胞樣型TNBC中增殖活性強，組織學分級高，細胞增生活躍，預后差；Ki-67高表達可能是一個不良的預后因素。