高速離心消除脂血對(duì)肝功能項(xiàng)目檢測(cè)干擾的分析

解春寶，羅江蓉，向娜娜，傳良敏△

(1.四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院·四川省人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，四川成都 610072；2.四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院·四川省人民醫(yī)院運(yùn)營(yíng)部，四川成都，610072；3.川北醫(yī)學(xué)院，四川南充 637000)

目前用超速離心法將脂蛋白分為乳糜微粒(CM)、極低密度脂蛋白(VLDL)、低密度脂蛋白(LDL)、中間密度脂蛋白(IDL)、高密度脂蛋白(HDL)。CM主要在小腸黏膜中合成，顆粒最大，三酰甘油水平約為90%～95%，VLDL顆粒直徑次之，三酰甘油水平約為50%～65%，隨著血清中CM及VLDL水平升高，血清逐漸渾濁甚至呈奶油樣外觀。生化肝功能項(xiàng)目是評(píng)價(jià)肝臟功能的重要指標(biāo)，提示臨床及指導(dǎo)臨床用藥。但在實(shí)際檢驗(yàn)工作中，易發(fā)現(xiàn)脂血標(biāo)本，尤其是高CM標(biāo)本，其中含大量三酰甘油，檢測(cè)時(shí)大量的CM對(duì)生化結(jié)果產(chǎn)生影響。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道高速離心能消除脂血對(duì)生化檢測(cè)項(xiàng)目的干擾[1]。現(xiàn)采用高速離心法處理樣本后對(duì)比離心前后數(shù)據(jù)，分析高速離心是否能消除脂血對(duì)生化肝功能項(xiàng)目[總蛋白(TP)、清蛋白(ALB)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、堿性磷酸酶(ALP)、γ-谷氨酰基轉(zhuǎn)肽酶(GGT)、總膽汁酸(TBA)、總膽紅素(TBIL)、直接膽紅素(DBIL)]檢測(cè)的影響。

1 材料與方法

1.1材料

1.1.1樣本 收集50例臨床脂血標(biāo)本，標(biāo)本管為紅色真空采血管(不含抗凝劑)，血清標(biāo)本外觀為奶白色。

1.1.2檢測(cè)項(xiàng)目 TP、ALB、AST、ALT、ALP、GGT、TBA、TBIL、DBIL共9項(xiàng)指標(biāo)。

1.1.3儀器與試劑 儀器：HITACHI LABOSPECT 008全自動(dòng)生化分析儀；中科中佳HC-2514高速離心機(jī)。試劑：TP：四川邁克(批號(hào)：507244)；ALB：四川邁克(批號(hào)：507236)；AST：四川邁克(批號(hào)：508271)；ALT：四川邁克(批號(hào)：510347)；ALP：四川邁克(批號(hào)：150817)；GGT(批號(hào)：160111)；TBA：四川邁克(批號(hào)：151124)；TBIL：四川邁克(批號(hào)：510332)；DBIL：四川邁克(批號(hào)：508268)。

1.1.4質(zhì)控品和校準(zhǔn)品 質(zhì)控品購(gòu)自美國(guó)伯樂(lè)，校準(zhǔn)品購(gòu)自四川邁克。

1.2方法

1.2.1質(zhì)量控制 檢測(cè)標(biāo)本前檢測(cè)液體質(zhì)控血清，當(dāng)質(zhì)控結(jié)果在控后開(kāi)始樣本分析。

1.2.2樣本檢測(cè) 將50例樣本經(jīng)3 000 r/min離心5 min，在生化分析儀上檢測(cè)以下項(xiàng)目：TP、ALB、AST、ALT、ALP、GGT、TBA、TBIL、DBIL。再將標(biāo)本經(jīng)18 000 r/min離心10 min處理，此時(shí)上層為懸浮脂質(zhì)，下層為清亮血清，棄去上層用吸管取下層清亮血清在生化分析儀上檢測(cè)。

2 結(jié) 果

高速離心組與常規(guī)離心組結(jié)果比較：ALP、GGT、TBIL 3項(xiàng)在高速離心后水平均升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。TP、ALB、AST、ALT、TBA、DBIL六項(xiàng)指標(biāo)在高速離心前后水平無(wú)明顯變化，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.01)，見(jiàn)表1。

表1 高速離心前后生化結(jié)果比較

3 討 論

全自動(dòng)生化分析儀目前多采用雙試劑、雙波長(zhǎng)技術(shù)，結(jié)合凹面光柵進(jìn)行后分光，分光后的波長(zhǎng)由8～16個(gè)固定檢測(cè)器同時(shí)接收，對(duì)其中兩個(gè)波長(zhǎng)的信息用兩具前置放大器放大并進(jìn)行對(duì)數(shù)放大，求出其吸光度。當(dāng)標(biāo)本中三酰甘油水平過(guò)高，外觀表現(xiàn)為奶白色，其中大量的CM對(duì)入射光產(chǎn)生散射，對(duì)結(jié)果產(chǎn)生影響[2-3]，甚至出現(xiàn)負(fù)值。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道為消除脂血對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響臨床可采用的方法有以下幾種：生理鹽水稀釋法、乙醚抽提法、沉淀分離法、干化學(xué)法和高速離心法[1,4]。較常用的有高速離心法、生理鹽水稀釋法和乙醚抽提法[5-7]。這3種方法各自有其優(yōu)缺點(diǎn)：乙醚抽提法效率高，但其本身對(duì)某些生化項(xiàng)目有不確定影響，影響生化結(jié)果的準(zhǔn)確性，而且乙醚為有機(jī)化學(xué)溶劑，對(duì)于長(zhǎng)期在實(shí)驗(yàn)室工作的人員健康不利；生理鹽水稀釋法簡(jiǎn)單快捷，但隨著稀釋次數(shù)增加，檢測(cè)誤差也隨之增加；高速離心法可行性強(qiáng)，方法簡(jiǎn)單易行，易于標(biāo)準(zhǔn)化。有研究報(bào)道高速離心方法本身對(duì)大部分生化項(xiàng)目無(wú)影響，但對(duì)一部分項(xiàng)目如肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脫氫酶(LDH)、α-羥基丁酸脫氫酶(HBDH)、肌酐(CRE)、尿酸(UA)、TP有差異，呈直線相關(guān)關(guān)系[8]。另外有研究發(fā)現(xiàn)高速離心法對(duì)血脂正常、外觀清亮的臨床標(biāo)本及輕中度脂血標(biāo)本無(wú)明顯意義，而對(duì)重度脂血標(biāo)本某些生化項(xiàng)目有意義[9]。本實(shí)驗(yàn)針對(duì)TP、ALB、AST、ALT、ALP、GGT、TBA、TBIL、DBIL等9項(xiàng)生化項(xiàng)目采用高速離心法進(jìn)行，分析高速離心是否能消除脂血對(duì)生化肝功能項(xiàng)目檢測(cè)的影響。

本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)經(jīng)高速離心與常規(guī)離心檢測(cè)結(jié)果比較TBIL、GGT、ALP 3項(xiàng)水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，而TP、ALB、AST、ALT、TBA、DBIL 6項(xiàng)水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.01)，同時(shí)提示高速離心降低脂血標(biāo)本中CM干擾后，對(duì)部分生化肝功能檢測(cè)結(jié)果有意義。謝艷艷等[10]研究發(fā)現(xiàn)高速離心與常規(guī)離心比較大部分生化項(xiàng)目測(cè)定結(jié)果差異不明顯，部分生化結(jié)果CK-MB、DBIL、HBDH、LDH、CREA、UA、GLU有差異，呈直線相關(guān)。本文研究結(jié)果與文獻(xiàn)[11-13]報(bào)道不完全一致，可能原因如下：(1)標(biāo)本量及標(biāo)本所含三酰甘油不一樣，本實(shí)驗(yàn)選取50例脂血標(biāo)本(外觀奶白色)，標(biāo)本量及脂血水平不一致可能是導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果不一致的原因；(2)實(shí)驗(yàn)所用儀器、試劑及條件不一致；(3)脂血標(biāo)本高速離心心后處理程序并沒(méi)有標(biāo)準(zhǔn)化，本實(shí)驗(yàn)離心后采用吸管吸取下層清亮血清，與其他研究人員方法有一定的差異。

4 結(jié) 論

本研究提示高速離心可以消除脂血對(duì)部分肝功能檢測(cè)項(xiàng)目的影響，但是很有必要建立標(biāo)準(zhǔn)操作程序。