傣藥黑螞蟻揮發油和脂溶性成分研究

羅建蓉 劉姍 尚文宏

【摘要】目的：研究傣藥黑螞蟻（學名雙齒多刺蟻）揮發油和脂溶性成分，為科學利用黑螞蟻資源提供實驗依據。方法：采用回流提取并用石油醚萃取得脂溶性成分，水蒸氣蒸餾法提取揮發油;運用氣相色譜-質譜聯用技術分析其化學成分。結果：從黑螞蟻脂溶性成分中鑒定39個成分，其中油酸（25.1%）和6-十八碳烯酸（17.93%）相對含量居高;從揮發油中鑒定41個化合物，以油酸（6.15%）和二十五烷（5.85%）較多。結論：油酸、棕櫚酸、棕櫚油酸、硬脂酸、膽甾醇和3，5-膽甾二烯為黑螞蟻油脂的特征性成分;黑螞蟻的脂溶性成分以脂肪酸類為主，而揮發油則以烴類物質為主。

【關鍵詞】傣藥;雙齒多刺蟻;脂溶性成分;揮發油;氣相色譜-質譜聯用

【中圖分類號】R284.1【文獻標志碼】A【文章編號】1007-8517（2019）1-0050-04

Abstract：ObjectiveToanalyzechemicalingredientsoffat-solublecompositionandvolatileoilfromDaimedicineofHeiMaYi（scientificname：Polyrhachisdives），inordertoprovideexperimentalbasisforreasonableutilizationofanimalmedicineofPolyrhachisdives.MethodEthanolrefluxextractionmethodwasusedtoextractmedicinalmaterialsofPolyrhachisdives，andpetroleumetherwasusedtoextractfat-solublecomponents.ThevolatileoilofPolyrhachisdiveswasextractedbysteamdistillation.ItsoilcomponentswereanalyzedbyGC-MStechnique.ResultThirty-ninecompoundswereidentifiedintheoilofPolyrhachisdives.Thecompoundswithhighercontentlevelincludedoleicacid（25.1%）and6-octadecenoicacid（17.93%）.Forty-onecompoundswereidentifiedinthevolatileoil.Thecompoundswithhighercontentlevelincludedoleicacid（6.15%）andpentacosane（5.85%）.Conclusionoleicacid，palmiticacid，palmitoleicacid，stearicacid，cholesterolandcholesta-3，5-dienewerecharacteristicconstituentsintheoilofPolyrhachisdives.FattyacidswerethemaincompoundsintheoilsofPolyrhachisdives，andhydrocarboncompoundswerethemaincompoundsinthevolatileoils.

Keywords：DaiMedicine;Polyrhachisdives;Fat-solubleComposition;VolatileOil;GC-MS

傣藥黑螞蟻屬昆蟲綱膜翅目蟻科昆蟲雙齒多刺蟻（PolyrhachisdivesSmith），又稱擬黑多刺蟻、鼎突多刺蟻，主要產自云南、廣西、廣東等省，在我國為食藥兩用昆蟲。《本草綱目》記載螞蟻為“玄駒”，并有“獨腳蟻治療腫疽毒，搗涂之”。傣藥稱之為“摸郎”，有扶正固本、補腎壯陽、祛瘀通絡之功效[1]。因富含氨基酸，鋅、鈣、鎂、鐵、錳等多種微量元素，D、B2、B12、C、E等多種維生素，及大量的糖類物質和高能物質三磷酸腺苷，民間常將黑蟻制成蟻粉或蟻酒服用，以健身防病[2-3]。現代研究發現黑蟻的醇提物有抗風濕、抗炎、抗抑郁、增強性功能、調節人體免疫功能、調節血糖和血脂、抗衰老和護肝等藥理作用[3-5]。臨床上以黑蟻為主藥，治療風濕、類風濕關節炎、糖尿病、肝炎、失眠、陽痿等疾病[2-3]。筆者在前人研究基礎上，采用GC-MS法研究分析黑蟻的物質基礎，探討黑蟻脂溶性成分及揮發油的成分和組成，為科學合理利用傣藥黑蟻提供實驗依據。

1材料

黑螞蟻購自大理金貝藥材市場，經大理大學楊自忠教授鑒定為昆蟲綱膜翅目蟻科雙齒多刺蟻（PolyrhachisdivesSmith）。HP7890A/5975C型GC-MS聯用儀（Agilent公司）。試劑均為國產AR。

2方法與結果

2.1揮發油的制備稱取100g黑螞蟻粉末（過2號篩）于圓底燒瓶中，加蒸餾水500mL，參照《中國藥典》（2015年版/四部）“通則2204”揮發油測定法甲法提取[6]，至揮發油體積不再增加，冷卻分層后分離揮發油，并用無水Na2SO4干燥[7]，得淺黃色油狀物，冷藏備用。

2.2脂溶性成分的制備稱取黑螞蟻粉末20g，用95%乙醇索式提取1h，將提取液減壓濃縮至小體積，用石油醚萃取3次，萃取液濃縮干，得淺黃色油狀提取物，冷藏備用。

2.3脂溶性成分GC-MS分析條件氣相色譜條件：HP-5MS石英毛細管柱（30m×250μm×0.25μm），高純氦為載氣，1mL/min恒流，分流比10∶1，進樣量1μL，進樣口溫度250℃;柱升溫程序為起始80℃，按10℃/min升溫至190℃，再以5℃·min-1升溫至290℃，保留6min。質譜條件：EI離子源，離子源溫度230℃，電子能量70eV，溶劑延遲3min，質量掃描范圍m/z12～550。

2.4揮發油GC-MS分析條件氣相色譜條件：同2.3項下;柱升溫程序為起始120℃，按10℃/min升溫至200℃，再以5℃/min升溫至220℃，保留5min，后以2.5℃/min升溫至290℃，保留10min。質譜條件：同2.3項下。

2.5黑螞蟻脂溶性成分和揮發油分析結果黑螞蟻脂溶性成分和揮發油分別按上述檢測條件進行GC-MS分析，得總離子流圖，如圖1所示。經NIST11.L質譜庫檢索，取相似度90%以上成分，采用面積歸一化法計算相對含量。從黑螞蟻脂溶性成分中分離出51個色譜峰，檢測鑒定出39個化合物，相對含量占總量85.16%，結果見表1;從揮發油中分離出59個色譜峰，并鑒定出41個化合物，占總量61.11%。結果見表2。

3討論

研究從黑螞蟻脂溶性成分中鑒定39個化合物，相對含量占總量85.16%，主要成分類型有脂肪酸，烷烴，甾類和脂肪醇。不飽和脂肪酸含量最高，占47.03%，僅油酸和6-十八碳烯酸各占25.1%，17.93%;烷烴檢出數目最多，有12個，占15.42%，其中二十七烷（2.51%），9-甲基十九烷（3.67%），三十一烷（3.44%）含量較高;另外檢出膽固醇（3.72%），膽甾-3，5-二烯（0.15%），膽甾-4-烯-3-酮（0.26%）和β-谷甾醇（0.36%）4個甾類成分;還檢出少量鹵代烴1-氯二十烷（0.86%）和1-氯二十七烷（1.61%）。從揮發油中鑒定41個成分，相對含量占總量61.11%，主要成分類型為烷烴，烯烴，脂肪醇和鹵代烴。共檢出烷烴19個，其數目和含量均最高，占38.3%，其中十七烷（3.67%），二十五烷（5.85%），二十六烷（5.05%），二十三烷（3.8%），二十八烷（3.03%）二十四烷（4.93%），二十九烷（2.62%）含量較高;檢出10個烯烴，占4.35%;另外檢出油酸（6.15%），2個鹵代烴成分1-碘代十八烷（4.93%）和1-氯二十七烷（1.73%）。本研究首次從黑蟻中發現膽甾-4-烯-3-酮、1-氯二十烷、1-氯二十七烷、1-碘代十八烷及多個烴類成分。

脂溶性成分和揮發油中檢出18個共有成分，主要為烷烴，脂肪醇，脂肪酸及其酯，其中烷烴數目較多有10個，但含量差異大;均檢出棕櫚酸甲酯、棕櫚酸和油酸，以棕櫚酸和油酸在脂溶性成分中含量較高;均檢出1-氯二十七烷，其含量相當。黑蟻的脂溶性成分以脂肪酸類為主，并發現4個甾體類成分;而揮發油則以烴類物質為主。油酸（OA）和棕櫚酸（PA）是最常見的膳食脂肪酸。OA刺激肝癌HepG2細胞可引起自噬并促進凋亡[8];PA則刺激引起自噬抗凋亡，提示這兩種膳食脂肪酸引起的自噬所發揮的生物學作用可能不同[9]。烴類化學成分是昆蟲信息素的活性成分，對昆蟲的行為活動起作用[10-11]。

多位學者對黑蟻化學成分進行了研究報道。沈立榮等[12]采用超臨界CO2萃取蟻油經GC-MS分析出24個化合物，包含脂肪酸、烴類、甾體、硫醇等類型，主要成分為9-十八碳烯酸、油酸、亞油酸及其酯、膽甾醇和3，5-膽甾二烯等物質;韋桂寧等[13]從黑蟻石油醚部位甲酯化產物中鑒定出13個脂肪酸，其中棕櫚酸和油酸含量較高;鄭巍等[14]用系統分離方法從黑蟻氯仿部位分離到7個化合物;王婧等[15]發現黑蟻的水提液風味物質主要為胺類、雜環、醇、醛、酮等大極性物質。本研究的黑蟻脂溶性成分與文獻[12]均檢出油酸、棕櫚酸、9-甲基十九烷、二十二碳烯、膽甾醇和3，5-膽甾二烯;與文獻[13]有6個相同成分，為月桂酸、肉豆蔻酸、棕櫚酸、棕櫚油酸、硬脂酸和油酸，其含量均為油酸較高;與文獻[14]有棕櫚酸、硬脂酸、油酸和β-谷甾醇4個共有成分。可見油酸、棕櫚酸、棕櫚油酸、硬脂酸、膽甾醇和3，5-膽甾二烯等為黑蟻藥材中穩定存在的特征性成分。

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（收稿日期：2018-11-02編輯：陶希睿）