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士酒緩解體力疲勞功能的研究

2019-06-26 03:53:16鞠鳳霞
人參研究 2019年3期
關鍵詞:小鼠劑量

鞠鳳霞

(吉林工商學院糧食學院·吉林長春·130507)

保健酒已有數千年的歷史,是中國醫藥科學的重要組成部分。中國的歷代醫藥著作中幾乎無一例外地有藥酒治疾健身的記載。保健酒作為一種傳統的保健食品劑型,溫而味辛,因其能養生健體且滿足口感嗜好而廣受歡迎[1]。本士酒選用人參、鹿茸、麥冬、肉桂、枸杞子等為主要原料,以白酒為基礎酒,在常溫下通過浸泡、攪拌、過濾、調配等工藝制成,其成品酒精度為35%vol。其中,人參主產地為我國東北地區,是現階段我國最為珍貴的藥材之一,有“補五臟、安精神、定魂魄、止驚悸、除邪氣、明目開心益智”的功效,現代藥理研究表明,人參內含人參皂甙,它對調節人的中樞神經系統、強心、抗疲勞、調節物質代謝等有明顯功效[2~4];鹿茸用于醫療保健的歷史悠久,應用廣泛。鹿茸對生殖系統、免疫系統、抗疲勞、抗腫瘤、神經系統、骨質疏松癥等都有一定的作用[5]。麥冬具有潤肺清心、養陰生津功效。現代藥理研究表明,麥冬具有增強免疫、抗疲勞、降血糖、抗衰老等方面的藥理作用[6]。肉桂味甘幸、性大熱。能引火歸源、溫腎助陽、溫中補陽、散寒止痛[7];枸杞的生物活性成分——枸杞多糖具有調節免疫力、清除自由基、抑制腫瘤、降血脂、降血糖、降血壓及抗疲勞等作用[8]。配方中人參、鹿茸、麥冬為可用于保健食品的原料,肉桂、枸杞為藥食兩用原料,配伍安全。通過動物實驗驗證該士酒的緩解體力疲勞功能。

1 材料與方法

1.1 材料、試劑及儀器

受試物:某公司提供中試產品,受試物為20.83倍濃縮液,折成人體日服用量為:4.80mL/人/日(體重60kg計)。

動物:選用上海西普爾-必凱實驗動物有限公司繁殖的SPF級CI/F1代健康雄性小鼠200只,生產許可證號SCXK (滬)2013-0016,合格證編號:2008001670384。實驗動物在溫度為20~26℃、相對濕度為40%~70%的南京醫科大學衛生分析檢測中心屏障環境中飼養。實驗動物使用許可證號:SYXK(蘇)2015-0009。輻照滅菌飼料由江蘇省協同醫藥生物工程有限責任公司提供,生產許可證:蘇飼證(2014)01008。

儀器與試劑:T-1000型電子天平、JA-2003型電子天平、JJ-100型電子天平、離心機、水浴鍋、多功能酶標儀、SBA-40E生物傳感分析儀、游泳箱 (大小約50cm×50cm×40cm)、鉛絲、計時器。血漿尿素測定試劑盒、肝糖原測定試劑盒,均由南京建成生物工程研究所提供。

1.2 劑量選擇與受試物給予方式

受試物為士酒20.83倍濃縮液,該受試樣品的人體推薦量為4.80mL/人/日(體重60kg計)。設0.40mL/kg·bw/d、0.80mL/kg·bw/d、2.40mL/kg·bw/d 三個劑量組 (分別相當于受試樣品人體推薦攝入量的5倍、10倍、30 倍),另設一個酒基對照組(0mL/kg·bw/d)和一個空白對照組(0mL/kg·bw/d)。酒基對照組以15%的酒基代替受試物,空白對照組以無菌水代替受試物。廠家提供95%(v/v)的酒基進行各劑量組受試物的配制,調整各劑量組的乙醇濃度為15%。低、中、高劑量配制濃度分別為4.0%、8.0%、24.0%。經口每日一次給予小鼠相應劑量的受試物,小鼠灌胃量為0.1mL/10g·bw。連續灌胃一個月后測定各項指標。

1.3 實驗方法

1.3.1 負重游泳實驗

末次給小鼠受試物30min后,置于游泳箱中游泳,水深約35cm,水溫25℃±1℃,鼠尾根部負荷5%體重的鉛絲。記錄小鼠自游泳開始至死亡的時間,作為小鼠負重游泳時間。

1.3.2 血漿尿素測定

末次給小鼠受試物30min后,在溫度為30℃的水中不負重游泳90min,休息60min后立即眼眶采血。血液離心后,吸取20μL血漿,用二乙酰—肟法測定血漿尿素值。

1.3.3 肝糖原測定

末次給小鼠受試物30min后,立即處死,取肝臟經生理鹽水漂洗后用濾紙吸干,精確稱取肝臟75mg,加入堿溶液0.225mL,煮沸20min,配制成1%肝勻漿液,取1%肝勻漿液0.1mL,加2mL蒽酮試劑,煮沸5min,冷卻后在620nm波長比色測定,根據所稱取的肝臟重量計算肝糖原含量。

1.3.4 血乳酸測定

末次給小鼠受試物30min后眼眶采血。然后不負重在溫度為30℃的水中游泳10min后停止,立即眼眶采血,休息20min后再眼眶采血測定小鼠血乳酸含量。SBA-40E生物傳感分析儀測定乳酸方法:取血20μL加入40μL破膜液中,立即充分振蕩破碎細胞。直接從乳酸儀上讀數。實際值(mmoL/L)=測得值×3 1.4實驗數據統計:用SPSS10.0軟件對各實驗原始數據進行方差齊性檢驗,滿足方差齊要求的數據資料用單因素方差分析方法中多個實驗組與一個對照組間均數的兩兩比較方法進行統計處理;對非正態分布或方差不齊的數據資料進行適當的變量轉換,待滿足正態或方差齊要求后,用轉換所得的數據進行統計處理。對非正態分布的數據用秩和檢驗進行統計處理。 兩組間的比較用t檢驗。

2 結果與分析

2.1 士酒對小鼠體重的影響

由表1可見,基酒對照組、各劑量組小鼠的初始體重與空白對照組比較無統計學意義,表明各組動物的初始體重是均衡的。

基酒對照組小鼠的中期體重、結束體重與空白對照組比較無統計學意義,3個劑量組小鼠的中期體重、結束體重與基酒對照組比較均無統計學意義

表1 士酒對小鼠體重的影響(±s)

表1 士酒對小鼠體重的影響(±s)

劑量(mL/kg·bw/d)動物數(只)Ⅰ組初始體重(g) P Ⅰ組終末體重(g)增長值(g) P 0(空白對照) 10 20.65±1.12 0.918 26.91±0.87 6.26±1.56 0.883 0(酒基對照) 10 20.60±1.02 26.75±1.37 6.15±1.72 0.40 10 20.63±0.94 1.000 26.51±0.93 5.88±1.36 0.938 0.80 10 20.66±0.85 0.998 27.44±0.86 6.78±0.92 0.574 2.40 10 20.66±0.78 0.998 27.56±0.89 6.90±1.07 0.440

續表1 士酒對小鼠體重的影響(±s)

續表1 士酒對小鼠體重的影響(±s)

劑量(mL/kg·bw/d)動物數(只)Ⅱ組初始體重(g) P Ⅱ組終末體重(g)增長值(g) P 0(空白對照) 10 20.66±1.11 0.950 27.44±1.25 6.78±1.58 0.595 0(酒基對照) 10 20.63±1.00 27.05±1.16 6.42±1.38 0.40 10 20.62±0.93 1.000 26.49±1.18 5.87±1.57 0.727 0.80 10 20.65±0.84 1.000 26.72±1.53 6.07±1.25 0.906 2.40 10 20.66±0.78 1.000 26.91±1.23 6.25±1.53 0.987

續表1 士酒對小鼠體重的影響(±s)

續表1 士酒對小鼠體重的影響(±s)

劑量(mL/kg·bw/d)動物數(只)Ⅱ組初始體重(g) P Ⅱ組終末體重(g)增長值(g) P 0(空白對照) 10 20.65±1.08 0.914 27.54±1.24 6.89±1.73 0.595 0(酒基對照) 10 20.60±0.95 27.08±1.41 6.48±1.65 0.40 10 20.66±0.87 0.997 26.99±1.41 6.33±1.71 0.994 0.80 10 20.63±0.77 1.000 27.03±1.54 6.40±1.64 0.999 2.40 10 20.64±0.77 0.999 26.31±1.38 5.67±1.70 0.575

續表1 士酒對小鼠體重的影響 (±s)

續表1 士酒對小鼠體重的影響 (±s)

劑量(mL/kg·bw/d)動物數(只)Ⅱ組初始體重(g) P Ⅱ組終末體重(g)增長值(g) P 0(空白對照) 10 20.63±1.04 0.964 27.05±1.40 6.42±1.91 0.721 0(酒基對照) 10 20.61±0.94 27.31±1.14 6.70±1.51 0.40 10 20.63±0.85 1.000 26.58±1.30 5.95±1.35 0.444 0.80 10 20.64±0.77 1.000 26.97±0.87 6.33±1.03 0.863 2.40 10 20.64±0.73 1.000 26.53±1.28 5.89±1.31 0.383

2.2 士酒對小鼠負重游泳時間的影響

由表2可見,空白對照小鼠負重游泳時間與酒基對照組比較,差異無統計學意義(P>0.05)。高劑量組小鼠負重游泳時間顯著長于酒基對照組(P<0.05)。

表2 士酒對小鼠負重游泳時間的影響(±s)

表2 士酒對小鼠負重游泳時間的影響(±s)

(m L/k g·b w/d)動物數(只) 負重游泳時間(秒) P 劑量0(空白對照) 1 0 4 6 1±1 3 2 0.3 5 9 0(酒基對照) 1 0 5 1 0±9 6 0.4 0 1 0 5 2 4±1 1 3 0.9 9 1 0.8 0 1 0 6 2 7±1 8 6 0.1 5 8 2.4 0 1 0 6 7 2±1 3 8 0.0 3 2

2.3 士酒對小鼠游泳后血漿尿素水平的影響

由表3可見,空白對照小鼠血漿尿素水平與酒基對照組比較無顯著差異 (P>0.05)。低、中、高劑量組小鼠血漿尿素水平顯著低于酒基對照組(P<0.05)。

表3 士酒對小鼠游泳后血漿尿素的影響(±s)

表3 士酒對小鼠游泳后血漿尿素的影響(±s)

(m L/k g·b w/d)動物數(只) 血 漿 尿 素劑量(m m o l/L) P值0(空白對照) 1 0 9.9 5±1.0 1 0.6 6 8 0(酒基對照) 1 0 9.7 7±0.8 6 0.4 0 1 0 8.5 3±0.9 3 0.0 0 8 0.8 0 1 0 7.7 3±0.9 4 0.0 0 0 2.4 0 1 0 8.4 5±0.7 6 0.0 0 5

2.4 士酒對小鼠肝糖原儲備量的影響

由表4可見,空白對照小鼠肝糖原儲備量與酒基對照組比較無顯著差異 (P>0.05)。高劑量組小鼠肝糖原儲備量顯著高于酒基對照組(P<0.05)。2.5士酒對小鼠游泳前后血乳酸值及其曲線下面積的影響

表4 士酒對小鼠肝糖原儲備量的影響(±s)

表4 士酒對小鼠肝糖原儲備量的影響(±s)

(m L/k g·b w/d)動物數(只) 肝 糖 原劑量(m g/g肝) P值0(空白對照) 1 0 2 5.4±3.5 0.5 0 9 0(酒基對照) 1 0 2 3.7±6.9 0.4 1 0 2 1.6±3.9 0.6 6 3 0.8 0 1 0 2 9.2±5.9 0.0 5 0 2.4 0 1 0 3 2.3±1.7 0.0 0 1

由表5可見,空白對照小鼠游泳后血乳酸曲線下面積值與酒基對照組比較無顯著差異(P>0.05)。中劑量組小鼠游泳后血乳酸曲線下面積值顯著低于酒基對照(P<0.05)。

表5 士酒對小鼠游泳后血乳酸(mmol/L)曲線下面積的影響(±s)

表5 士酒對小鼠游泳后血乳酸(mmol/L)曲線下面積的影響(±s)

劑量(m L/k g·b w/d)動物數(只)安靜血乳酸值運動后0分鐘血乳酸值運動后休息2 0分鐘血乳酸值血乳酸曲線下面積值 P值0(空白對照) 1 0 1.9 9±0.7 3 4.0 0±0.5 8 3.0 1±1.1 6 1 0 0±1 8 0.2 9 3 0(酒基對照) 1 0 1.7 8±0.5 4 3.7 3±0.7 5 2.6 9±0.4 8 9 2±1 6 0.4 0 1 0 1.6 7±0.7 5 3.3 4±0.6 1 2.0 8±0.2 8 7 9±8 0.0 6 8 0.8 0 1 0 1.3 0±0.4 3 3.0 3±0.6 1 2.1 0±0.3 3 7 3±1 1 0.0 0 4 2.4 0 1 0 1.7 0±0.4 8 3.0 8±0.8 3 2.4 8±0.6 1 7 9±1 2 0.0 7 4

3 討論

體力疲勞即運動性疲勞,運動耐力的提高是抗疲勞能力加強的最直接表現,負重游泳時間是反映動物運動耐力的重要指標[9]。士酒可以顯著地延長小鼠負重游泳的時間,說明其具有提高運動耐力的作用;低、中、高劑量組小鼠血漿尿素水平顯著降低;可以增加小鼠肝糖原的儲備量,降低劇烈體力勞動后糖原的消耗;乳酸是糖無氧酵解的產物,長時間劇烈運動使體內乳酸堆積而引起運動性疲勞,運動停止后糖酵解停止,乳酸被不斷清除,血乳酸則逐漸降低,疲勞得以恢復。因此,血乳酸水平也是反映機體疲勞程度的重要指標。中劑量組小鼠運動后血乳酸含量顯著降低,說明士酒能減少運動時動物血乳酸的堆積。綜上可知,士酒具有緩解體力疲勞的作用。

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