謝 勇 ,樊哲宇 ,睢 誠 ,于曉風 ,徐華麗 ,睢大筼*
(1.吉林省北域西洋參研究有限公司,長春130000;2.吉林大學藥學院,長春130021)
疲勞(fatigue)是機體復雜的生理生化過程,它是人體肌肉工作或運動到一定時間出現的肌肉以及其它器官,甚至整個機體工作能力暫時下降的現象。疲勞是一種過勞現象,自我感覺沉重,疲軟,不想活動,即通常所說的“很累”。過勞不僅降低了工作與學習效率,而且危害身心健康,成為多種疾病的誘因。西洋參刺五加膠囊是利用已授權發明專利(一種姜蜜炮制西洋參制劑及制備方法,ZL201510008613.4),配伍刺五加提取物開發的一種新型保健食品,用于緩解體力疲勞。
西洋參(Panaxquinquefolium L.)為五加科人參屬植物,又稱美國人參,原產于美國和加拿大,國內多個地區已廣泛種植。具有補氣養陰,清熱生津,具有良好的抗疲勞作用。但其味甘微苦,性寒,中陽衰微胃有寒濕者忌服。隨著現代人攝取寒涼冰鎮飲品及食品過多,造成大多數人脾胃寒濕,因而不宜食用西洋參。我們將西洋參經生姜汁浸制,可改變西洋參的寒涼偏性,增加西洋參益氣,扶正氣和潤燥的功效。配伍刺五加[Acanthopanax senticosus(Rupr.Maxim.)Harms)]提取物可明顯提高其緩解體力疲勞的功效。目前尚未見有關將西參、生姜及刺五加配伍用于緩解體力疲勞的研究報道及保健食品問世。本文觀察西洋參刺五加膠囊的抗疲勞作用,為其開發利用提供實驗依據。
Balb/c小鼠,雄性,體重20~22g,由長春生物制品研究所有限責任公司提供,合格證號:SCXK(吉)-2017-0005。實驗在溫度為24℃、濕度為60%的安靜環境下進行。
西洋參刺五加膠囊由吉林省北域西洋參研究有限公司提供,批號:20181205,規格:0.3g/片,用法:每日 2次,每次 4片。 血乳酸(LA)、血尿素氮(BUN)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、肝糖原及肌糖原檢測試劑盒均為南京建成生物工程研究所提供。
1.3.1 實驗分組及給藥
將80只小鼠根據體重隨機分為4組:對照組,西洋參刺五加膠囊低、中、高劑量組,每組20只。藥物組動物灌胃西洋參刺五加膠囊0.2、0.4、0.8g/kg,對照組給予0.5%羧甲基纖維素鈉,給藥體積20mL/kg,1次/日,連續給藥30天。
1.3.2 觀測指標
1.3.2.1 跑步實驗
小鼠于給藥第21天開始進行跑步機訓練,連續3天。于第24天給藥后30min,將小鼠放置于跑步機小室中,設置轉速為20r/min,電刺激區電流強度為1.2 A,記錄小鼠到力竭跑步的時間和運動距離,力竭判定標準為小鼠在電擊區靜止10 s以上。
1.3.2.2 轉棒實驗
小鼠于給藥后第25天開始進行轉棒訓練,連續2天。于第27天給藥后30min,將小鼠放進轉棒儀的小室中,以18r/min的轉速測定3 min內小鼠在轉棒首次停留時間為轉棒時間。如整個過程小鼠不掉下,則小鼠在轉棒停留時間記為180s。
1.3.2.3 爬桿實驗
小鼠于給藥后第28天開始進行爬桿訓練,連續2天。于第30給藥后30min,將小鼠放在爬桿棒上,記錄小鼠由于肌肉疲勞從棒上跌落的時間,第3次落水時終止實驗,記錄小鼠5 min內在棒上的停留時間作為爬桿時間。如整個過程小鼠都不掉下,則爬桿時間記為300s。每組取10小鼠,于爬桿前、爬桿后及爬桿休息10min后眼球取血,測定血LA含量。
1.3.2.4 生化指標測定
小鼠于藥后第31天,每組另10小鼠,眼球取血,以2000r/min,離心10min,制備血清,用試劑盒測定血清SOD、MDA及BUN。摘取小鼠股四頭肌及肝臟,測定肌糖原及肝糖原含量。
數據的統計處理采用SPSS10.0統計軟件中單因素方差分析進行均值比較,實驗數據以±S表示,采用組間比較 t檢驗,P<0.05表示差異具有顯著性。
與對照組比較,西洋參刺五加膠囊中、大劑量組均可使小鼠跑步時間及跑步距離明顯延長(P<0.05或P<0.01),西洋參刺五加膠囊小劑量組對小鼠跑步時間及跑步距離均無明顯影響(P>0.05),結果見表1。
表1 西洋參刺五加膠囊對小鼠跑步時間及跑步距離的影響(±s,n=20)

表1 西洋參刺五加膠囊對小鼠跑步時間及跑步距離的影響(±s,n=20)
與對照組比較 *P<0.05,**P<0.01
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與對照組比較,西洋參刺五加膠囊中、大劑量組可使小鼠轉棒時間及爬桿時間均明顯延長(P<0.05或P<0.01),西洋參刺五加膠囊小劑量組對小鼠轉棒時間及爬桿時間均無明顯影響(P>0.05),結果見表2。
與對照組比較,西洋參刺五加膠囊中、大劑量組均可使小鼠爬桿前、爬桿后及爬桿休息10min后LA含量明顯降低(P<0.05 或 P<0.01),西洋參刺五加膠囊小劑量組小鼠爬桿前、爬桿后及爬桿休息10min后LA含量均無明顯影響(P>0.05),結果見表3。
表2 西洋參刺五加膠囊對小鼠轉棒時間及爬桿時間的影響 (±s,n=20)

表2 西洋參刺五加膠囊對小鼠轉棒時間及爬桿時間的影響 (±s,n=20)
與對照組比較 *P<0.05,**P<0.01
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表3 西洋參刺五加膠囊對小鼠血LA的影響(±s,n=10)

表3 西洋參刺五加膠囊對小鼠血LA的影響(±s,n=10)
與對照組比較 *P<0.05,**P<0.01
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與對照組比較,西洋參刺五加膠囊中、大劑量組均可使血清MDA及BUN含量明顯降低,SOD活性明顯升高(P<0.05 或 P<0.01),西洋參刺五加膠囊小劑量組可使血清MDA含量明顯降低(P<0.05),對BUN含量及SOD活性均無明顯影響(P>0.05),結果見表4。
表4 西洋參刺五加膠囊對小鼠血清MDA及SOD的影響(±s,n=10)

表4 西洋參刺五加膠囊對小鼠血清MDA及SOD的影響(±s,n=10)
與對照組比較 *P<0.05,**P<0.01
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與對照組比較,西洋參刺五加膠囊中、大劑量組均可明顯提高小鼠肝糖原及肌糖原含量 (P<0.05或P<0.01),西洋參刺五加膠囊小劑量組對小鼠肝糖原及肌糖原含量均無明顯影響(P>0.05),結果見表5。
表5 西洋參刺五加膠囊對小鼠肝糖原及肌糖原含量的影響 (±s,n=10)

表5 西洋參刺五加膠囊對小鼠肝糖原及肌糖原含量的影響 (±s,n=10)
與對照組比較 *P<0.05,**P<0.01
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疲勞伴隨著復雜的生理生化過程,是多種因素共同作用的結果。其發生過程與一些生化指標的變化相聯系,主要包括:a.能量物質如肌糖原、肝糖原、血糖、磷酸肌酸等;b.代謝調節物質如LDH、ATP酶、激素等;c.代謝產物如血和肌肉中的LA、BUN、H+離子、丙酮酸等。一般來說,在運動時變化明顯而且變化程度與運動負荷強度相一致的指標,才可作為疲勞的評價指標[1,2]。跑步機實驗主要測定小鼠的運動能力,轉棒實驗主要檢測小鼠運動的平衡與協調能力,爬桿實驗主要檢測小鼠肌肉“質量”,三個實驗主要評價小鼠疲勞程度[3~5]。乳酸為葡萄糖無氧酵解的產物,尿素氮為蛋白質和氨基酸的分解代謝產物,運動中體內蓄積的大量乳酸及血尿素氮是導致機體疲勞的直接因子[6]。運動時機體會生成大量氧自由基,脂質過氧化物所引發的氧化應激反應是產生運動疲勞的原因之一[7]。肌糖原和肝糖原的儲備量可直接影響機體體能和運動性疲勞出現的快慢或程度。提高肌糖原和肝糖原的儲備量有助于提高機體耐力和運動能力,從而抵抗疲勞的產生[8]。本實驗結果表明,西洋參刺五加膠囊能明顯延長小鼠的跑步時間、跑步距離、轉棒時間、爬桿時間,提高乳酸清除能力,增加肝糖原、肌糖原的儲備,提高抗氧化應激的能力,提示其能改善小鼠的運動能力,增強機體的能源儲備,具有良好的緩解體力疲勞作用。