冷暴露對(duì)高脂飲食小鼠脂肪棕色化的影響

程 龍，朱耀萱，周 晶，寧一博，張碩峰，孫建寧，董世芬

(北京中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)院中藥藥理系，北京 102488)

肥胖以脂肪組織過度堆積和脂質(zhì)代謝失調(diào)為特征，與多種代謝疾病的發(fā)生有關(guān)，如2型糖尿病、高脂血癥、高血壓、心血管疾病等，是全球面臨的重要的公共衛(wèi)生問題[1]。一項(xiàng)來自200個(gè)國家的1 920萬人的實(shí)驗(yàn)研究表明，到2025年，全球男性肥胖患病率將達(dá)18%，女性患病率將超過21%[2]。

在哺乳動(dòng)物中，脂肪組織主要以兩種形式存在：白色脂肪組織(white adipose tissue，WAT)和棕色脂肪組織(brown adipose tissue，BAT)。WAT主要以甘油三酯的形式儲(chǔ)存葡萄糖和脂肪酸中所含的能量，并以游離脂肪酸的形式釋放能量；BAT含有大量線粒體，具有通過脂肪酸的氧化以熱量的形式消散能量的能力。隨著研究深入發(fā)現(xiàn)，人體內(nèi)除了WAT和BAT外，還存在一種叫作“米色脂肪”的脂肪組織類型[3]。當(dāng)機(jī)體交感神經(jīng)興奮時(shí)(如冷刺激、β3腎上腺素受體激活)，原本具有白色脂肪細(xì)胞特征的脂肪細(xì)胞高表達(dá)線粒體解偶聯(lián)蛋白1(uncoupling protein 1，UCP1)蛋白，耗能增加，減少脂質(zhì)在脂肪細(xì)胞中的堆積，具有類似經(jīng)典的棕色脂肪細(xì)胞的功能，這個(gè)過程稱為“脂肪棕色化”，同時(shí)研究證明皮下腹股溝白色脂肪比附睪脂肪更容易轉(zhuǎn)化[4]。C57BL/6J小鼠喂食高脂飼料一段時(shí)間后，易出現(xiàn)白色脂肪細(xì)胞過度堆積及脂質(zhì)代謝異常，是研究肥胖及相關(guān)代謝疾病的較佳模型[5]。因此，本研究以C57BL/6J小鼠為研究對(duì)象，觀察冷暴露對(duì)肥胖模型小鼠脂肪棕色化的影響。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物8周齡♂SPF級(jí)C57BL/6J小鼠32只，體質(zhì)量(20±2)g，由斯貝福(北京)生物技術(shù)有限公司提供[SCXK(京)2016-0002]，合格證號(hào)：11401500032946。小鼠飼養(yǎng)于北京中醫(yī)藥大學(xué)屏障環(huán)境動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室[SYXK(京)2016-0038]，室溫(25±2)℃、45%相對(duì)濕度，12 h/12 h光暗周期，飼養(yǎng)期間小鼠自由進(jìn)食及飲水。本研究通過北京中醫(yī)藥大學(xué)醫(yī)學(xué)與實(shí)驗(yàn)動(dòng)物倫理委員會(huì)審批準(zhǔn)許可，編號(hào)：BUCM-4-2018030701-2063。

1.2 試劑高脂飼料(D12492，5.24 kcal·g-1)、普通飼料(3.24 kcal·g-1)，購于北京華阜康生物科技股份有限公司[SCXK(京)2014-0008]；血糖試紙，購于強(qiáng)生(中國)醫(yī)療器材有限公司，批號(hào)為4334014；總膽固醇(total cholesterol，TC)測(cè)試盒、甘油三酯(triglyceride，TG)測(cè)試盒、低密度脂蛋白膽固醇(low density lipoprotein cholesterol，LDL-C)測(cè)試盒、高密度脂蛋白膽固醇(high-density lipoprotein cholesterol，HDL-C)測(cè)試盒、游離脂肪酸(free fatty acid，F(xiàn)FA)測(cè)試盒，均購于南京建成生物工程研究所，批號(hào)分別為20180816、20180816、20180810、20180814、20180817；瘦素(leptin peptide，LEP)、脂聯(lián)素(adiponectin，ADPN)ELISA試劑盒，購于美國Cloud-Clone Corp，批號(hào)分別為L(zhǎng)180809637、L180712071；UCP1、抗增殖蛋白(prohibitin，PHB)抗體，購于Abcam公司，批號(hào)分別為GR3188478-6、GR248742-21。

1.3 儀器全波長(zhǎng)酶標(biāo)儀BMG SPECTROstar Nano (江蘇萬科科教儀器有限公司)；血糖儀(強(qiáng)生醫(yī)療器材有限公司)；UH5300雙光束分光光度計(jì)(日本日立公司)。

1.4 方法

1.4.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組及造模 將32只8周齡♂SPF級(jí)C57BL/6J小鼠隨機(jī)分為2組，即正常組、模型組，模型組小鼠喂食高脂飼料，正常組小鼠喂食普通飼料。干預(yù)8周后，將模型組、正常組小鼠各隨機(jī)分為2組，即高脂5 ℃冷暴露(HFD+5 ℃)干預(yù)組、高脂室溫(25±2)℃(HFD+RT)干預(yù)組、正常5 ℃冷暴露(Normal+5 ℃)干預(yù)組、正常室溫(25±2)℃(Normal+RT)干預(yù)組，每天不同溫度干預(yù)2 h，連續(xù)干預(yù)8周，每周監(jiān)測(cè)小鼠體質(zhì)量、體溫、進(jìn)食量。

1.4.2空腹血糖及口服葡萄糖耐受量的測(cè)定 連續(xù)冷暴露干預(yù)8周后，小鼠在禁食不禁水12 h后，采用剪尾取血的方法，用血糖儀試紙法測(cè)定小鼠血糖(blood glucose，BG)。用50%葡萄糖按2 g·kg-1劑量灌胃，測(cè)定灌胃前(0 min)及灌胃后30、60、90、120 min小鼠血糖，繪制糖耐量(oral glucose tolerance test，OGTT)時(shí)間曲線圖，并采用近似梯形方法計(jì)算曲線下面積(area under curve，AUC)，計(jì)算公式如下：AUC=0.5 h[1/2(BG0 min+BG30 min)+1/2(BG30 min+BG60 min)+1/2(BG60 min+BG90 min)+1/2(BG90 min+BG120 min)][6]。

1.4.4取材 連續(xù)冷暴露干預(yù)8周后，禁食12 h，麻醉取血約1 mL，3 500 r·min-1離心10 min，分離血清。取血后，解剖分離皮下腹股溝白色脂肪及肩胛區(qū)棕色脂肪，并稱重，皮下腹股溝白色脂肪及肩胛區(qū)棕色脂肪組織放在10%中性福爾馬林固定液中固定。

1.4.5脂肪重量/體質(zhì)量的測(cè)定 精確稱重小鼠皮下腹股溝白色脂肪重量及肩胛部棕色脂肪重量，計(jì)算腹股溝白色脂肪重量(iWAT)/體質(zhì)量(WB)、肩胛區(qū)棕色脂肪重量(BAT)/體質(zhì)量(WB)的比值。

1.4.6血脂的檢測(cè) 按照說明，采用生化試劑盒測(cè)定血清中TC、TG、LDL-C、HDL-C、FFA、LEP及ADPN的含量。

1.4.7脂肪組織HE染色 將固定在10%中性福爾馬林固定液中的iWAT、BAT取出，石蠟包埋、切片后，常規(guī)HE染色，正置顯微鏡觀察脂肪細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化。

1.4.8脂肪組織免疫組織化學(xué)染色 將iWAT、BAT切片常規(guī)脫蠟、脫水；抗原修復(fù)；阻斷內(nèi)源性過氧化物酶；封閉；切片分別加UCP1、PHB一抗4 ℃過夜；過夜后，PBS清洗，滴加二抗；DAB顯色；終止顯色后，蘇木精復(fù)染，流水返藍(lán)；常規(guī)脫水、透明、中性樹膠封片。棕黃色著色即為陽性細(xì)胞抗原存在位置。

1.4.9脂肪組織UCP1、PHB蛋白的表達(dá) 使用圖像分析軟件Image-Pro Plus 6.0，選取棕黃色處為陽性著色，對(duì)陽性表達(dá)處進(jìn)行平均光密度(average optical density，AOD)分析。

2 結(jié)果

2.1 冷暴露對(duì)C57BL/6J小鼠體質(zhì)量、進(jìn)食量、體溫及Lee’s指數(shù)的影響如Fig 1A所示，實(shí)驗(yàn)期間，各組小鼠體質(zhì)量呈現(xiàn)增長(zhǎng)趨勢(shì)。與Normal+RT組比較，在整個(gè)冷暴露干預(yù)期間，HFD+5 ℃組、HFD+RT組小鼠體質(zhì)量明顯增加；在冷暴露第8周時(shí)，Normal+5 ℃組小鼠體質(zhì)量明顯降低；與HFD+RT組比較，在冷暴露第6周至實(shí)驗(yàn)結(jié)束，HFD+5 ℃組小鼠體質(zhì)量明顯降低。結(jié)果提示冷暴露可抑制高脂飼料喂養(yǎng)致體質(zhì)量快速增長(zhǎng)。如Fig 1B所示，與Normal+RT組比較，在整個(gè)實(shí)驗(yàn)期間，HFD+5 ℃組、HFD+RT組小鼠進(jìn)食量明顯增加；在冷暴露第4周至實(shí)驗(yàn)結(jié)束，Normal+5 ℃組小鼠進(jìn)食量明顯增加；與HFD+RT組比較，在冷暴露第2周至實(shí)驗(yàn)結(jié)束，HFD+5 ℃組小鼠進(jìn)食量明顯增加。結(jié)果顯示冷暴露條件下，小鼠的進(jìn)食量增加。如Fig 1C所示，在冷暴露干預(yù)下，Normal+RT、HFD+RT、Normal+5 ℃、HFD+5 ℃四組小鼠體溫差異無顯著性，提示冷暴露對(duì)小鼠核心體溫基本無影響。如Fig 1D所示，與Normal+RT組比較，HFD+5 ℃組、HFD+RT組小鼠Lee’s指數(shù)明顯增加；Normal+5 ℃組小鼠Lee’s指數(shù)差異無顯著性；與HFD+RT組比較，HFD+5 ℃組小鼠Lee’s指數(shù)有降低趨勢(shì)，但差異無顯著性。結(jié)果提示冷暴露對(duì)降低小鼠Lee’s指數(shù)無明顯作用。

2.2 冷暴露對(duì)C57BL/6J小鼠脂肪重量與體質(zhì)量比值的影響如Fig 2A所示，與Normal+RT組比較，HFD+5 ℃組、HFD+RT組小鼠iWAT重量/體質(zhì)量的比值明顯增加，Normal+5 ℃組小鼠明顯降低；與HFD+RT組比較，HFD+5 ℃組小鼠iWAT重量/體質(zhì)量的比值明顯降低。如Fig 2B所示，與Normal+RT組比較，HFD+RT組小鼠BAT重量/體質(zhì)量的比值明顯降低，HFD+5 ℃、Normal+5 ℃組小鼠BAT重量差異無顯著性；與HFD+RT組比較，HFD+5 ℃組小鼠BAT重量/體質(zhì)量的比值明顯增加。上述結(jié)果提示，冷暴露具有降低高脂飲食小鼠iWAT重量/體質(zhì)量比值的作用，增加其BAT重量/體質(zhì)量的比值。

2.3 冷暴露對(duì)C57BL/6J小鼠空腹血糖、口服葡萄糖耐受量及AUC的影響Fig 3A口服葡萄糖耐受量結(jié)果顯示，與Normal+RT組比較，在第0 min時(shí)，HFD+RT組小鼠空腹血糖明顯升高；HFD+ 5℃、Normal+5 ℃組小鼠血糖差異無顯著性；與HFD+RT組比較，在第0 min時(shí)，HFD+5 ℃組小鼠空腹血糖明顯降低。在用50%葡萄糖按2 g·kg-1劑量灌胃30 min后，與Normal+RT組比較，HFD+5 ℃組、HFD+RT組小鼠血糖明顯升高；與HFD+RT組比較，灌胃30 min后，HFD+5 ℃組小鼠血糖差異無顯著性。從灌胃后60 min至實(shí)驗(yàn)結(jié)束，與Normal+RT組比較，HFD+5 ℃組、HFD+RT組小鼠血糖明顯升高；與HFD+RT組比較，從灌胃后60 min至實(shí)驗(yàn)結(jié)束，HFD+5 ℃組小鼠空腹血糖明顯降低。如Fig 3B所示，與Normal+RT組比較，HFD+5 ℃ 組、HFD+RT組小鼠AUC明顯升高；Normal+5 ℃組小鼠AUC差異無顯著性；與HFD+RT組比較，HFD+5 ℃組小鼠AUC明顯降低。上述結(jié)果提示冷暴露能改善其葡萄糖耐受量。

Fig 1 Effect of cold exposure on body weight, food intake, body temperature and Lee’s index in C57BL/6J

*P<0.05,**P<0.01vsNormal+RT group;#P<0.05,##P<0.01vsHFD+RT group

Tab 1 Effect of cold exposure on TC, TG, LDL-C and HDL-C in blood lipids of C57BL/6J

*P<0.05,**P<0.01vsNormal+RT group;#P<0.05,##P<0.01vsHFD+RT group

Fig 2 Effect of cold exposure on adipose tissue weight to body weight ratio in C57BL/6J

*P<0.05,**P<0.01vsNormal+RT group;#P<0.05,##P<0.01vsHFD+RT group

2.4 冷暴露對(duì)C57BL/6J小鼠血清中TC、TG、LDL-C及HDL-C的影響如Tab 1所示，與Normal+RT組比較，HFD+5 ℃組、HFD+RT組小鼠血清中TC、TG、LDL-C及HDL-C含量明顯升高；Normal+5 ℃組小鼠清中TC、TG、LDL-C含量明顯降低，HDL-C含量差異無顯著性；與HFD+RT組比較，HFD+5 ℃組小鼠血清中TC、TG、LDL-C含量明顯降低，HDL-C含量差異無顯著性。結(jié)果顯示，冷暴露能降低高脂飲食小鼠血脂水平。

Fig 3 Effect of cold exposure on blood glucose, oral glucose tolerance, and AUC in C57BL/6J

*P<0.05,**P<0.01vsNormal+RT group;#P<0.05,##P<0.01vsHFD+RT group

2.5 冷暴露對(duì)C57BL/6J小鼠血脂中FFA、LEP及ADPN的影響如Tab 2所示，與Normal+RT組比較，HFD+5 ℃組、HFD+RT組小鼠血清中FFA、LEP含量明顯升高，ADPN含量明顯降低；Normal+5 ℃組小鼠血清中FFA、LEP含量明顯降低，ADPN含量明顯升高；與HFD+RT組比較，HFD+5 ℃組小鼠血清中LEP含量明顯降低，F(xiàn)FA含量有降低趨勢(shì)，ADPN含量有增加趨勢(shì)，但差異均無顯著性，提示冷暴露能降低高脂飲食小鼠血清中LEP水平。

Tab 2 Effect of cold exposure on FFA, LEP and ADPN in blood lipids of C57BL/6J

*P<0.05,**P<0.01vsNormal+RT group;#P<0.05,##P<0.01vsHFD+RT group

2.6 冷暴露對(duì)C57BL/6J小鼠iWAT、BAT形態(tài)的影響Fig 4為iWAT、BAT的HE染色結(jié)果，在iWAT中，Normal+RT組小鼠呈現(xiàn)出較大空泡狀，形狀近似圓形，組織比較致密；HFD+RT組小鼠呈現(xiàn)出大空泡的脂肪室，且形狀不規(guī)則，細(xì)胞核、細(xì)胞器及胞質(zhì)被擠到一側(cè)呈薄環(huán)，白色脂肪特征明顯；與HFD+RT組相比，Normal+5 ℃組、HFD+5 ℃組小鼠皮下腹股溝白色脂肪細(xì)胞出現(xiàn)多室，細(xì)胞變小、變圓，組織變的更加致密，具有棕色化趨勢(shì)。在BAT中，Normal+RT組小鼠呈現(xiàn)近圓形的、小的脂肪室，脂肪細(xì)胞周圍具有豐富的毛細(xì)血管；HFD+RT組小鼠呈現(xiàn)出較大的、單個(gè)空泡脂肪室，具有棕色細(xì)胞白色化的趨勢(shì)；與HFD+RT組相比，Normal+5 ℃組、HFD+5 ℃組小鼠BAT細(xì)胞變小、變圓，分布明顯增多且出現(xiàn)多室，細(xì)胞間毛細(xì)血管更加豐富。

2.7 冷暴露對(duì)C57BL/6J小鼠iWAT、BAT部位UCP1蛋白表達(dá)的影響UCP1蛋白具有解偶聯(lián)作用，阻止ADP生成ATP，增加產(chǎn)熱，是BAT中標(biāo)志性蛋白。如Fig 5所示，在iWAT中，Normal+RT組可見少量的UCP1陽性細(xì)胞表達(dá)；HFD+RT組UCP1陽性細(xì)胞表達(dá)明顯減少，與Normal+RT組比較差異有顯著性；與HFD+RT組比較，Normal+5 ℃ 組、HFD+5 ℃組UCP1陽性細(xì)胞表達(dá)明顯增多。在BAT中，Normal+RT組可見較多的UCP1陽性細(xì)胞表達(dá)；HFD+RT組UCP1陽性細(xì)胞表達(dá)明顯減少，與Normal+RT組比較差異有顯著性；與HFD+RT組比較，Normal+5 ℃組、HFD+5 ℃組UCP1陽性細(xì)胞表達(dá)明顯增多。上述結(jié)果顯示，冷暴露能增加高脂飲食小鼠iWAT、BAT中UCP1蛋白表達(dá)，具有激活BAT功能及促進(jìn)脂肪棕色化的作用。

2.8 冷暴露對(duì)C57BL/6J小鼠iWAT、BAT部位PHB蛋白表達(dá)的影響PHB蛋白主要存在于線粒體內(nèi)膜上，在維持線粒體形態(tài)和功能及調(diào)節(jié)能量代謝中發(fā)揮著重要作用。如Fig 6所示，在iWAT中，Normal+RT組、HFD+RT組可見極少量的PHB陽性細(xì)胞表達(dá)，兩者比較差異無顯著性；與HFD+RT組比較，Normal+5 ℃組、HFD+5 ℃組PHB陽性細(xì)胞表達(dá)明顯增多。在BAT中，Normal+RT組可見較多的PHB陽性細(xì)胞表達(dá)；HFD+RT組PHB陽性細(xì)胞表達(dá)減少，但與Normal+RT組比較，差異無顯著性；與HFD+RT組比較，Normal+5 ℃組、HFD+5 ℃組PHB陽性細(xì)胞表達(dá)明顯增多。上述結(jié)果提示，冷暴露能增加PHB蛋白在iWAT、BAT中的表達(dá)。

Fig 4 Effect of cold exposure on morphology in iWAT and BAT in C57BL/6J mice(×400)

Fig5EffectofcoldexposureonexpressionofUCP1proteininiWATandBATofC57BL/6Jmice(×400)

A: UCP1 protein was expressed in situ in iWAT and BAT; B: AOD of UCP1 protein in iWAT and BAT.*P<0.05,**P<0.01vsNormal+RT group;##P<0.01vsHFD+RT group.

Fig6EffectofcoldexposureonexpressionofPHBproteininiWATandBATofC57BL/6Jmice(×400)

A: PHB protein was expressed in situ in iWAT and BAT; B: AOD of PHB protein in iWAT and BAT.**P<0.01vsNormal+RT group;#P<0.05,##P<0.01vsHFD+RT group.

3 討論

脂肪組織是主要的代謝器官，在能量穩(wěn)態(tài)中起關(guān)鍵作用。基于細(xì)胞形態(tài)和組織功能，哺乳動(dòng)物的脂肪組織分為WAT和BAT兩種類型。WAT不僅是能量?jī)?chǔ)存的器官，同時(shí)也是功能活躍的內(nèi)分泌器官，其分泌的蛋白質(zhì)或脂肪細(xì)胞因子影響機(jī)體的糖脂代謝平衡、血壓水平、炎癥反應(yīng)等，與血瘀證包括高血糖、高血壓、高脂血癥、動(dòng)脈粥樣硬化等的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。BAT在適應(yīng)寒冷環(huán)境和能量消耗的調(diào)節(jié)中起重要作用，是哺乳動(dòng)物非顫栗性產(chǎn)熱的主要來源。非顫栗性產(chǎn)熱的激活主要依賴BAT中的UCP1蛋白解偶聯(lián)驅(qū)動(dòng)[8]。UCP1在棕色脂肪線粒體中特異性表達(dá)，并且負(fù)責(zé)BAT的獨(dú)特代謝功能，其通過線粒體內(nèi)膜消散質(zhì)子梯度，從而使電子傳遞系統(tǒng)與三磷酸腺苷(adenosine triphosphate，ATP)合成解偶聯(lián)，使能量以熱量的形式消散[9]。

研究發(fā)現(xiàn)，在禁食和正常室溫條件下，BAT功能與WAT代謝活性相當(dāng)，當(dāng)機(jī)體的交感神經(jīng)興奮時(shí)(如冷刺激)，BAT的功能激活及iWAT中UCP1表達(dá)明顯增加，出現(xiàn)BAT的典型特征，增加耗能及產(chǎn)熱[10]。PHB主要定位于線粒體內(nèi)膜，少量存在于細(xì)胞核、細(xì)胞膜及胞質(zhì)中，在維持線粒體形態(tài)、功能及調(diào)節(jié)能量代謝方面有著重要作用[11]。本研究結(jié)果顯示，冷刺激明顯降低高脂飲食小鼠體質(zhì)量、iWAT重量/體質(zhì)量比值，同時(shí)增加BAT重量/體質(zhì)量比值，脂肪組織HE染色發(fā)現(xiàn)，與HFD+RT組相比，冷暴露干預(yù)組小鼠iWAT細(xì)胞出現(xiàn)多室、變小、變圓等類似棕色脂肪細(xì)胞表型，BAT明顯增多且出現(xiàn)多室，細(xì)胞間毛細(xì)血管更加豐富；免疫組化結(jié)果顯示，冷暴露可明顯增加UCP1、PHB在iWAT和BAT中的表達(dá)。Schreiber等[12]研究證實(shí)，在冷刺激條件下，野生型小鼠通過增加攝食維持核心體溫恒定。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，各組小鼠間核心溫度無明顯改變，與上述實(shí)驗(yàn)報(bào)道一致。

冷暴露激活的BAT和iWAT顯示有調(diào)控血中TG水平的作用，其主要依賴脂蛋白脂酶(lipoprotein lipase，LPL)的活性和跨膜受體CD36，增加其對(duì)富甘油三酯脂蛋白(triglyceride-rich lipoprotein，TRL)的攝取，進(jìn)而加速清除血清中TG，改善高脂血癥[13]。本研究結(jié)果顯示，冷刺激明顯降低小鼠血清中TC、TG、LDL-C及FFA含量，可能與激活BAT及誘導(dǎo)iWAT棕色化有關(guān)。OGTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，冷暴露明顯降低高脂飲食小鼠空腹血糖及改善葡萄糖耐量，可能與冷暴露增加棕色化和棕色脂肪對(duì)血中葡萄糖的攝取有關(guān)。已有報(bào)道證實(shí)，瘦素具有維持機(jī)體能量代謝和調(diào)節(jié)脂肪比例的功能，其作用于下丘腦神經(jīng)肽(neuropeptide Y，NPY)/刺鼠肽基因相關(guān)蛋白(agouti-related peptide，AgRP)，抑制食欲及促進(jìn)能量消耗，也可與胰島素協(xié)同作用于下丘腦的阿片-促黑素細(xì)胞皮質(zhì)素原(proopiomelanocortin，POMC)神經(jīng)元，使POMC神經(jīng)元參與到脂肪棕色化過程中，增加耗能[14]。本研究結(jié)果顯示，冷暴露明顯降低高脂飲食小鼠血清中瘦素含量，增加其進(jìn)食量，其機(jī)制可能與瘦素的雙向調(diào)節(jié)有關(guān)。脂聯(lián)素是一種脂肪組織分泌的內(nèi)源性胰島素增敏劑，具有增加胰島素的敏感性及促進(jìn)外周組織脂肪酸氧化的作用，其水平的降低是高脂血癥和糖尿病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素[15]。本研究結(jié)果顯示，與室溫高脂飲食組相比，高脂冷暴露組小鼠血清中脂聯(lián)素含量有升高的趨勢(shì)，但差異無顯著性。

綜上所述，冷暴露可明顯抑制高脂飲食小鼠體質(zhì)量增長(zhǎng)，改善口服葡萄糖耐受量，降低iWAT重量/體質(zhì)量比值、血清中TC、TG、LDL-C及瘦素含量，同時(shí)增加進(jìn)食量、BAT重量/體質(zhì)量比值及iWAT和BAT中UCP1、PHB蛋白表達(dá)，激活棕色脂肪組織及誘導(dǎo)脂肪棕色化，增加產(chǎn)熱，減少白色脂肪堆積，在研究肥胖相關(guān)疾病時(shí)具有重要意義。