IL-23在慢性乙型肝炎免疫調(diào)節(jié)中的作用研究

裴金仙 陳天獅 任巧晶 王晉江 羅瑞麗

摘要：目的? 探討IL-23在慢性乙型肝炎免疫調(diào)節(jié)中的作用。方法? 選取我院收治的32例HBeAg陽(yáng)性慢性乙型肝炎患者為研究對(duì)象，根據(jù)ALT水平分為ALT≥120 IU/ml患者16例，ALT<120 IU/ml患者16例，另外選擇我院健康體檢中心20例體檢者作為健康對(duì)照組，采用酶聯(lián)免疫分析法（ELISA）檢測(cè)血清IL-23水平，采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)Th17細(xì)胞百分率。結(jié)果? 與健康對(duì)照組相比，HBeAg陽(yáng)性慢性乙型肝炎患者血清IL-23表達(dá)及外周血Th17細(xì)胞百分率均升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）; ALT≥120 IU/ml患者血清IL-23濃度（394.81±101.84）pg/ml高于ALT<120IU/ml的（283.69±85.65）pg/ml，ALT≥120 IU/ml患者Th17細(xì)胞百分率（3.25±0.70）%高于ALT<120IU/ml的（2.68±0.61）%，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;慢性乙型肝炎患者外周血Th17細(xì)胞百分率、血清IL-23濃度與ALT程度呈正相關(guān)（P均<0.05）;Th17細(xì)胞百分率與血清IL-23濃度呈正相關(guān)（P<0.05）。結(jié)論? IL-23可能通過(guò)影響Th17細(xì)胞的免疫調(diào)節(jié)參與慢性乙型肝炎患者炎癥，為臨床提供了新的靶標(biāo)。

關(guān)鍵詞：IL-23;乙型肝炎;Th17

中圖分類號(hào)：R512.62? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2019.08.037

文章編號(hào)：1006-1959（2019）08-0129-02

Abstract：Objective To investigate the role of IL-23 in the immunomodulation of chronic hepatitis B.Methods? 32 patients with HBeAg-positive chronic hepatitis B admitted to our hospital were enrolled. According to the ALT level， 16 patients with ALT≥120 IU/ml and 16 patients with ALT<120 IU/ml were selected. 20 patients in the center were used as healthy controls. Serum IL-23 levels were measured by enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA）， and the percentage of Th17 cells was detected by flow cytometry.Results? Compared with the healthy control group， the expression of serum IL-23 and the percentage of peripheral blood Th17 cells in HBeAg-positive chronic hepatitis B patients were significantly increased （P<0.05）. Serum IL in patients with ALT≥120 IU/ml -23 concentration （394.81±101.84） pg/ml was higher than ALT<120 IU/ml （283.69±85.65） pg/ml， ALT≥120IU/ml patients with Th17 cell percentage （3.25±0.70）% higher than ALT<120 IU/ml （2.68±0.61）%， the difference was statistically significant （P<0.05）; the percentage of Th17 cells and serum IL-23 in peripheral blood of patients with chronic hepatitis B were positively correlated with the degree of ALT （P<0.05）; Th17 cells The percentage was positively correlated with serum IL-23 concentration （P<0.05）. Conclusion? IL-23 may participate in the inflammation of patients with chronic hepatitis B by affecting the immune regulation of Th17 cells， providing a new target for clinical.

Key words：Interleukin-23;Chronic hepatitis B;Th17

我國(guó)是乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）感染高流行區(qū)，持續(xù)HBV感染導(dǎo)致肝臟慢性損傷，最終發(fā)展為肝硬化、肝癌。慢性乙型肝炎（chronic hepatitis B，CHB）反復(fù)發(fā)作、肝硬化、肝癌仍是我國(guó)目前嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問(wèn)題。研究HBV感染致肝損傷的機(jī)制對(duì)控制慢性乙型肝炎的發(fā)展具有重要的意義。T細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞免疫及細(xì)胞因子的調(diào)控作用在HBV感染中發(fā)揮著重要的作用。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)，IL-23可作用于Th17細(xì)胞，在細(xì)胞的增殖中發(fā)揮著重要作用，其可促進(jìn)組織慢性炎癥的發(fā)生[1]。本研究通過(guò)分析慢性乙型肝炎患者外周血IL-23水平對(duì)Th17細(xì)胞數(shù)量的影響，探討IL-23在慢性乙型肝炎免疫調(diào)節(jié)中的作用，現(xiàn)報(bào)道如下。

1資料與方法

1.1一般資料? 選擇山西省人民醫(yī)院住院及門(mén)診HBeAg陽(yáng)性慢性乙型肝炎患者32例，其中男性18例，女性14例，年齡21～64歲，平均年齡（34.09±10.35）歲。所有患者均符合2010年中華醫(yī)學(xué)會(huì)肝病學(xué)分會(huì)和感染病學(xué)分會(huì)聯(lián)合制定的《慢性乙型肝炎防止指南》中的診斷標(biāo)準(zhǔn)，排除合并其他病毒性肝炎、自身免疫性肝炎、藥物性肝病、酒精性肝病、肝炎肝硬化等疾病。所有患者在半年內(nèi)均未使用抗HBV藥物治療或免疫調(diào)節(jié)劑治療。另外選擇20例來(lái)自我院健康體檢中心的健康體檢者作為健康對(duì)照組，男性10例，女性10例，年齡25～62歲，平均年齡（35.10±9.34）歲。健康對(duì)照組與CHB患者性別、年齡比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），研究可進(jìn)行。

1.2方法? 采用酶聯(lián)免疫分析法（ELISA）檢測(cè)血清IL-23水平，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)操作;采用Beckman Coulter流式細(xì)胞儀檢測(cè)Th17細(xì)胞（CD3+CD8-IL-17A+T）百分率;全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)血清ALT。PerCPM-Cy5.5標(biāo)記的抗人CD3單克隆抗體、FITC標(biāo)記的抗人CD8單克隆抗體、PE標(biāo)記的抗人IL-17A單克隆抗體，所有抗體均購(gòu)自eBioscience公司。

1.3觀察指標(biāo)? 分析HBeAg陽(yáng)性慢性乙型肝炎患者與健康對(duì)照組血清IL-23水平及Th17細(xì)胞百分率;根據(jù)ALT水平將慢性乙型肝炎患者分為ALT<120 IU/ml組與ALT≥120 IU/ml組，進(jìn)一步分析兩組患者血清IL-23水平及Th17細(xì)胞百分率，并對(duì)兩者相關(guān)性進(jìn)行分析。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析? 應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，本研究資料符合正態(tài)分布，計(jì)量資料以（x±s）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)分析，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1 HBeAg陽(yáng)性慢性乙型肝炎患者Th17、IL-23的表達(dá)? 與健康對(duì)照組相比，HBeAg陽(yáng)性慢性乙型肝炎患者血清IL-23表達(dá)、外周血中Th17細(xì)胞百分率均升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見(jiàn)表1;HBeAg陽(yáng)性慢性乙型肝炎患者中ALT≥120 IU/ml血清IL-23濃度、外周血中Th17細(xì)胞百分率均高于ALT<120 IU/ml，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見(jiàn)表2。

2.2 HBeAg陽(yáng)性慢性乙型肝炎患者外周血Th17細(xì)胞百分率與IL-23表達(dá)水平相關(guān)性分析? 慢性乙型肝炎患者外周血Th17細(xì)胞百分率、血清IL-23濃度與ALT程度呈正相關(guān)（r=0.56，P=0.001;r=0.59，P=0.001）;Th17細(xì)胞百分率與血清IL-23濃度呈正相關(guān)（r=0.774，P=0.001）。

3討論

我國(guó)是乙型病毒性患者較多，HBV慢性持續(xù)感染已成為嚴(yán)重公共衛(wèi)生問(wèn)題。HBV慢性感染與肝硬化、肝細(xì)胞癌的發(fā)生密切相關(guān)，但其發(fā)病的免疫機(jī)制目前尚不完全明確。研究表明，HBV介導(dǎo)的免疫應(yīng)答是導(dǎo)致肝細(xì)胞損傷及炎癥產(chǎn)生的主要原因[2]，而機(jī)體細(xì)胞免疫功能異常使得HBV逃避免疫監(jiān)視和攻擊，從而使得機(jī)體不能有效清除體內(nèi)HBV。

Th17細(xì)胞是由初始CD4+T細(xì)胞分化的區(qū)別于Th1、Th2細(xì)胞的新型細(xì)胞亞群，以產(chǎn)生大量IL-17為特征。Th17細(xì)胞功能的發(fā)揮主要靠其分泌的細(xì)胞因子通過(guò)直接或間接的方式參與炎癥反應(yīng)。既往大量研究發(fā)現(xiàn)，Th17細(xì)胞在HBV慢性感染誘導(dǎo)的免疫應(yīng)答中發(fā)揮著重要作用，其可導(dǎo)致肝細(xì)胞損傷而促進(jìn)肝臟炎癥[3，4]。活化的Th17細(xì)胞可分泌IL-17等一系列細(xì)胞因子，這些細(xì)胞因子可聚集在炎癥部位，加重肝臟炎癥反應(yīng)程度及纖維化，進(jìn)而加重患者病情[5]。

IL-23是IL-12細(xì)胞因子家族的成員之一，其主要由樹(shù)突狀細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞等表達(dá)分泌[6]，參與機(jī)體抗腫瘤、抗感染免疫。IL-23作為一種促炎性細(xì)胞因子，是影響Th17細(xì)胞發(fā)揮免疫功能的關(guān)鍵細(xì)胞因子。IL-23可誘導(dǎo)Th17細(xì)胞亞群的分化，促進(jìn)Th17細(xì)胞的持續(xù)增殖并維持細(xì)胞亞群穩(wěn)定[7]。當(dāng)抗原遞呈細(xì)胞受病原體刺激后，誘導(dǎo)初始CD4+T細(xì)胞分泌IL-23等細(xì)胞因子并誘導(dǎo)Th17細(xì)胞分化成熟，活化的Th17細(xì)胞進(jìn)一步表達(dá)IL-23受體從而發(fā)揮其免疫作用。

已有研究發(fā)現(xiàn)，IL-23通過(guò)維持和擴(kuò)增Th17細(xì)胞，促進(jìn)炎癥因子的產(chǎn)生，從而增加患者的肝損傷程度。IL-23在正常肝臟細(xì)胞中表達(dá)水平很低，但在CHB患者中HBV可直接刺激肝細(xì)胞表達(dá)IL-23，受損肝細(xì)胞持續(xù)產(chǎn)生的IL-23可通過(guò)改變巨噬細(xì)胞功能而促進(jìn)肝細(xì)胞癌的發(fā)生。本研究對(duì)HBeAg陽(yáng)性慢性乙型肝炎患者外周血Th17細(xì)胞百分率和IL-23表達(dá)水平及其相關(guān)性進(jìn)行了分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，慢性乙型肝炎患者外周血Th17細(xì)胞的數(shù)量及血清IL-23的表達(dá)高于健康對(duì)照組，且ALT≥120 IU/ml患者高于ALT<120 IU/ml的患者。進(jìn)一步行相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，慢性乙型肝炎患者外周血Th17細(xì)胞百分率、血清IL-23濃度與ALT程度呈正相關(guān)。

綜上所述，IL-23可能通過(guò)影響Th17細(xì)胞的免疫調(diào)節(jié)參與慢性乙型肝炎患者炎癥的發(fā)生發(fā)展，但其具體作用機(jī)制仍需進(jìn)一步深入研究。

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收稿日期：2019-1-17;修回日期：2019-1-25

編輯/王朵梅作者簡(jiǎn)介：裴金仙（1984.8-），女，山西平遙人，碩士，主治醫(yī)師，主要從事病毒性肝炎發(fā)病的免疫機(jī)制研究