白介素-17、趨化因子10在兒童自身免疫性肝炎中的變化及意義

唐瑩瑩

(湖北省武漢兒童醫(yī)院 消化內科一病區(qū), 湖北 武漢, 430015)

自身免疫性肝炎是一種以轉氨酶升高、自身抗體陽性、免疫球蛋白G(IgG)明顯升高的肝臟炎癥性疾病，病理組織學可表現(xiàn)為界面性肝炎、多小葉塌陷、匯管區(qū)漿細胞浸潤。該病可發(fā)生于各個年齡段，尤以中老年、青少年為主，女性和男性患病比例約為4∶1[1-2]。既往該病在兒童中的發(fā)病率較低，但近年來也有較多單中心報道[3-4]顯示，兒童自身性免疫性肝炎的發(fā)病率呈逐年升高趨勢。與成年人相比，兒童自身免疫性肝炎的臨床特點多表現(xiàn)為急性起病、進展迅速，且免疫抑制治療效果好。

自身免疫性肝炎的發(fā)病機制至今仍未闡明，但較多研究[5-6]指出，遺傳易感性、分子模型學說、T淋巴細胞等細胞因子均參與自身免疫性肝損傷的發(fā)生。白介素-17(IL-17)是輔助性T細胞17(Th17)執(zhí)行主要生物功能的重要細胞因子，在一些變態(tài)反應性疾病、自身免疫性疾病中均有參與[7]。趨化因子(CXCL)是趨化免疫細胞定向遷移的一種細胞因子，有報道[8]稱CXCL可在較多自身免疫性疾病中發(fā)揮促炎作用，如自身免疫性甲狀腺炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類風濕性關節(jié)炎等。本研究觀察兒童自身免疫性肝炎患兒IL-17、趨化因子10(CXCL10)的變化，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析2008年1月—2018年1月本院接診的80例自身免疫性肝炎患兒臨床資料，并設為觀察組。兒童自身免疫性肝炎臨床特點[9-10]: ① 轉氨酶明顯升高; ② 自身抗體陽性: Ⅰ型為抗核酸抗原抗體(ANA)和(或)抗平滑肌抗體(SMA)≥1∶20; Ⅱ型為抗肝腎微粒體抗體(anti-LKM-1)和(或)肝細胞漿1型抗體(ani-LC-1)為陽性; ③ IgG明顯升高; ④ 肝臟病理組織學顯示界面性肝炎、多小葉塌陷、匯管區(qū)漿細胞浸潤等表現(xiàn); ⑤ 肝臟病理炎癥程度分級1～4級，纖維化分期1～4期。

納入標準: ① 具有兒童自身免疫性肝炎臨床特點; ② 肝臟病理檢查顯示甲、乙、丙、丁、戊病毒性肝炎血清學檢查為陰性; ③ 銅蘭蛋白、α1抗胰蛋白酶結果正常; ④ 巨細胞病毒抗體(CMV IgM)、EB病毒抗體(EBV IgM)為陰性; ⑤ 年齡1～18歲; ⑥ 臨床資料完整。排除遺傳性疾病、病毒性肝炎、藥物性肝炎、脂肪肝、原發(fā)膽汁性肝硬化等。另選擇同期本院接受體檢的健康兒童60例作為對照組, 2組兒童一般資料比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05), 具有可比性。見表1。

表1 2組兒童一般資料比較

1.2 方法

采集所有受試者納入研究后第2天空腹靜脈血5 mL, 于室溫靜置2 h后，以3 000轉/min的速度離心10 min, 提取上層清液后置于低溫冷凍箱中儲存以備檢測，丙氨酸轉氨酶(ALT)、谷草轉氨酶(AST)的檢測使用速率法，總膽紅素(TBIL)的檢測為釩酸鹽法，試劑盒均購自上海科華生物工程股份公司。血清IL-17、CXGL10的檢測均使用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)進行, IL-17試劑盒購于上海拜力生物科技有限公司，CXGL10試劑盒購于美國R&D公司。使用上海精科責任有限公司生產的CF-2245全自動生化分析儀，操作方式嚴格按照儀器、試劑盒說明書實施。

1.3 統(tǒng)計學分析

采用SPSS 18.0軟件包處理數(shù)據(jù)，計量資料均為正態(tài)分布，采用均數(shù)±標準差表示，組間比較使用獨立樣本t檢驗，計數(shù)資料以率表示，行χ2檢驗，血清IL-17、CXCL10、生化指標以及兒童自身免疫性肝炎發(fā)生的相關性分析使用Pearson相關性分析，兒童自身免疫性肝炎的發(fā)病危險因素采用Logistic回歸分析,P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結 果

2.1 2組生化指標和血清IL-17、CXCL10比較

觀察組ALT、AST、TBIL、IgG、IL-17、CXCL10均顯著高于對照組(P<0.05), 見表2。

2.2 血清IL-17、CXCL10與相關生化指標的相關性分析

Pearson相關性分析顯示，血清IL-17與ALT、AST、TBIL、IgG均呈正相關(r=0.957、0.952、0.937、0.889,P<0.05), 血清CXCL10與ALT、AST、TBIL、IgG均呈正相關(r=0.957、0.950、0.944, 0.876,P<0.05), 見圖1。

表2 2組生化指標和血清IL-17、CXCL10比較

ALT: 丙氨酸轉氨酶; AST: 谷草轉氨酶; TBIL: 總膽紅素; IgG: 免疫球蛋白G; IL-17: 白介素-17; CXCL10: 趨化因子10。

與對照組比較, *P<0.05。

A: 血清IL-17與ALT; B: 血清IL-17與AST; C: 血清IL-17與TBIL; D: 血清IL-17與IgG; E: 血清CXCL10與ALT;

F: 血清CXCL10與AST; G: 血清CXCL10與TBIL; H: 血清CXCL10與IgG

圖1 血清IL-17、CXCL10與相關生化指標的相關性散點圖

2.3 血清IL-17、CXCL10與兒童自身免疫性肝炎的相關性分析

將是否發(fā)生兒童自身免疫性肝炎作為自變量，將血清IL-17、CXCL10作為因變量，通過Pearson相關性分析顯示，血清IL-17、CXCL10與兒童自身免疫性肝炎的發(fā)生呈正相關(r=0.634、0.592,P<0.05)。通過Logistic回歸分析顯示，血清IL-17、CXCL10均是兒童自身免疫性肝炎發(fā)病的獨立危險因素(P<0.05), 見表3。

表3 血清IL-17、CXCL10與兒童自身免疫性肝炎的

IL-17: 白介素-17; CXCL10: 趨化因子10。

3 討 論

相關數(shù)據(jù)[11]顯示，近年來兒童自身免疫性肝炎的發(fā)病率為2%～5%, 最小發(fā)病年齡為6個月，并呈逐漸升高趨勢。目前對于兒童自身性免疫肝炎尚無準確標準，在成人評分系統(tǒng)中的簡易評分標準難以區(qū)分自身免疫性肝炎和自身免疫性膽管炎，因此不適用于兒童診斷。近年來，臨床學者[12-13]總結兒童自身性免疫肝炎的特點主要有: ① 實驗室指標轉氨酶升高、IgG升高, ANA和(或)抗線粒體抗體(AMA)陽性或抗LKM-1陽性，但兒童自身抗體滴度低于成年人; ② 組織學呈界面性肝炎、多小葉塌陷、匯管區(qū)漿細胞浸潤等，浸潤炎細胞主要為淋巴細胞、漿細胞。兒童自身免疫性肝炎的臨床表現(xiàn)具有多樣化特點，有40%的患兒臨床癥狀和急性病毒性肝炎較為相似，如惡心嘔吐、厭食、進行性黃疸加重等, 25%～40%的患兒起病隱匿，可出現(xiàn)乏力、反復黃疸、頭痛等不典型癥狀，診斷困難, 10%左右的患兒可因食管靜脈曲張出血、脾腫大、便血等相關門脈高壓并發(fā)癥首次就診，但確診時已存在肝硬化，且個別患兒病情較重且進展快，若延誤診治極易誘發(fā)肝功能衰竭。

目前認為肝臟抗原特異性調節(jié)T細胞和效應細胞的數(shù)量及功能平衡在肝臟自身免疫耐受中發(fā)揮著重要作用。Th17是近年來新發(fā)現(xiàn)的輔助T細胞亞型，在自身免疫性疾病和機體的防御反應中發(fā)揮著重要作用[14-15]。Th17主要分泌IL-17、IL-21、IL-22等，其中IL-17是最重要的一種分泌因子，也是執(zhí)行主要生物功能中的主要細胞因子，對中性粒細胞具有較強的趨化效果[16]。楊浦娟等[17]研究顯示，在較多肝臟疾病中，均可見IL-17的大量表達，且其可刺激肝臟分泌多種細胞因子，繼而加劇肝損傷程度。

CXCL10屬于Th1相關的CXC類趨化因子，主要介導著Th1型的炎癥反應，參與淋巴組織發(fā)育、造血作用、炎癥反應、新血管生成、白細胞遷移、傷口修復等，在正常免疫應答過程中, CXCL10可通過驅使白細胞在受傷或感染部位定位，起到保護機體的作用，但在特定情況下，免疫細胞也會由于過度的活化而對正常組織產生攻擊，引發(fā)自身免疫性疾病[18]。李曉陽等[19]研究顯示，慢性乙型肝炎患者的肝組織和血清中CXCL10的表達明顯升高，且與ALT呈正相關，參與著肝功能損傷和疾病進展。Czaja A J[20]研究也指出, CXCL10是肝病過程中將淋巴細胞聚集到肝臟的重要因素，進一步加劇肝損傷，并認為其用于診斷肝臟損傷程度和治療效果評價中具有積極意義。

本研究結果顯示，在兒童自身免疫性疾病中血清IL-17、CXCL10表達明顯升高，與生化指標ALT、AST、TBIL、IgG以及自身免疫性疾病的發(fā)生呈正相關，通過分析是由于IL-17可誘導巨噬細胞、內皮細胞、上皮細胞等分泌多種炎癥介質和趨化因子，募集中性粒細胞產生大量炎癥反應，而CXCL10對巨噬細胞、單核細胞、T淋巴細胞、自然殺傷細胞、樹突狀細胞也均具有趨化作用，二者共同參與著肝臟炎癥活動，造成肝組織損傷，并促使疾病進展。

綜上所述，兒童自身免疫性肝炎患兒血清IL-17、CXCL10的表達明顯升高，二者參與著肝臟炎癥活動，在兒童自身免疫性肝炎病理損傷中發(fā)揮著重要作用。