DACT1錯義突變與先天性心臟病易感性的相關性研究

王 鶴 彭 瑞 段文元 王紅艷, 姚曉英

先天性心臟病(CHD)在新生兒中發病率約0.9%[1, 2]。Wnt信號通路是調控心臟發育的重要信號通路之一，主要包括經典的Wnt/β-catenin信號通路、非經典的平面細胞極性(PCP)信號通路和Wnt/Ca2+信號通路。Dishevelled(DVL)蛋白在這3條Wnt信號通路中均發揮重要作用，是Wnt信號通路的一個中樞調節蛋白[3, 4]。Wnt信號通路的失調會導致早期心臟發育異常或CHD[5-8]。

DACT1基因編碼的DACT1蛋白是Wnt信號通路的負調控因子。DACT1與DVL蛋白相互結合并在細胞內共定位，且與Axin、GSK-3、CKI、β-catenin組成復合體[4]。DACT1主要通過拮抗DVL2的功能發揮作用。DACT1蛋白可促進VHL與DVL2互作，加速DVL2泛素化，從而介導因蛋白聚集引發的自噬，降解DVL2[9]。過表達非洲爪蟾XDpr(DACT1同源基因)會抑制Dvl介導的經典和非經典Wnt信號通路，同時降低β-catenin應答基因及JNK活性；反之，抑制內源性XDpr基因表達，β-catenin和JNK信號通路都被激活[4]。在非洲爪蟾卵細胞中敲低XDpr后，亦有類似Wnt信號通路過度激活的表型，表現為脊索和頭部結構缺失[4]；敲除小鼠Dact1基因，PCP信號通路失調，純合突變小鼠幾乎在出生后1 d內全部死亡，泌尿生殖系統和消化道發育異常，部分新生小鼠還存在脊柱裂[10, 11]。人DACT1基因突變或表達失調可導致神經管畸形(NTD)、結腸癌或肝細胞癌[12-14]。但DACT1基因在心臟發育或CHD中的作用還未見報道。本研究擬篩選與CHD相關的DACT1基因突變，并對突變的生物學功能進行初步研究。

1 方法

1.1 倫理和知情同意 本研究方案和外周靜脈血的收集均經復旦大學生命科學學院倫理委員會批準[倫研批第(216)號]。受試者或其父母/監護人簽署知情同意書。……