何煥清,陳淑娟,黃育江,肖自添**,劉 明,徐 江,邱遠輝
(1.廣東省農(nóng)業(yè)科學院蔬菜研究所,廣東省草菇科技創(chuàng)新中心,廣東省蔬菜新技術研究重點實驗室,廣東 廣州 510640;2.西藏雪芝源生物科技有限公司,林芝市質量協(xié)會,西藏 林芝 860000;3.湛江市農(nóng)業(yè)科學研究院,湛江市金秋食用菌科學研究所,廣東 湛江 524000)
白肉靈芝(Ganoderma leucocontextum),是原產(chǎn)于高山櫟林中的一種川藏高原地區(qū)特有靈芝品種[1]。其最大特點是外表接近普通有柄赤靈芝,菌蓋表面呈紅色或深紅色,有漆狀光澤;菌肉呈淺白色(雖然不同栽培環(huán)境條件、不同季節(jié)和不同白肉靈芝菌株的子實體顏色有差異,但其菌肉均明顯比普通赤芝的菌肉色淺);菌柄較短,呈黑紅色,有漆狀光澤,菌柄內(nèi)為白色海綿狀[2]。在西藏林芝地區(qū)及周邊一些地方有悠久的食用白肉靈芝的歷史,公元8世紀已記載在藏醫(yī)藥典中。20世紀中葉在達波、工布和瓊波等山區(qū)鄉(xiāng)村,山民們采收野生白肉靈芝,零星銷售,作為營養(yǎng)品和中藥材使用。由于是野生,所以產(chǎn)量少。白肉靈芝具有補氣安神、止咳平喘、抗缺氧、延年益壽的功效[2]。用于高原反應、眩暈不眠、心悸氣短、神經(jīng)衰弱、虛勞咳喘的輔助治療[2]。
據(jù)調研,目前為止有據(jù)可查,白肉靈芝最早種植時間是在1995年。當時在貴州省威寧地區(qū)有少量白肉靈芝(當?shù)亟小鞍仔撵`芝”) 栽培。1996年,已出現(xiàn)大棚種植白肉靈芝,標本已存入貴州省科學院生物研究所真菌室。
2011年開始,一些科研單位如西藏自治區(qū)農(nóng)牧科學院蔬菜研究所、廣東省微生物研究所、林芝市科技局科技示范基地、中國科學院微生物研究所、廣東省農(nóng)業(yè)科學院蔬菜研究所等先后開展了白肉靈芝分類鑒定[3]、馴化栽培研究[4]、活性成分研究[5-6]及栽培技術推廣[7-8]。在西藏林芝市栽培的白肉靈芝用水煮時氣味奇香,水煮的湯液微苦,是白肉靈芝所特有的甘苦味。白肉靈芝多糖、總三萜含量較高。作者2017年在林芝市巴宜區(qū)的白肉靈芝栽培基地進行取樣,送廣州分析測試中心檢測,結果顯示靈芝多糖含量4.21%、總三萜含量2.41%(廣州分析測試中心報告編號F201706397-1-1)。
白肉靈芝栽培方式有段木栽培和代料栽培。段木栽培的子實體質地緊實、漆樣光澤好,賣價高。白肉靈芝在西藏自治區(qū),四川、貴州、云南等地批量栽培,其他地方也進行引種試驗性栽培。主要對白肉靈芝段木栽培技術要點進行總結。
白肉靈芝栽培歷史較短,栽培普及率較低。多年進行白肉靈芝栽培的菇農(nóng)實踐證明,白肉靈芝菌種較易退化,建議栽培時通過采集野生白肉靈芝或人工栽培的白肉靈芝子實體進行菌種分離,并進行出菇試驗后再擴大栽培。采摘邊緣仍在生長的子實體(有白邊) 進行分離。分離時切取菌柄與菌蓋交界處一小塊組織,放入PDA培養(yǎng)基,(25±1)℃避光培養(yǎng),1 d~2 d后菌絲萌發(fā),8 d左右長滿試管。長滿的試管進一步純化,獲得純度較高的菌種。菌種保藏與其他食用菌一樣,采取低溫斜面保藏法,通常保存在4℃~8℃冰箱中,3個月~6個月轉管1次。
白肉靈芝段木栽培整個栽培周期為2年~3年,通常9月下旬開始制包、接種,一直至春節(jié)前后,最遲通常3月初結束。保溫大棚栽培時,長好的菌包3月中旬開始覆土,通常清明節(jié)前后覆土完畢;4月中旬開始出芝,9月上旬結束;1年出芝2批,栽培周期2年,共出芝4批,段木直徑比較大的菌包可以采收3年。白肉靈芝最適宜的生長發(fā)育溫度為25℃左右,不同地方栽培時間要根據(jù)出芝最佳的自然溫度來定。在條件適宜情況下段木接種培養(yǎng)60 d~75 d后,即可覆土,覆土后再經(jīng)過20 d~45 d,芝蕾才會產(chǎn)生,從芝蕾產(chǎn)生到成熟采收需35 d左右(具體時間與環(huán)境溫度及采摘標準等有關)。
培養(yǎng)基參考配方:馬鈴薯200 g、葡萄糖20 g、磷酸二氫鉀1 g、磷酸氫二鉀1 g、硫酸鎂0.5 g、蛋白胨2 g、維生素B15 mg、瓊脂18 g~20 g,水1 000 mL,pH值自然。培養(yǎng)基制作工藝流程:培養(yǎng)基原料稱量→水煮去皮馬鈴薯→過濾→加瓊脂煮溶→加葡萄糖等成分→續(xù)煮攪拌至完全溶解→調測容量1 000 mL→分裝→塞棉塞→滅菌→擺斜面→檢驗備用→接種。母種轉接入斜面培養(yǎng)基后,貼上標簽,避光培養(yǎng)。在培養(yǎng)溫度20℃~25℃,空氣相對濕度70%環(huán)境下,試管母種接種后約10 d左右長滿試管,通常長滿后3 d~10 d用于接種原種比較合適。
培養(yǎng)基參考配方(原種、栽培種可以用相同配方):雜木屑78%、玉米粉5%、麥麩15%、蔗糖1%、石膏粉1%,含水量60%。培養(yǎng)基制作工藝流程:原料準備、稱量→培養(yǎng)基的調配(拌料)→裝瓶(袋)→滅菌→接種(原種制作用母種接種,栽培種制作用原種接種)→培養(yǎng)→質量鑒定→成品菌種。接種后避光培養(yǎng),培養(yǎng)室溫度需控制在23℃~25℃,空氣相對濕度在60%~70%。培養(yǎng)室需要一定的通氣量,以保持空氣新鮮。溫度過高,菌絲雖然長得快,但培養(yǎng)基易失水,菌絲易老化、發(fā)黃,培養(yǎng)室通風不良,菌絲軟弱無力,易被污染,影響菌種質量。培養(yǎng)30 d左右長滿菌袋(菌種袋規(guī)格為寬15 cm、長28 cm的菌種袋),通常長滿菌袋的菌種即可使用,盡可能在菌種有原基形成前用完。
原種、栽培種也可以采用麥粒、玉米粒為主原料添加輔料等的培養(yǎng)基,參考配方為麥粒或玉米粒(水煮至透而不爛)90%、麥麩5%、玉米粉3%、蔗糖1%,石膏粉1%,含水量約60%。接種培養(yǎng)與木屑為主的培養(yǎng)基制作方法相同。如果時間緊迫,需要縮短菌種培養(yǎng)時間,用麥粒、玉米粒制作原種、栽培種時,培養(yǎng)料可只裝菌袋容量的1/3左右;接種后輕輕揉搓培養(yǎng)料,讓所接入的菌種與麥粒、玉米粒充分接觸;培養(yǎng)過程中根據(jù)菌絲生長情況,進行2次~3次揉搓,可大大縮短菌種培養(yǎng)時間,效果明顯。采用此法制種時要求培養(yǎng)環(huán)境較好,干凈衛(wèi)生,揉搓時動作要輕,減少污染的發(fā)生。
菌種制作具體時間要根據(jù)栽培菌包制作的時間來安排,從制作母種到栽培種培養(yǎng)成熟一般需要70 d左右。采用麥粒、玉米粒為主的培養(yǎng)基加揉搓方法制作菌種,從母種制作至栽培種成熟時間可縮短至50 d左右,也可直接將原種當栽培種使用。菌種長好后,最好及時使用,一般不用已長出原基的菌種。
白肉靈芝段木栽培工藝流程:接種前準備(采伐→原木截段→裝袋→滅菌) →接種→發(fā)菌管理(同時進行靈芝栽培場選擇、犁翻曬白作畦清溝、搭栽培棚、場地殺蟲消毒等)→下地排場→蓋農(nóng)膜→出芝管理→采收→烘干→分級包裝→過冬防凍→第二年出芝管理、采收→廢料清理、栽培結束。
除松、杉、柏等針葉樹以及含有殺菌性物質的闊葉樹,如樟科、桉屬等樹種外,一般闊葉樹原木都能用于栽培白肉靈芝。從秋天紅葉結束至次年春新芽萌動之前均可擇伐,一般選擇10月至次年3月,或在木材砍伐中選用枝丫材(口徑5 cm~15 cm)。
用鋸將原木鋸成長15 cm~30 cm的短段木(根據(jù)習慣和覆土時是豎放還是橫放排放),即可裝袋。如果木段含水量偏低,可以用清水浸泡增加含水量。一般段木含水量40%左右比較合適。
常用口徑22 cm的低壓膜塑料袋,剪成長52 cm,裝進30 cm的短段木,兩頭段木面也可以放進一些木屑營養(yǎng)劑(木屑、麥軼、蔗糖、黃豆、石膏),兩頭用繩子綁緊。一般直徑大的木段單獨裝1袋,小的可以多根綁在一起裝袋,裝袋時要特別注意,木段斷面要平滑,不要刺破袋子。
通常用常壓灶滅菌,達到100℃需要保持10 h~12 h,溫度切忌忽高忽低,應保持穩(wěn)定。高海拔氣壓低的地區(qū)要用壓力鍋,讓鍋內(nèi)溫度能達到100℃。滅菌結束時,不能馬上將灶門打開,應悶一段時間,待溫度自然降到40℃~50℃后,才能出灶。
滅好菌的木段搬入接種室,待溫度降到25℃左右進行接種,環(huán)境氣溫低時要在30℃左右接種,不宜過冷。接種時嚴格按無菌操作方法進行,盡可能選擇天氣晴朗的清晨接種,減少污染。
接種后的菌棒應放在通風、保溫、干凈衛(wèi)生的室內(nèi)避光培養(yǎng),發(fā)菌室要用氣霧消毒劑熏蒸消毒,一般消毒后1 d~2 d即可使用。菌袋的堆放可根據(jù)氣候和培養(yǎng)條件而定。低溫季節(jié)接種的,栽培袋密度要高,以利于加溫,高溫季節(jié)接種的栽培袋,密度要低,以利于散熱。培養(yǎng)室初期溫度應控制在20℃~22℃,2 d~3 d菌種菌絲開始萌發(fā),1周內(nèi)把溫度逐漸提高到22℃~26℃,有利于菌絲生長,7 d左右菌絲會聯(lián)結成片。發(fā)菌環(huán)境空氣相對濕度應維持在60%~70%。一般接種后15 d左右,隨著菌絲生長,呼吸量逐漸加大,袋內(nèi)會有大量水珠產(chǎn)生,這時需加強通風或降溫。每天根據(jù)天氣情況午后開門窗通風換氣1次~2次。培養(yǎng)25 d左右后,菌絲可長滿整個段木表面。由于菌絲大量生長產(chǎn)生熱量,室內(nèi)溫度也會隨之升高,這時應采取各種措施控制溫度、濕度的變化。通過打開門窗換氣,可增加袋內(nèi)氧氣,促進菌絲向木質層生長。在培養(yǎng)過程中,菌棒位置需上下、內(nèi)外翻堆。這樣既可以在輪換中及時發(fā)現(xiàn)處理已被感染雜菌的菌棒。經(jīng)過65 d左右培養(yǎng),菌絲基本長透(圖1)。長透后如果未到覆土季節(jié),可以降低溫度繼續(xù)培養(yǎng),防止原基形成。

圖1 培養(yǎng)的菌包Fig.1 The cultured bags of growth mycelia
栽培場的選擇與搭棚:選擇朝東南、座西北,水源方便,腐植質多,具有肥沃沙質泥土的山谷、農(nóng)田、林地或果園,場地選好后,要提前犁地曬白,耙畦清溝,防止下雨積水。在西藏自治區(qū)或其他高海拔地區(qū)栽培時,要搭建保溫、防風的塑料大棚,加蓋黑紗網(wǎng)。低海拔的地方可以搭遮蔭棚(可用黑紗網(wǎng)或草簾),高度2 m~2.5 m。棚內(nèi)作畦,寬1.5 m左右,以每二畦搭1個拱形棚,中心高度一般1.7 m左右,這種棚架保溫、保濕性能好,出芝整齊,產(chǎn)量和質量都好。覆土:用利刀將菌袋劃破,脫下菌袋,將菌木擺放在畦面上,菌木間隔約10 cm,擺放好后覆上沙土,覆土厚3 cm左右(圖2)。覆土后,噴1次水,根據(jù)覆土材料含水量來確定噴水量,覆土的濕度為“手握成團,甩手能撒”為度。

圖2 菌包覆土Fig.2 Soil casing
保持覆土干而不燥(覆土表面不發(fā)白),一般晴天噴水霧1次,陰天隔天噴水霧1次,具體視土壤含水量而定,保持土壤含水量在20%左右。在氣溫、濕度等條件適宜情況下,菌木下地后10 d~20 d可出現(xiàn)原基,保持栽培場內(nèi)空氣相等濕度在90%以上,溫度25℃左右,根據(jù)空氣相對濕度和覆土含水量來噴水加濕。同時確保通風換氣,人進入棚內(nèi)感覺清爽為宜。通常每個菌木段上會形成多個原基,及時疏蕾,去弱留強,每個段木上保留1個~2個粗壯的原基。原基發(fā)育到一定程度,在頂端會出現(xiàn)1個突起,這就是菌蓋的原基(圖3),此時要加強通風換氣,維持溫度25℃左右,通過噴水使空氣相對濕度保持在90%~95%。從原基形成開始,經(jīng)過30 d左右的生長,菌蓋邊沿黃白色生長圈逐漸消失時,即可采收(圖 4)。

圖3 白肉靈芝子實體原基Fig.3 Primordium of Ganoderma leucocontextum

圖4 即將采收的白肉靈芝子實體Fig.4 The postharvest fruiting body of Ganoderma leucocontextum
白肉靈芝子實體的多糖、三萜含量較高,通常以收獲的子實體作為栽培的主產(chǎn)品,采收標準為菌蓋邊緣黃白色且寬度為1 cm左右,至黃白色邊剛剛消失時采收,最好不要等到大量孢子粉彈射時再采收(據(jù)觀察白肉靈芝的孢子粉產(chǎn)量遠不如赤靈芝)。為使產(chǎn)品干凈、少雜質,一般采用鋒利剪刀或其他刀具從菌柄基部附近切剪。特別是加工用產(chǎn)品的采收,不能直接用手擰拔,否則菌柄基部會帶有泥土及培養(yǎng)基等雜質,嚴重影響產(chǎn)品質量。采收后的白肉靈芝子實體裝入干凈容器,及時干燥加工。
采收后的白肉靈芝子實體可以曬干或烘干(圖5),含水量盡量保持在11%以下。用塑料袋密封保存。白肉靈芝特別容易發(fā)生蟲害,建議無論曬干還是烘干產(chǎn)品,在包裝前用50℃~60℃溫度再烘60 min左右,冷卻后再用雙層薄膜袋包裝。包裝好的靈芝放陰暗干燥處保存,有條件的放在不高于15℃的冷庫保存。

圖5 西藏白肉靈芝子實體干品Fig.5 Dry fruiting body of Ganoderma leucocontextum