飼料中添加膽汁酸和維生素E對慢性熱應激肉雞生長性能及肝腎功能的影響

魏 霖， 王喜峰， 賀紹君， 劉德義

(安徽科技學院 動物科學學院，安徽 鳳陽 233100)

全球氣候日益變暖溫度逐漸升高，對畜牧生產(chǎn)造成了不利的影響。肉雞因其自身散熱能力有限,無法及時的調(diào)控自身體溫。發(fā)生熱應激后,會導致采食量降低[1],生長緩慢[2],活動能力減弱,抵抗力下降[3],易引發(fā)疾病,進而影響肉雞的生長性能和雞肉品質(zhì)。同時,有研究表明,熱應激對機體的肝腎功能也會造成不利的影響[4-5]。

膽汁酸(BA)是膽汁的主要成分,是動物體內(nèi)膽固醇代謝過程中產(chǎn)生的一系列固醇類物質(zhì),具有較強的表面活力,可促進脂肪乳化,提高脂肪的消化率,促進脂質(zhì)和脂溶性維生素的消化吸收。維生素E(VE)又稱為生育酚,是家禽必需的一種脂溶性維生素,參與體內(nèi)的免疫、抗氧化功能,在家禽生產(chǎn)中起著十分重要的作用。當家禽缺乏VE 時,有氧代謝產(chǎn)物,如氧自由基、羥自由基及過氧化物等對生物膜上不飽和脂肪酸及酶蛋白巰基的氧化作用增強,導致其結(jié)構(gòu)和功能的破壞[6]。及時補充VE,在維持動物生長發(fā)育上起到一定的作用,可提高機體抵抗力和抗應激能力[7]。同時可通過提高機體的抗氧化能力來有效提高動物的生長性能[8-9],在飼糧中添加VE可有效的抑制慢性熱應激條件下白肌肉(PSE肉)的產(chǎn)生。王顯慧等[10]研究指出,日糧中添加200 mg/kg的VE 可顯著提高肉雞免疫能力,抗氧化能力及屠宰率。BA可以通過參與調(diào)節(jié)脂質(zhì)的消化代謝來提高動物的生長和生長性能,減輕肝腎負擔,保護機體。程偉偉等[11]的研究指出,日糧中添加500 mg/kg BA能顯著提高肉雞前期生長性能,并且能改善肉雞屠宰性能,對血液中脂肪代謝也有一定影響。李祥林等[12]的研究指出,BA可以顯著改善肉雞生長性能,促進脂肪吸收,保護肝膽健康、提高采食量。但飼料中添加膽汁酸能否進一步提高VE功能的報道較少,本試驗研究在模擬熱應激環(huán)境下,BA與VE聯(lián)合應用對肉雞生長性能及肝腎功能的影響,為養(yǎng)殖實踐提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

膽汁酸(山東龍昌動物保健公司,純度30%,批號:魯飼添(2014)H14005);維生素E(棗莊東陽商貿(mào)有限公司,純度99%,批號:蘇飼添字(2014)503201)。

1.2 試驗日糧配方與營養(yǎng)水平

參照我國農(nóng)業(yè)行業(yè)標準雞飼養(yǎng)標準(NY/T 33-2004)配制試驗肉雞的基礎日糧,飼料配方及營養(yǎng)水平詳見表1。

表1 基礎日糧配方及營養(yǎng)水平

注:1.預混料為每kg飼糧提供:VA 3 500 IU,VE 30 IU(30 mg),VD 3250 IU,VB 11.5 mg,VB64.0 mg,VB120.03 mg,泛酸11 mg,煙酸30 mg,生物素0.12 mg,葉酸1.3 mg,膽堿1 000 mg,Fe 80 mg,Zn 75 mg,Cu 10 mg,Se 0.35 mg,Mn 60 mg,I 0.3 mg;2.表中營養(yǎng)指標數(shù)值均為計算值。

1.3 試驗動物處理

試驗選用200只1日齡科寶500肉雞,適應性飼養(yǎng)21 d,按照肉雞飼養(yǎng)標準,溫度控制于34～35 ℃,在此基礎上每周下降2～3 ℃,于22 d開始正式試驗,隨機分為5組,分為常溫對照組(CON)、熱應激對照組(HS)、試驗組分別添加500 mg/kg BA(BA組)、200 mg/kg VE(VE組)、500 mg/kg BA+200 mg/kg VE(BA組+VE組),每組4個重復組,每個重復組10只雞。CON組溫度為23±1 ℃,其余組飼養(yǎng)溫度為32±1 ℃,相對濕度均為50%～60%,自由飲水,飼養(yǎng)期間按照常規(guī)免疫流程進行免疫接種,免疫流程如表2。

表2 常規(guī)免疫流程

注:按照說明書劑量使用,并從有資質(zhì)的經(jīng)營部門采購

1.4 樣品采集與測定

于試驗第21 d起,以一個重復為單位,記錄每日采食量,每周記錄每籠雞體重。

平均日增重(ADG)=總增重/(只數(shù)×天數(shù))；

平均日采食量(ADFI)=總采食量/(只數(shù)×天數(shù))；

料肉比(F/G)=采食量/增重×100%。

試驗肉雞飼養(yǎng)至42 d時,分別從各重復中隨機挑選2 只,翅下靜脈采血10 mL。

于4 ℃冰箱內(nèi)保存12 h,以3 500 r/min離心10 min,收集血清,測定指標。

谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、尿素(UREA)、尿酸(UA)、總膽紅素(T-Bil)、直接膽紅素(D-Bil)含量測定試劑盒均購于深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司,采用邁瑞B(yǎng)S-200全自動生化分析儀測定,試驗方法均按照說明書進行。

1.5 數(shù)據(jù)分析

采用SPSS 17.0軟件對試驗數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析,所有試驗數(shù)據(jù)用“平均值±標準差”表示,采用最小二乘法(LSD法)對數(shù)據(jù)進行單因素方差分析。P<0.1表示有一定的趨勢,P<0.05表示差異顯著,P<0.01表示差異極顯著。

2 結(jié)果與分析

各組間肉雞生長性能、血清肝腎功能指標數(shù)據(jù)詳見表3～5。其中,由表3可知,飼養(yǎng)至35 d時,與CON組相比,其余各試驗組ADG均顯著降低(P<0.01),ADFI均顯著降低(P<0.01),F/G均顯著提高(P<0.01)。飼養(yǎng)至42 d時,與CON組相比,其余各試驗組ADG均顯著降低(P<0.01),ADFI均顯著降低(P<0.01);F/G均顯著提高(P<0.01)。

表3 膽汁酸、維生素E單獨或聯(lián)合添加對慢性熱應激肉雞生長性能的影響

注：同行數(shù)據(jù)標小寫字母不同者為差異顯著(P<0.05),大寫字母不同者為差異極顯著(P<0.01)下表同。

由表4可知,在35 d時,與CON組相比,HS組、BA組、BA+VE組AST和ALT含量有增加的趨勢(P<0.1),VE組AST和ALT含量有降低的趨勢(P<0.1),HS組D-Bil含量有增加的趨勢(P<0.1);與HS組相比,VE組D-Bil含量顯著降低(P<0.05),BA組和BA+VE組D-Bil含量有降低的趨勢(P<0.1);與HS組相比,其余各試驗組T-Bil含量均有降低趨勢(P<0.1);在42 日齡時,與CON組相比,其余各試驗組AST含量均有增加趨勢(P<0.1),HS組ALT含量有增加趨勢(P<0.1),HS組D-Bil含量有下降趨勢(P<0.1);與HS組相比,BA組和VE組ALT含量顯著降低(P<0.05),BA+VE組ALT含量有降低趨勢(P<0.1),BA組和VE組D-Bil含量均有下降趨勢(P<0.1),BA+VE組D-Bil含量顯著增加(P<0.01);與BA+VE組相比,其余各試驗組D-Bil含量均顯著增加(P<0.01)。

表4 膽汁酸、維生素E單獨或聯(lián)合添加對慢性熱應激肉雞血清肝功能指標的影響

表5 膽汁酸維生素E單獨或聯(lián)合添加對慢性熱應激肉雞血清腎功能指標的影響

由表5可知,在35 d時,與CON組相比,HS組UREA含量顯著增加(P<0.05),與HS組相比,VE組和BA+VE組UREA含量顯著降低(P<0.05);在42 d時,與CON組相比,BA組與VE組UA含量有降低趨勢(P<0.1),BA+VE組UA含量顯著增加(P<0.05)。與HS組相比,BA+VE組UA含量顯著增加(P<0.05),BA組與VE組UA含量有降低趨勢(P<0.1)。

3 結(jié)論與討論

3.1 飼料中添加膽汁酸和維生素E對生長性能的影響

機體在正常狀態(tài)時,體內(nèi)自身抗氧化物質(zhì)與自由基處于動態(tài)平衡狀態(tài),在受到外界刺激時,這種平衡便會被打破,自由基會對各種生物分子產(chǎn)生破壞,直接導致機體出現(xiàn)不良反應。VE所具有的抗氧化特性,可以快速清除自由基,故適量添加VE會改善應激條件下的生長性能[13-14]。熱應激會導致消化功能的紊亂,抑制機體對營養(yǎng)物質(zhì)的吸收利用,而膽汁酸有助于乳化脂肪,增強脂肪酶活性,促進脂質(zhì)吸收的途徑，以提高生長性能[15]。本試驗中可以看出,BA組+VE給合并給藥在生長性能方面未出現(xiàn)協(xié)同效應,BA+VE組ADFI增加,F/G也有所增加,這說明在營養(yǎng)物質(zhì)的吸收代謝方面受到了抑制。有研究表明,過量攝入VE的條件下,會使得機體中的鈣和磷含量降低,同時日常飼喂中無法及時補充的鈣磷,會干擾維生素D的吸收利用,從而影響機體的生長性能[16]。

3.2 飼料中添加膽汁酸和維生素E對肝腎功能的影響

血清生化指標可以準確反映機體的情況,本試驗檢測肉雞血液中肝腎相關的生化指標,來判斷添加劑對慢性熱應激肉雞的改善效果。紅細胞衰老后,間接膽紅素(I-Bil)經(jīng)肝臟形成可溶于水的D-Bil,通過腎隨尿排出體外,兩種膽紅素的總和成為T-Bil,是臨床上肝功能檢測的重要指標;同時,在肝臟受損時,AST和ALT會釋放進入血液被檢出,也是肝功能的重要指標[17]。本試驗中可以看出,熱應激使得35和42 d的ALT、AST、D-Bil、T-Bil均有增加的趨勢(P<0.1),這指示熱應激對肝臟造成了損傷。

本試驗中可以看出,35 d時,HS組較CON對照組UREA、UA顯著性增加(P<0.05),這表明熱應激過程中其腎臟功能受到傷害,有研究表明,UREA和UA在指示腎功能上具有代表性,當UREA和UA含量升高時,意味著腎臟功能的退化,無法正常的進行代謝,當UREA增高時,可造成器質(zhì)性腎功能損害而引起尿路阻塞,以及腎血流量減少,腎小球濾過率降低,造成少尿,為器質(zhì)性損害的指標[18],同時,腎臟功能的下降會導致UA的排泄不足,從而使UA含量升高,導致腎功能進一步減退、嚴重腎損害,也會造成運動機能的損傷。

從本試驗可以看出,VE組與BA組較HS組各項指標均有所降低,對熱應激起到了緩解作用,但BA+VE組并未出現(xiàn)協(xié)同效應。有研究報道,補充外源性維生素E,可以克服腺苷蛋氨酸合成不足,不但可增加肝臟處理膽紅素的能力,達到降低血清膽紅素水平的治療目的,還能促進機體代謝恢復正常,改善腎功能[6]。BA作為一種乳化劑,在機體內(nèi)可以促進脂溶性VE 的吸收,本試驗中添加的VE,在BA的促進作用下,使機體蓄積了過量的VE,有研究報道,過量的VE攝入會降低血中高密度脂蛋白(HDL-C)水平,如長期持續(xù)攝入,會嚴重影響肝臟正常脂代謝,并可能引起心腦血管疾病。過量的VE蓄積產(chǎn)生有毒物質(zhì),由肝臟代謝分解,腎臟排出,這也勢必增加了肝腎的負擔,造成了肝腎的損傷。

本試驗可以看出,單獨添加500 mg/kg BA或200 mg/kg VE,均對熱應激條件下的肝腎功能方面有所改善,但兩種添加劑聯(lián)合應用時未出現(xiàn)協(xié)同效應。在日糧中添加BA聯(lián)合VE,具有改善慢性熱應激肉雞生長性能的作用,但在肝腎的保護作用上二者并未出現(xiàn)協(xié)同效應,其中以單獨添加200 mg/kg VE對生長性能和肝腎功能的改善效果最好。