子宮內膜異位癥患者血清與腹腔液中CRP、IL—8、VEGF的表達及臨床意義

魏順英 王烈宏 祁青玲

[摘要] 目的 探討子宮內膜異位癥患者血清和腹腔液中C-反應蛋白（CRP）、白細胞介素-8（IL-8）、血管內皮生長因子（VEGF）的表達及其臨床意義。 方法 收集2015年8月～2017年8月青海紅十字醫院收治的93例子宮內膜異位癥患者（子宮內膜異位癥組），根據美國生育協會評分標準（r-AFS）分期將其分為Ⅰ期（n = 19）、Ⅱ期（n = 25）、Ⅲ期（n = 28）、Ⅳ期（n = 21），并于同期隨機選取60例子宮肌瘤患者（子宮肌瘤組）和60名健康體檢者為對照（對照組）。采用酶聯免疫吸附法檢測各組血清和腹腔液中CRP、IL-8、VEGF水平。 結果 子宮內膜異位癥組患者血清CRP、IL-8、VEGF水平均高于子宮肌瘤組、對照組（P < 0.05），子宮內膜異位癥組患者腹腔液中CRP、IL-8、VEGF水平高于子宮肌瘤組（P < 0.05）。隨著疾病分期的增加，子宮內膜異位癥組患者血清、腹腔液中CRP、IL-8、VEGF水平呈逐漸增加趨勢（P < 0.05）。經Pearson積矩相關分析，子宮內膜異位癥組患者血清中CRP、IL-8、VEGF與r-AFS評分呈正相關（r = 0.639、0.712、0.655，P < 0.05），腹腔液CRP、IL-8、VEGF與r-AFS評分呈正相關（r = 0.682、0.764、0.670，P < 0.05）。CRP的ROC曲線下面積（AUC）為0.784，最佳截斷值為12.23 mg/L，靈敏度、特異性分別為0.77、0.72，準確性為0.71；IL-8的AUC為0.884，最佳截斷值為20.97 mg/L，靈敏度、特異性分別為0.82、0.76，準確性為0.78；VEGF的AUC為0.889，最佳截斷值為175.34 pg/mL，靈敏度、特異性分別為0.82、0.78，準確性為0.80；CRP、IL-8、VEGF聯合檢測的AUC為0.931，靈敏度、特異性分別為0.92、0.85，準確性為0.89。 結論 子宮內膜異位癥患者血清及腹腔液中CRP、IL-8、VEGF水平顯著升高，并且與病情進展呈正相關，早期聯合檢測有助于鑒別診斷子宮內膜異位癥及評估病情嚴重程度。

[關鍵詞] 子宮內膜異位癥；C-反應蛋白；白細胞介素-8；血管內皮生長因子

[中圖分類號] R711.71 [文獻標識碼] A [文章編號] 1673-7210（2019）04（c）-0089-05

Expression of CRP， IL-8 and VEGF in serum and peritoneal fluid of patients with endometriosis and its significance

WEI Shunying WANG Liehong QI Qingling WANG Qianyin WANG Yonghua JIA Jia

Department of Gynaecology， Qinghai Red Cross Hospital， Qinghai Province， Xi′ning 810000， China

[Abstract] Objective To explore the expression of C-reactive protein （CRP）， interleukin-8 （IL-8） and vascular endothelial growth factor （VEGF） in serum and peritoneal fluid of patients with endometriosis and its clinical significance. Methods A total of 93 patients with endometriosis （endometriosis group） admitted to Qinghai Red Cross Hospital from August 2015 to August 2017 were divided into stage Ⅰ （n = 19）， stage Ⅱ （n = 25）， stage Ⅲ （n = 28） and stage Ⅳ （n = 21） according to the American Fertility Society （r-AFS）. At the same time， 60 patients with uterine leiomyoma （uterine leiomyoma group） and 60 healthy volunteers as control group were randomly selected. The levels of CRP， IL-8 and VEGF in serum and peritoneal fluid was detected by enzyme-linked immunosorbent assay. Results The levels of serum CRP， IL-8 and VEGF in endometriosis group were higher than those in uterine leiomyoma group and control group （P < 0.05）. The levels of CRP， IL-8 and VEGF in peritoneal fluid were higher than those in patients with uterine leiomyoma group （P < 0.05）. With the increase of disease stages， the levels of CRP， IL-8 and VEGF in serum and peritoneal fluid in patients with endometriosis increased gradually （P < 0.05）. Pearson moment correlation analysis showed that serum CRP， IL-8， VEGF was positively associated with r-AFS score （r = 0.639， 0.712， 0.655； P < 0.05）， and which in peritoneal fluid was positively associated with r-AFS score （r = 0.682， 0.764， 0.670； P < 0.05）. The area under ROC curve （AUC） of CRP was 0.784， the best cut-off value was 12.23 mg/L， the sensitivity and specificity was 0.77 and 0.72， respectively， and the accuracy was 0.71. The AUC of IL-8 was 0.884， the best cut-off value was 20.97 mg/L， the sensitivity and specificity was 0.82 and 0.76， respectively， and the accuracy was 0.78. The AUC of VEGF was 0.889， the best cut-off value was 175.34 pg/mL， the sensitivity and specificity were 0.82 and 0.78， respectively， and the accuracy was 0.80. The AUC of CRP， IL-8 and VEGF was 0.931， the sensitivity and specificity was 0.92 and 0.85， respectively， and the accuracy was 0.89. Conclusion The levels of CRP， IL-8 and VEGF in serum and peritoneal fluid of patients with endometriosis are significantly elevated and positively associated with the progression of the disease. Early detection of CRP， IL-8 and VEGF is helpful to differential diagnosis of endometriosis and to evaluate the severity of the disease.

[Key words] Endometriosis； C-reactive protein； Interleukin-8； Vascular endothelial growth factor

子宮內膜異位癥是指正常子宮內膜組織在子宮腔以外的卵巢、盆腔腹膜、子宮直腸陷凹等部位異常生長及浸潤所致的病理改變，在育齡婦女中發病率為10%～15%[1-2]。報道顯示[3]，近25%的子宮內膜異位癥患者早期無典型臨床表現，患者需通過開腹或者腹腔鏡方能確診，漏診率較高。早期診斷子宮內膜異位癥并評估病情進展，對制訂針對性治療方案以改善預后具有重要意義。現有研究表明[4-5]，子宮內膜細胞逆流并種植于腹腔間質，并誘發炎性反應及促進新生血管生成是子宮內膜異位癥發病主要機制之一。C-反應蛋白（C reactive protein，CRP）、白細胞介素-8（interleukin-8，IL-8）是常見的炎癥細胞因子，有研究表明[6-7]，CRP和IL-8在子宮內膜異位癥發病過程中發揮重要作用。血管內皮生長因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）是促血管生成因子，通過特異性結合血管內皮生長因子可溶性受體-1（soluble vascular endothelial growth factor receptor-1，sVEGFR-1）而刺激血管內皮細胞，最終促進新生血管形成[8]。本研究通過檢測血清及腹腔液中CRP、IL-8、VEGF水平，旨在探討聯合檢測對子宮內膜異位癥鑒別診斷中的價值及在病情進展過程中的作用。現報道結果如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2015年8月～2017年8月青海紅十字醫院婦科門診收治的93例行腹腔鏡手術的子宮內膜異位癥患者為子宮內膜異位癥組。納入標準：①腹腔鏡術后病理組織切片經2名病理醫師確診為子宮內膜異位癥；②術前未接受過任何放化療治療。排除標準：①妊娠期及哺乳期的女性；②心功能不全者；③肝、腎功能障礙者；④平素經期不規律患者；⑤內分泌以及代謝性疾病等可能影響本研究結果的疾病患者；⑥急、慢性炎性反應性疾病患者；⑦自身免疫性疾病患者；⑧合并子宮肌瘤、子宮腺肌病、乳腺增生性疾病的患者；⑨納入研究前3個月內服用過激素類藥物治療者；⑩惡性腫瘤患者。93例患者年齡25～46歲，平均（36.24±4.50）歲；體重指數（BMI）21～28 kg/m2，平均（24.51±2.23）kg/m2；孕次1～5次，平均（2.21±0.56）次；產次1～4次，平均（1.83±0.47）次。并于同期隨機選取60例子宮肌瘤患者為子宮肌瘤組，60名健康體檢者為對照組。其中子宮肌瘤組年齡22～38歲，平均（34.09±5.21）歲；BMI 20～27 kg/m2，平均（22.95±2.86）kg/m2；孕次0～5次，平均（2.01±0.49）次；產次0～4次，平均（1.59±0.50）次。對照組年齡21～42歲，平均（35.18±5.56）歲；BMI 21～28 kg/m2，平均（23.52±3.03）kg/m2；孕次1～4次，平均（2.16±0.50）次；產次0～5次，平均（1.68±0.46）次。各組年齡、BMI、孕次、產次等基線資料比較，差異無統計學意義（P > 0.05），具有可比性。采用美國生育協會（AFS）制定的評分標準[9]從病變累及部位、大小、側別、粘連程度等進行評分，并根據積分將患者分為四期：Ⅰ期（1～5分）19例，Ⅱ期（6～15分）25例，Ⅲ期（16～40分）28例，Ⅳ期（>40分）21例。本研究所有研究對象及家屬均簽署知情同意書，且該研究獲得醫院醫學倫理委員會的批準。

1.2 方法

抽取患者入院次日清晨5 mL空腹肘靜脈血，健康體檢者于體檢當日抽取5 mL空腹肘靜脈血，將血液標本在半徑為30 cm的離心機中3000 r/min離心5 min，將血清標本置于-80℃環境下保存，留待檢測。同時子宮內膜異位癥和子宮肌瘤患者手術過程中均在腹腔鏡輔助下以穿刺針抽取5 mL位于子宮膀胱陷凹與子宮直腸陷凹處的腹腔液，在室溫環境下放置1 h，然后以3000 r/min的轉速離心5 min，留取上清液，置于-80℃環境下保存，留待檢測。采用酶聯免疫吸附法測定腹腔液和血清標本中CRP、IL-8、VEGF水平，深圳晶美生物技術有限公司提供相應的試劑盒（生產批號：120215），檢測過程中相關操作嚴格按照試劑盒上說明進行。

1.3 統計學方法

采用SPSS 21.0統計學軟件進行數據分析，計量資料用均數±標準差（x±s）表示，多組獨立樣本的比較采用方差分析，兩兩比較采用LSD-t檢驗，兩組獨立樣本的比較采用成組t檢驗；計數資料用率表示，組間比較采用χ2檢驗；采用Pearson積矩相關分析各指標間的相關性；繪制受試者工作特征曲線（ROC）評估血清CRP、IL-8、VEGF對子宮內膜異位癥的診斷價值。以P < 0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 各組血清及腹腔液中CRP、IL-8、VEGF水平比較

三組血清、腹腔液CRP、IL-8、VEGF水平經方差分析，差異有統計學意義（P < 0.05），其中子宮內膜異位癥組患者血清CRP、IL-8、VEGF水平均高于子宮肌瘤組、對照組（P < 0.05），子宮內膜異位癥組患者腹腔液CRP、IL-8、VEGF水平高于子宮肌瘤組（P < 0.05）；子宮肌瘤組與對照組血清CRP、IL-8、VEGF水平比較，差異無統計學意義（P > 0.05）。見表1。

2.2 子宮內膜異位癥不同疾病分期患者血清及腹腔液中CRP、IL-8、VEGF水平比較

子宮內膜異位癥組不同疾病分期患者血清、腹腔液CRP、IL-8、VEGF水平經方差分析，差異有統計學意義（P < 0.05），隨著疾病分期的增加，血清、腹腔液CRP、IL-8、VEGF水平呈逐漸增加趨勢（P < 0.05）。見表2。

2.3 子宮內膜異位癥患者血清及腹腔液中CRP、IL-8、VEGF與r-AFS評分的相關性分析

經Pearson積矩相關分析，子宮內膜異位癥患者血清CRP、IL-8、VEGF與r-AFS評分呈正相關（r = 0.639、0.712、0.655，P < 0.05），腹腔液CRP、IL-8、VEGF與r-AFS評分呈正相關（r = 0.682、0.764、0.670，P < 0.05）。

2.4 血清CRP、IL-8、VEGF對子宮內膜異位癥的診斷價值

ROC曲線下面積AUC評估血清CRP、IL-8、VEGF對子宮內膜異位癥的診斷價值見表3和圖1。

3 討論

子宮內膜異位癥從組織形態學方面來看為良性病變，但是卻有侵襲、轉移、浸潤等與惡性腫瘤相似的生物學特征，惡性率為0.7%～1.0%[10]。腹腔鏡檢查是臨床診斷子宮內膜異位癥的“金標準”，其缺點是有創檢查給患者身心帶來巨大痛苦，且檢查費用高昂，患者家庭難以承受[11]。尋找簡便、快捷且安全有效的標志物輔助診斷子宮內膜異位癥，一直是臨床研究的熱點。

研究表明[12-14]，脫落的子宮內膜細胞逆流經血異位種植并存活，而該過程與子宮內膜形成的新生血管、腹腔的免疫功能紊亂、炎癥細胞因子合成及分泌增加密切相關。CRP是細胞因子刺激肝臟后所分泌的急性時相蛋白，能有效反映機體急性炎癥性反應。研究報道[15-16]，異位內膜種植使血管的通透性增加，并誘導新血管形成以促進異位內膜不斷生長，該過程同時引起活化的淋巴細胞、中性粒細胞、巨噬細胞不斷分泌CRP，使子宮內免疫功能發生紊亂，炎性細胞因子的分泌失調，通過參與免疫性疾病和炎性反應，CRP增強了子宮內環境的炎性反應而使異位病灶擴大，提供了子宮內膜異位癥的發生、發展環境。IL-8主要是由內膜細胞、巨噬細胞等分泌的炎癥細胞因子，不僅介導了炎性反應的發生，同時還參促進了內皮細胞的增殖、遷移，參與新生血管的形成過程[17]。研究發現[18]，子宮內膜異位癥患者腹腔內集聚大量的炎癥細胞刺激巨噬細胞合成并釋放IL-8，增加了異位內膜基底部毛細血管的數量以及面積，進而導致異位內膜不斷的增殖、生長、浸潤。VEGF是一種具有高度特異性的血管生成因子，可促進血管內皮細胞的增殖、遷移，同時還能使微血管的通透性增加而促進血管的生長[19]。研究證實[20]，VEGF表達水平升高引起上皮下的血管網大量增生，為脫落的子宮內膜種植在腹膜上提供足夠的血供，促進異位內膜生長而形成子宮內膜異位癥。大量研究均證實[15，21-22]，血清CRP、IL-8、VEGF參與了子宮內膜異位癥的發病過程。

本研究結果顯示，子宮內膜異位癥患者血清及腹腔液中CRP、IL-8、VEGF水平均高于子宮肌瘤患者和健康體檢者，提示CRP、IL-8、VEGF與子宮內膜異位癥發病密切相關，與有關研究結果一致[15，21-22]，即子宮內膜異位種植于腹腔刺激腹腔炎性反應，導致免疫功能紊亂和炎性因子分泌失調，為子宮內膜異位癥提供發生發展環境，而VEGF通過刺激毛細血管增生并促進病灶組織部位新生血管大量生成，為內膜異位生長提供物質基礎。同時本研究結果也觀察到，患者腹腔液中CRP、IL-8、VEGF水平高于血清，推測其原因，可能與子宮內膜異位癥主要發生在腹腔中有關。r-AFS是臨床評估子宮異位癥病情嚴重程度的重要指標，根據評分可判斷患者病情嚴重程度，從而指導臨床制訂針對性治療方案，改善患者預后。本研究中，隨著r-AFS分期的增加，子宮內膜異位癥患者血清、腹腔液中CRP、IL-8、VEGF水平逐漸增加，并且血清、腹腔液中CRP、IL-8、VEGF與r-AFS呈不同程度正相關，提示CRP、IL-8、VEGF與子宮內膜異位癥病情嚴重程度密切相關，早期檢測可作為評估患者病情進展的重要生化標志物，CRP、IL-8水平越高，炎性反應越顯著，病情也越嚴重，VEGF水平越高，提示新生血管生成越多，為內膜異位生長提供更多的血供，病情進展越快。

采用ROC曲線下面積評估血清CRP、IL-8、VEGF對子宮內膜異位癥的鑒別診斷價值，結果顯示，CRP、IL-8、VEGF單獨檢測診斷子宮內膜異位癥的靈敏度、特異性不高，可能造成誤診和漏診，而聯合檢測的結果顯示，靈敏度、特異性可達0.92、0.85，準確性為0.89。提示早期聯合檢測CRP、IL-8、VEGF鑒別診斷子宮內膜異位癥的價格較高。

綜上所述，血清、腹腔液CRP、IL-8、VEGF與子宮內膜異位癥發病密切相關，早期檢測可輔助臨床評估病情進展，血清CRP、IL-8、VEGF聯合檢測對鑒別診斷子宮內膜異位癥具有較高價值。

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