女性膀胱過度活動癥患者尿液中腦源性神經營養因子的表達及意義

張杰，潘永軍

(重慶市第九人民醫院泌尿外科，重慶 400700)

膀胱過度活動癥(overactive bladder，OAB)為以尿急為表現特征的癥狀群，在我國的發病率高[1]。患者常有夜尿、尿頻癥狀，有時還伴有急迫性尿失禁，尿流動力學上表現出逼尿肌的過度活動[2]。目前，臨床上尚缺乏準確、客觀、實用的檢測方法對OAB作出診斷和療效評估，診斷主要是根據患者的主訴與癥狀，通過完善相關檢查除外其它疾病進行排除性診斷。腦源性神經營養因子(brain-derived neurotrophic factor，BDNF)的生成主要是小型到中型的各種肽能神經細胞，非神經細胞也可以產生，比如膀胱上皮細胞[3]，是人身體內數量最多的神經營養因子之一。國外有研究[4]報道，女性OAB患者尿液中的BDNF表達水平高于對照組，并由此認為，BDNF可能成為OAB的生物診斷標記物。本研究旨在通過探討我國女性OAB患者尿液中BDNF的表達水平及其與OAB嚴重程度的相關性，為臨床能更確切診斷該病尋找新途徑及方法。

1 材料與方法

1.1 研究的對象

40例研究組對象來為自2015年2月至2016年5月在重慶市第九人民醫院泌尿外科泌尿外科診斷為OAB的女性患者，年齡18～59歲，平均年齡(36.5±7.8)歲。對照組30名女性為健康志愿者，年齡19～58歲，平均(34.3±7.6)歲。兩組年齡比較，差異無統計學意義(P>0．05)。全部研究對象都由院倫理委員會進行了嚴格的審查，并簽署了知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 診斷的標準 OAB的診斷標準參照《中國泌尿外科疾病診斷治療指南》[2]：特征表現為尿急，常常合并有尿頻、夜尿癥狀(每個夜間排尿≥2次，每晝夜排尿≥8 次)，膀胱排空后往往仍有尿意；常常合并有突然的強烈的緊迫排尿感，伴有或者沒有急迫性的尿失禁表現。尿動力學往往有逼尿肌的活動過度。

1.2.2 納入及排除標準 (1)納入標準：①患者女性，有尿急的癥狀，符合OAB診斷的標準；②尿常規檢查、尿培養檢查均為陰性；③按照膀胱過度活動癥的評分(overactive bladder symptom scores，OABSS)標準[5]，尿急癥狀得分≥2 分，總得分≥3 分。其中，3 分

1.2.3 BDNF的表達水平測定 在清晨膀胱充盈想排尿時，采集所有研究對象尿液30 mL(室溫)，離心10 min(4 ℃ 5 000 r/min)后，用1.5 mL的凍存管分裝上清液，每個尿液標本留取3份上，置-80 ℃冰箱保存備用。采用酶聯免疫吸附測定方法(enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)，嚴格按照試劑說明書操作檢測BDNF(ELISA試劑盒由鈺博生物有限公司提供)，每份尿液標本均進行3 次重復檢測，取平均數做為最終BDNF值，結果標準化采用BDNF/Cr值(pg/mg)為最后分析比較指標。

1.3 統計學分析

2 結果

2.1 尿液中BDNF/Cr表達水平

OAB組尿液中BDNF/Cr表達水平(892.1±420.7 pg/mg)顯著高于對照組(150.6±63.5 pg/mg)，差異有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 尿液中BDNF/Cr表達水平

*P<0.05，與對照組相比。

2.2 不同嚴重程度OAB患者尿液BDNF/Cr表達

根據OABSS評分，輕度、中度、重度OAB患者尿液BDNF/Cr平均值分別為(560.2±274.5)pg/mg、(825.3±402.6)pg/mg和(1148.5±510.2)pg/mg，兩兩比較，差異有統計學意義(P<0.05)。見表2。

組別例數尿液BDNF/Cr(pg/mg)輕度9560.2±274.5中度20825.3±402.6?重度111148.5±510.2#

*P<0.05，與輕度相比；#P<0.05，與中度相比。

2.3 尿液BDNF/Cr與OABSS的相關性

40例OAB患者尿液BDNF/Cr與OABSS呈正相關(r=0.619，P<0.01)，差異有統計學意義。見圖1。

3 討論

BDNF是由119個氨基酸殘基組成的一種堿性蛋白質，分子量為13.15道爾頓，含有3對二硫鍵[6]，主要是由肽能神經元細胞生成，也可由非神經元細胞產生，分布于周圍神經系統、中樞神經系統、內分泌系統、膀胱組織和骨等廣泛區域內，對神經元的發育、生長、分化、存活等起著十分重要的作用[7]，是人體內一種重要的神經營養因子。

BDNF除了與神經系統疾病如老年性癡呆、急性神經系統損傷等的發生和發展密切相關，也與泌尿系統疾病(如膀胱功能障礙)之間可能存在一定相關性。動物實驗研究發現[8]，在大鼠的膀胱內灌注環磷酰胺誘發膀胱炎，會導致大鼠膀胱里BDNF表達水平明顯升高，但如果將肉毒素A注射到膀胱壁則會降低BDNF的表達，進而降低大鼠膀胱逼尿肌反射性，改善大鼠的膀胱功能。另有研究[9-10]顯示，間質性膀胱炎/膀胱疼痛綜合征患者尿液中BDNF表達水平升高，在經過透明質酸治療或者膀胱內注射肉毒桿菌毒素治療后，其表達水平會顯著下降。還有研究[11]認為，膀胱感覺傳入神經中酪氨酸激酶受體B的激活可能和周圍組織中BDNF表達水平的升高密切相關。

OAB是泌尿系統的常見疾病，主要表現為膀胱功能障礙，其具體發病機制至今還未明確。近年來，神經營養因子在OAB中的作用受到越來越多學者的關注。國外Antunes-Lopes等[12-13]的研究發現，BDNF在健康志愿者尿液中的表達水平較低，而OAB患者尿液中的BDNF表達水平則顯著升高，且與尿液取樣時間(早晨、中午、晚上)無關。在3個月的行為方式調節治療后，隨著臨床癥狀的減輕，OAB患者尿液中BDNF的表達水平則明顯下降。國內胡浩等[14]發現，合并有OAB的良性前列腺增生患者的膀胱尿液BDNF表達水平升高明顯，且該組患者尿液中的BDNF表達水平與OAB癥狀嚴重的程度基本呈正相關性。Wang等[15]的研究也顯示，女性OAB人群尿液BDNF的表達水平比正常人明顯升高，而且尿液BDNF在診斷膀胱過度活動的敏感性等方面要優于神經生長因子，更適合作為OAB的診斷指標。

本研究在研究對象的選擇上采取了嚴格的排除標準，盡可能排除神經系統相關疾病對結果的干擾。結果顯示，40例女性OAB組尿液中BDNF/Cr的表達水平明顯高于對照組，且 BDNF/Cr與OABSS呈正相關(r=0.619，P<0.01)，與文獻報道[12-15]一致。根據OABSS評分，BDNF/Cr在輕、中、重度OAB患者尿液中表達水平分別為(560.2±274.5)pg/mg、(825.3±402.6)pg/mg和(1148.5±510.2)pg/mg，表明OAB患者尿液BDNF/Cr表達水平隨病情嚴重程度增加而升高。

綜上所述，女性OAB患者尿液中BDNF的表達水平明顯升高，且與病情嚴重程度有關。BDNF可能在OAB的發病機制中起著重要作用，有望成為診斷OAB的無創、有效、客觀的標記物。但女性健康人群尿液中BDNF正常值的參考范圍及女性OAB診斷臨界值的確定，仍有待更深入研究。