SDE-GC-MS法重現性及普洱茶發酵香氣變化研究

王利妍，郭天杰，石興云，蔣 賓，念 波，焦文文，王旭東，趙 明，馬 燕

(云南農業大學龍潤普洱茶學院，云南 昆明 650201)

【研究意義】普洱茶(Pu-erh tea)是以云南大葉種茶樹曬青毛茶為原料，經固態發酵(后發酵)等工序加工而成的茶葉產品[1]。陳香顯著是普洱茶的重要品質特征，也是決定其價格的重要條件[2]。基于對品質的重要影響以及獨特的香氣類型，普洱茶香氣物質分析得到了學者的廣泛關注。【前人研究進展】已有學者分別對普洱茶香氣物質組成[3]和微生物[4]對普洱茶香氣成分影響等進行了研究。發現普洱茶香氣重要特征在于發酵過程中形成了大量的1，2，3-三甲氧基苯、1，2-二甲氧基苯等顯陳香的甲氧基苯化合物[5]。已有研究采用同時蒸餾萃取法(Simultaneous-dist extraction，SDE)、頂空固相微萃取 (Headspace solid phase micro-extraction，HS-SPME) 、減壓蒸餾萃取 (Vaccum distillation extract，VDE)和超聲波輔助萃取分散液液微萃取 (Ultrasound-assisted extraction-Dispersive liquid-liquid microextraction-gas chromatography-mass spectrometry，UAE-DLLME)等方法提取普洱茶香氣物質。【本研究切入點】可能由于分析成本較高，呂才有[3]、曹艷妮[1,6]、趙苗苗[7]、Xu X[8]、Gong Z[9]等應用同時蒸餾萃取法(Simultaneous-dist extraction，SDE)只進行一次提取分析；李建勛[10]、陳保[11]、張靈枝[12]等應用頂空固相微萃取法(Headspace solid phase micro-extraction，HS-SPME)也只進行了一次提取分析；僅發現葉靜[4]、徐詠全[13]、張文杰[14]和Lv H[15]等人進行了重復提取，其他研究只進行了1次分析或未明確標示，較少關注重現性(Reproducibility )。重現性是評判一個試驗數據可信度的重要參數。由于在密閉系統以較高溫度萃取時次生反應劇烈[3]，同時蒸餾萃取法(Simultaneous-dist extraction，SDE)的重現性尤其值得關注。然而已有應用同時蒸餾萃取法(Simultaneous-dist extraction，SDE)結合氣相色譜-質譜聯用技術(Gas Chromatography-mass Spectrometry，GC-MS)對普洱茶香氣物質的研究，未進行重復實驗，因此有必要從重現性的角度考察評價該方法的準確性。……