針刺長強穴對大鼠脊髓損傷后神經源性膀胱順應性的影響

廖福金， 曾紅文， 楊海濤， 王葉芹， 吳旭晗

（廣州中醫(yī)藥大學附屬廣東省第二中醫(yī)院，廣東廣州 510095）

脊髓損傷后神經源性膀胱是指由于脊髓損傷而損害脊髓排尿中樞或周圍神經，繼而出現逼尿肌無反射、膀胱容量增加、尿液排出困難等的膀胱功能障礙。由此誘發(fā)的泌尿系統感染甚至腎功能衰竭等并發(fā)癥是脊髓損傷患者死亡的主要原因[1-3]。研究[4，5]顯示，脊髓損傷可以改變大鼠逼尿肌的興奮性，以及膀胱壓力和膀胱順應性，從而導致膀胱功能不全，引起尿潴留。臨床研究[6-10]表明，針灸治療對脊髓損傷后神經源性膀胱有明顯療效，主要是其雙向調節(jié)膀胱功能和防治尿路感染的功用。根據中醫(yī)經絡腧穴理論，長強穴為督脈穴位，位于后正中線，不僅是一種局部的穴位選擇，而且是治療膀胱疾病的經驗效穴，因此，我們選擇長強穴作為治療脊髓損傷后神經源性膀胱的研究穴位，探討其作用機理，現將研究結果報道如下。

1 材料與方法

1.1 動物 SD大鼠40只，雌性，SPF級，4～6周齡，體質量（200±20）g，由北京維通利華實驗動物技術有限公司提供，動物合格證號：11400700159018，動物許可證號：SCXK（京）2012-0001。大鼠飼養(yǎng)于廣東省中醫(yī)研究院SPF級動物實驗室，設施使用許可證號SYXK（粵）2010-0059。飼料配方為：普通飼料61%，蔗糖20%，熟豬油12%，奶粉5%，雞蛋2%。飼料由廣州中醫(yī)藥大學實驗動物中心提供。適應性喂養(yǎng)1周后，用于實驗。

1.2 藥品與試劑 水合氯醛溶液，國藥集團化學試劑有限公司，批號：20131031。青霉素鈉，哈藥集團制藥總廠，批號：15050401-2。

1.3 主要儀器 毫針，直徑0.2 mm×10 mm，蘇州醫(yī)療用品廠有限公司；F3導尿管，批號：150301J，上海上醫(yī)康鴿醫(yī)用器材有限責任公司；MP150-WSW型16通道生理記錄儀，美國BIOPAC公司。

1.4 分組及模型制備 將40只SD大鼠按照隨機數字表法隨機分為4組，即正常對照組、模型對照組、針刺治療組和針刺對照組，每組各10只。正常對照組常規(guī)飼養(yǎng)，不做任何處理。其余3組參照文獻[11]方法將30只SD大鼠制備成大鼠脊髓損傷后神經源性膀胱模型：大鼠腹腔注射水合氯醛300 mg/kg，麻醉成功后將大鼠俯臥位固定在鼠板上，下腹部在手術前盡量排空殘余尿，安爾碘消毒；以后緣正中線橫斷位置為中點做一長約3 cm的切口，發(fā)現T10位，暴露T9-T11的棘突和椎板，暴露脊髓，手術刀剪斷脊髓，切除1～2 mm節(jié)段脊髓，空洞內充填無菌明膠海綿，確保神經完全分離，止血縫合。術后再次進行膀胱排尿，術后1周腹腔注射青霉素鈉預防感染。術后自由進食，定期間歇人工輔助排尿，每日1次。術后1周，若大鼠脊髓損傷BBB評分[12]高于8分，則說明造模不成功。術后第12～14天是脊柱休克期，之后大鼠只有前肢參與行走，膀胱無抑制性收縮，膀胱最大容量明顯減少，出現尿潴留，表明脊髓損傷后神經源性膀胱模型成功，第15天開始實施干預處理。

1.5 治療方法 針刺組參考文獻[13]方法，模擬人體骨骼穴位，定位大鼠穴位。針刺治療組：定位：尾根與肛門之間的凹陷；針刺方法：75%酒精常規(guī)消毒大鼠皮膚后，以單針直刺6 mm，達到規(guī)定深度并留針20 min，每天1次，連續(xù)7 d。針刺對照組：治療尿潴留的穴位，據統計[14]臨床最多選取的是八髎、三陰交等穴位。因大鼠無八髎穴，故選擇三陰交為參照點。大鼠三陰交的位置在后肢內踝直上10 mm左右。針刺方法：75%酒精常規(guī)消毒大鼠皮膚后，以單針直刺4～5 mm，達到規(guī)定深度后留針20 min，每天1次，連續(xù)7 d。模型對照組造模后常規(guī)飼養(yǎng)，只捆綁不針刺。正常對照組不做任何處理。

1.6 尿動力學檢測 造模后和針刺干預1周后分別進行尿動力學檢測[15]。常規(guī)麻醉后大鼠取仰臥位，將多通道生理記錄儀與微量灌注泵及1根F3紅色導尿管經三通管連接，紅色導尿管經尿道口插入膀胱，擠壓膀胱盡量排盡殘余尿，再用同樣方法插入黑色導尿管，用注射器將溫鹽水以0.2 mL/min的速度從黑色導尿管注射入膀胱，從灌注開始到大鼠尿道外口漏尿的灌注量，即最大膀胱容量。本實驗將大鼠膀胱灌注前的膀胱壓力設定為零，直到大鼠尿道口的尿液滲漏的壓力，兩者之差即為最大膀胱壓力。記錄各大鼠的逼尿肌漏尿點壓力（設基礎值為零）、漏尿點膀胱容量（設基礎值為零），根據以上測得值，計算膀胱順應性，膀胱順應性=膀胱容量的變化值/膀胱壓力的變化值。

1.7 統計方法 采用SPSS 22.0統計軟件進行數據分析，計量資料用均數±標準差(±s)表示，多組間比較采用單因素方差分析，自身前后對照采用配對t檢驗。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 各組大鼠膀胱最大容量比較 表1結果顯示：治療結束后，與正常對照組比較，模型對照組大鼠膀胱最大容量值顯著升高，差異有統計學意義（P＜0.05）；與模型對照組和針刺對照組治療后比較，針刺治療組大鼠膀胱最大容量值明顯降低，差異均有統計學意義（P＜0.05）。結果提示：針刺長強穴可有效降低膀胱容量。

表1 各組大鼠治療前后膀胱最大容量值比較Table 1 Comparison of the maximum bladder capacity in various group before and after treatment （±s，V/mL）

表1 各組大鼠治療前后膀胱最大容量值比較Table 1 Comparison of the maximum bladder capacity in various group before and after treatment （±s，V/mL）

①P＜0.05，與正常對照組治療后比較；②P＜0.01，與模型對照組治療后比較；③P＜0.05，與針刺對照組治療后比較

治療后0.87±0.09 4.35±0.37①2.96±0.51②2.10± 0.52②③組別正常對照組模型對照組針刺對照組針刺治療組N 10 10 10 10治療前0.90±0.11 4.42±0.38 4.40±0.14 4.27±0.67

2.2 各組大鼠膀胱漏尿點壓力比較 表2結果顯示：治療后，與正常對照組比較，模型對照組大鼠膀胱漏尿點壓力值明顯升高，差異有統計學意義（P＜0.05）；與模型對照組和針刺對照組治療后比較，針刺治療組治療后膀胱壓力值明顯降低，差異有統計學意義（P＜0.05）。說明針刺長強穴可有效降低大鼠膀胱壓力。

表2 各組大鼠治療前后膀胱漏尿點壓力值比較Table 2 Comparison of the bladder leak point pressure in various group before and after treatment （±s，p/cmH2O）

表2 各組大鼠治療前后膀胱漏尿點壓力值比較Table 2 Comparison of the bladder leak point pressure in various group before and after treatment （±s，p/cmH2O）

①P＜0.05，與正常對照組治療后比較；②P＜0.01，與模型對照組治療后比較；③P＜0.05，與針刺對照組治療后比較

治療后8.82±0.69 27.43±3.74①26.24±5.83②20.97± 4.33②③組別正常對照組模型對照組針刺對照組針刺治療組N 10 10 10 10治療前8.95±0.67 28.64±3.81 28.59±5.95 28.13±2.32

2.3 各組大鼠膀胱順應性比較 表3結果顯示：治療后，與正常對照組比較，模型對照組大鼠膀胱順應性明顯降低，差異有統計學意義（P＜0.05）；與模型對照組和針刺對照組治療后比較，針刺治療組治療后膀胱順應性明顯升高，差異均有統計學意義（P＜0.05）。說明針刺長強穴可有效提高膀胱順應性。

表3 各組大鼠治療前后膀胱順應性比較Table 3 Comparison of bladder compliance in various group before and after treatment[（±s，p/（mL·cmH2O-1）]

表3 各組大鼠治療前后膀胱順應性比較Table 3 Comparison of bladder compliance in various group before and after treatment[（±s，p/（mL·cmH2O-1）]

①P＜0.05，與正常對照組治療后比較；②P＜0.01，與模型對照組治療后比較；③P＜0.05，與針刺對照組治療后比較

治療后0.083±0.007 0.028±0.009①0.047±0.022②0.069± 0.019②③組別正常對照組模型對照組針刺對照組針刺治療組N 10 10 10 10治療前0.083±0.008 0.027±0.010 0.032±0.015 0.026±0.016

3 討論

脊髓損傷后神經源性膀胱的治療原則是改善膀胱功能、減少并發(fā)癥，以提高患者的生活質量。目前，臨床上治療脊髓損傷后神經源性膀胱的常見療法，除了間歇性導尿和運動想象療法之外，還有骶神經根電刺激、中醫(yī)藥治療、盆底肌電刺激、手法輔助排尿等[16-18]?！端貑枴ば魑鍤狻吩唬骸鞍螂撞焕麨轳?，不約為遺溺”，神經源性膀胱引起的尿潴留和尿失禁被稱為“癃閉”和“遺溺”，說明了膀胱病變的分型及臨床主要表現。近年來，中醫(yī)藥[19，20]治療神經源性膀胱的方法研究取得了很大進展，在臨床上積累了豐富的經驗，內治法主要是中草藥，外治法包括針法、灸法和中醫(yī)外用藥。在針刺方面，常用的穴位首取督脈，可輔以華佗夾脊穴，佐以五腧穴、膀胱經穴位等。根據中醫(yī)經穴理論，“經絡所過，主治所及”，長強穴為督脈穴位，位于尾骶部，在第一中線上，既是局部的穴位選擇，也是治療膀胱疾病的驗穴，因此可選擇長強穴治療脊髓損傷后神經源性膀胱。

脊髓損傷使督脈之氣受阻，加上正氣虧耗，氣血運行不暢而發(fā)膀胱功能失約，排尿功能障礙。督脈聯絡足太陽膀胱經等經脈，起著“總督諸陽”的作用，被譽為“陽脈之?！保鹅`樞·經脈》云：“督脈之別，名曰長強，挾膂上項......別走太陽，入貫膂”。長強穴位于尾骨端與肛門之間，又名尾閭穴，為督脈別絡。督脈，諸陽脈長，其氣強盛。穴當其處，故名長強。故我們采用針刺長強穴治療，起到了激發(fā)督脈經氣，促進調整五臟功能，發(fā)揮其對膀胱氣化的制節(jié)和約束作用，調整膀胱開闔功能，使其節(jié)律有序。本研究采用針刺長強穴對大鼠脊髓損傷后神經源性膀胱的治療進行實驗研究，取得了較滿意的效果。

從現代醫(yī)學的角度來看，長強穴的淺層分布了尾部神經的后部，肛神經、陰部神經深支、肛門動脈和靜脈。對長強穴進行針刺刺激，使得盆腔組織器官或相應的神經纖維作出快速應答，通過傳入神經，反應性興奮脊髓初級排尿中樞，從而協調和控制逼尿肌和括約肌的聯合運動，最終改變膀胱和尿道功能障礙的狀態(tài)，并改善儲存尿液以及排尿的功能[21，22]。

從尿流動力學評價方面來說，針刺可改善尿流動力學，降低膀胱最大容量，降低膀胱壓力，增強膀胱順應性，從而治療尿失禁。由于針刺能調節(jié)膀胱的排尿功能，不僅能抑制膀胱的多種功能，還能刺激逼尿肌和尿道平滑肌，可改善膀胱逼尿肌乏力的狀態(tài)和尿道平滑肌的功能障礙，維持膀胱正常排尿功能[21]。

本研究結果表明，脊髓損傷后，針刺治療組大鼠在針刺長強穴后較針刺前膀胱壓力和膀胱容量下降，膀胱殘余尿量減少，膀胱順應性明顯升高，且針刺長強穴較針刺三陰交穴膀胱順應性明顯升高，差異均有統計學意義（P＜0.05），說明針刺長強穴可以顯著改善脊髓損傷后神經源性膀胱大鼠的排尿能力，改善膀胱功能。

綜上所述，針刺長強穴可顯著改善脊髓損傷后神經源性膀胱功能，通過膀胱容量、膀胱壓力、膀胱順應性變化闡述了脊髓損傷后神經源性膀胱的尿動力學改變，其作用機制可能和對效應器產生直接作用或對神經通路產生反饋作用，從而抑制亢進的膀胱功能、興奮逼尿肌及尿道平滑肌有關。